Influência do Glicocálix na internalização celular de nanopartículas de sílica recobertas por albumina

• Ano de defesa: 2025
• Autor(a) principal: Assis, Isabela Ferreira de [UNIFESP]
• Orientador(a): Sousa, Alioscka Augusto [UNIFESP]
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• dARK ID: ark:/48912/001300002ms77
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo
• Palavras-chave em Português: Endocitose; Interação corona-célula; Albumina catiônica; Albumina aniônica
• Link de acesso: https://hdl.handle.net/11600/73781

A nanomedicina tem como um de seus principais objetivos o desenvolvimento de nanopartículas (NPs) para uma ampla gama de aplicações biomédicas. Nas últimas décadas, diversos estudos foram realizados para caracterizar e compreender as interações entre NPs e células, com destaque para a investigação dos fatores que influenciam a endocitose dessas partículas, visando seu uso como veículos para a entrega intracelular de fármacos. Nesse contexto, o entendimento dos mecanismos que regulam a endocitose das NPs tornou-se um dos principais focos de pesquisa na área. Diversos fatores podem influenciar as interações entre NPs e células, bem como os processos endocíticos associados. Um desses fatores é a formação da corona proteica, uma camada de proteínas fortemente adsorvida na superfície das NPs, que desempenha um papel crucial ao mediar as interações entre as partículas e as células. Outro fator relevante que afeta essas interações e a endocitose das NPs são os glicosaminoglicanos (GAGs) com carga negativa presentes no glicocálix celular, uma rede de açúcares que recobre a membrana plasmática. O glicocálix pode tanto atuar como uma barreira quanto facilitar a endocitose, dependendo das características específicas das NPs. Embora seja um componente essencial, poucos estudos investigaram até agora como o glicocálix influencia a internalização celular de NPs. Neste contexto, o presente trabalho explorou o papel dos GAGs na endocitose de NPs de sílica com 50 nm de diâmetro, recobertas por diferentes coronas: albumina bovina (BSA), albumina catiônica (BSA+), albumina aniônica (BSA-), e soro fetal bovino (FBS). Ensaios biofísicos foram realizados para caracterizar as coronas adsorvidas e suas interações com a heparina, utilizada como modelo de GAG. Os ensaios de endocitose das NPs ocorreram em células CHO-K1 (selvagem) e pgsA-745 (mutante deficiente em GAGs). Além disso, o modelo CHO-K1 foi submetido a tratamentos enzimáticos para remoção de GAGs específicos, tratamentos químicos/farmacológicos, e ensaios de competição na presença de heparina. Os resultados dos ensaios biofísicos revelaram interações atrativas entre a heparina e as NPs recobertas com BSA, BSA+ e FBS. Essas interações contribuíram para que o glicocálix atuasse como um facilitador na internalização das NPs nos experimentos de endocitose. Por outro lado, na ausência de interações atrativas entre a heparina e NPs recobertas com BSA-, o glicocálix desempenhou o papel de barreira, dificultando a captação celular das partículas. Desta maneira, destaca-se a importância de compreender as interações albumina-glicocálix para um melhor planejamento e, consequentemente, a otimização de sistemas de administração de medicamentos baseados em albumina ao seus alvos terapêuticos.