Investigação de rearranjos cromossômicos no gene BRAF em carcinomas pediátricos da tiroide

• Ano de defesa: 2017
• Autor(a) principal: Sisdelli, Luiza de Mello Oliveira [UNIFESP]
• Orientador(a): Cerutti, Janete Maria [UNIFESP]
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• dARK ID: ark:/48912/001300002fbht
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
• Palavras-chave em Português: Câncer da tiroide; Genética do câncer; Mutações; Rearranjos cromossômicos
• Palavras-chave em Inglês: Cancer of the thyroid; Cancer genetics; Mutations; Chromosomal rearrangements
• Link de acesso: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=5022141; http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/50209

A incidência de carcinoma da tiroide, principalmente do subtipo histológico papilífero (CPT), aumentou na maioria das populações, incluindo pacientes pediátricos. As alterações genéticas que conduzem à ativação da via MAPK são altamente prevalentes no CPT. Tem sido demonstrado que a mutação BRAF V600E é a mais frequente no CPT adulto (~40%). No entanto, essa alteração é raramente identificada no CPT pediátrico. Em contraste, rearranjos cromossômicos envolvendo BRAF têm sido identificados, principalmente,no CPT pediátrico exposto à radiação. Nosso grupo descreveu a presença da fusão AGK/BRAF pela primeira vez em CPT pediátrico esporádico, sugerindo que rearranjos neste gene podem ser um mecanismo alternativo de ativação alterada de BRAF em casos pediátricos. Desse modo, o objetivo deste trabalho foi investigar rearranjos envolvendo BRAF na faixa etária pediátrica. Na primeira parte do estudo, realizamos a investigação em 22 CPTs pediátricos, por FISH break-apart (FISH BA), 5’RACE e sequenciamento. A técnica de FISH BA revelou quatro casos positivos para a quebra no gene BRAF, nas proporções de 10%, 11%, 17% e 36% das células do tumor primário portando o rearranjo. A partir de 5’RACE e sequenciamento, foi possível identificar o rearranjo AGK/BRAF em uma delas. Na segunda parte do estudo, a casuística foi aumentada para 52 pacientes. Foi realizada uma triagem para a fusão AGK/BRAF por RT-PCR. A mutação BRAF V600E foi investigada por PCR e sequenciamento. A fusão AGK/BRAF foi identificada em 27% dos casos e associada com pacientes mais jovens, e a mutação BRAF V600E, em 8% e associada com pacientes mais velhos. CPTs com alterações em BRAF tendem a ter um comportamento biológico mais agressivo.