Heparanase e biomarcadores inflamatórios na degeneração do disco intervertebral

• Ano de defesa: 2014
• Autor(a) principal: Oliveira, Lilian Zerbinatti de [UNIFESP]
• Orientador(a): Pinhal, Maria Aparecida da Silva Pinhal [UNIFESP]
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• dARK ID: ark:/48912/001300002kwsc
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
• Palavras-chave em Português: degeneração do disco intervertebral; matriz extracelular; proteoglicanos; interleucina; ácido hialurônico catepsina b iii
• Link de acesso: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=1309672; http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/48324

Cerca de 10 milhões de brasileiros são acometidos pela dor lombar, cuja intensidade pode variar de um leve desconforto a dores incapacitantes e de longa duração. Muitos estudos apontam a degeneração do disco intervertebral como a principal causa de dor lombar. O processo degenerativo dos discos está associado à perda de moléculas da matriz extracelular e a mecanismos inflamatórios, que levam a alterações nas propriedades bioquímicas e biomecânicas do tecido. A ressonância magnética é o método mais utilizado para o diagnóstico da degeneração discal. Porém, alguns autores acreditam que este método não reflete alterações claras na morfologia do disco. A identificação de biomarcadores é fundamental para a abordagem da degeneração do discal, principalmente nos estágios iniciais da doença, quando as imagens de ressonância ainda não mostram alterações. Visto que há aumento de HPSE1 e HPSE2 em discos degenerados, dada a participação da heparanase em processos inflamatórios ea necessidade de biomarcadores para o diagnóstico da degeneração, tivemos o interesse em quantificar as expressões proteica e do RNAm das isoformas da heparanase em discos intervertebrais com diferentes graus de degeneração segundo a classificação de Pfirrmann e avaliar três candidatos a biomarcadores da inflamação no plasma de portadores da doença, que são interleucina-6 (lL-6), ácido hialurônico (AH) e catepsina B (CatB). Tais compostos foram avaliados por imunohistoquímica, expressão do RNAm e dosagens plasmáticas. Para isto, utilizamos alíquotas de sangue periférico e biópsias do disco intervertebral de pacientes com degeneração discal, pacientes saudáveis (não acometidos pela doença) e pacientes que sofreram fraturas acidentais da coluna vertebral. Resultados de estudo de nosso grupo evidenciaram o aumento da expressão das isoformas da heparanase, HPSE1 e HPSE2, sugerindo a participação destas proteínas no remodelamento da matriz extracelular e inflamação crônica, características da doença. A expressão proteica das isoformas da heparanase, por quantificação de reações de imunohistoqulmica, apresentou aumento significativo proporcional ao grau de degeneração dos discos. Similarmente, a expressão do RNAm de HPSE1 e HPSE2, foi significativamente maior em discos degenerados do que nos não degenerados, sugerindo uma correlação destas proteínas com o avanço da doença. Os níveis plasmáticos de IL-6 foram significativamente maiores em pacientes com degeneração discal comparativamente com indivíduos saudáveis e este resultado reflete o perfil desta citocina no tecido do disco, confirmado por imunohistoquímica. Assim como a IL-e6, os níveis plasmáticos de AH foram significativamente maiores em pacientes com degeneração disca! em comparação com indivíduos saudáveis, o que pode ser explicado pela redução significativa da expressão do RNAm das isoformas da hialuronidase (HYAL 1 e HYAL2). Apesar do aumento da expressão proteica de CatB no tecido de discos degenerados em relação aos discos não degenerados, tal diferença não foi observada quando avaliamos a atividade plasmática de CatB. Os dados deste estudo sugerem que a CatB parece não representar um marcador característico do processo de inflamação crônica na degeneração discal, enquanto IL-6 e AH são potenciais biomarcadores para prognóstico/diagnóstico da doença, bem como a expressão aumentada das