Avaliação do perfil proteômico do fungo patogênico Paracoccidioides brasiliensis após tratamento com fludioxonil

• Ano de defesa: 2025
• Autor(a) principal: Manfio, Pedro Henrique Corteletti [UNIFESP]
• Orientador(a): Batista, Wagner Luiz [UNIFESP]
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• dARK ID: ark:/48912/001300002j25k
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo
• Palavras-chave em Português: Paracoccidioides brasiliensis; Proteômica; Atividade mitocondrial; Dimorfismo; Histidina quinase; Mitochondrial activity; Dimorphism; Histidine kinase
• Link de acesso: https://hdl.handle.net/11600/73963

O fungo Paracoccidioides brasiliensis é um dos principais agentes etiológicos da paracoccidioidomicose, uma micose sistêmica endêmica na América Latina. P. brasiliensis é um fungo termo dimórfico, processo crucial para sua patogenicidade. Neste estudo, utilizando uma abordagem proteômica nós investigamos as respostas adaptativas de P. brasiliensis quando exposto a fludioxonil, um inibidor de histidina quinase do grupo III. Duas análises proteômicas foram realizadas: uma do extrato total e outra da parede celular utilizando o método da biotinilação. A análise do extrato total permitiu a identificação de aproximadamente 4.000 proteínas, representando cerca de 50% do proteoma do fungo. As análises estatísticas demonstraram excelente reprodutibilidade e identificaram diferenças significativas entre os grupos controle e tratados. A biotinilação foi utilizada para marcar e purificar proteínas de parede celular, facilitando a análise detalhada de suas funções e interações. Este método permitiu a obtenção de proteínas de parede celular biotiniladas de alta pureza, essenciais para a análise subsequente por espectrometria de massas (LC-MS/MS). A análise do proteoma total revelou a modulação positiva de proteínas envolvidas com a resposta ao estresse osmótico e na fosforilação oxidativa, como as proteínas PADG_04699 e PADG_03516 (NADH desidrogenase) e PADG_07475 e PADG_08013 (succinato desidrogenase). Adicionalmente, foi observada modulação no potencial de membrana mitocondrial e aumento da atividade de catalase, indicando uma resposta adaptativa ao estresse oxidativo induzido pelo fludioxonil. A análise da fração enriquecida de proteínas da parede celular revelou alterações na expressão de enzimas relacionadas ao metabolismo de carboidratos, com diminuição da manosiltransferase e da quitinase, sugerindo um remodelamento da parede celular. Este estudo contribui para o entendimento dos mecanismos de regulação proteica e do remodelamento da parede celular em P. brasiliensis, identificando potenciais alvos farmacológicos para o tratamento da PCM.