Culturas oxidadoras de metano provenientes de ambientes aquáticos brasileiros e seu potencial para a produção de polihidroxialcanoatos

• Ano de defesa: 2018
• Autor(a) principal: Soares, Juliana Aparecida Bomjardim [UNIFESP]
• Orientador(a): Nakayama, Cristina Rossi [UNIFESP]
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• dARK ID: ark:/48912/0013000027t0d
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo
• Palavras-chave em Português: PHB; PHA; Bactérias metanotróficas; Biopolímeros; Metano
• Palavras-chave em Inglês: PHB; PHA; Methanotrophic bacteria; Biopolymers; Methane
• Link de acesso: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=6616534; https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/52569

Os microorganismos têm papel chave no ciclo do metano. Arqueias metanogênicas produzem a maior parte do metano biogênico do planeta, em ambientes anaeróbios. As bactérias metanotróficas aeróbias utilizam o metano como fonte de carbono e energia, sendo responsáveis pelo consumo do gás em ambientes terrestres e aquáticos, além de possuírem potencial para a produção de polihidroxialcanoatos (PHA). Este estudo teve como objetivo estudar culturas metanotróficas enriquecidas de ambientes aquáticos brasileiros, visando promover e caracterizar a produção de PHB a partir de metano. Para isso, foi adotada uma abordagem que alia técnicas dependentes e independentes de cultivo. As culturas de interesse foram identificadas através do sequenciamento de nova geração do gene RNAr 16S em plataforma Illumina MiSeq. A detecção e quantificação de genes indicadores de metanotrofia e produção de PHA (pmoA e phaC, respectivamente) foram feitas por meio da técnica PCR. A coloração com vermelho do Nilo e a microscopia de fluorescência foram utilizadas como indicadores da produção de polihidroxibutiratos. Os resultados indicaram a presença dos genes pmoA e phaC em todas as culturas analisadas. A avaliação inicial com vermelho do Nilo indicou a presença de PHA’s associada ao consumo de metano nos cultivos de interesse. Os resultados referentes ao sequenciamento indicam a dominânica do gênero metanotrófico Methylocystis (38,8% - 75,%) em três, dos cinco cultivos estabelecidos. Um dos cultivos, RB-5 foi selecionado para a realização de um ensaio de produção em frasco agitado. A acumulação de polímeros foi quantificada por meio de cromatografia gasosa. Foram construídas curvas de crescimento para a determinação da atividade metanotrófica. Os resultados referentes ao ensaio de produção evidenciam uma baixa acumulação dos polímeros poli-3-hidroxibutirato e poli-3-hidroxivalerato pela cultura RB-5. Espera-se que o trabalho contribua para a posterior realização de ensaios visando a otimização da produção de polímeros pela cultura RB-5.