Caracterizacao estrutural e imunoquimica de glicoinositol fosforilceramidas de Aspergillus fumigatus: efeito de inibidores de sintese de glicoesfingolipideos em fungos patogenicos

• Ano de defesa: 2006
• Autor(a) principal: Guimaraes, Luciana Lopes [UNIFESP]
• Orientador(a): Takahashi, Helio Kiyoshi [UNIFESP]
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• dARK ID: ark:/48912/0013000029hbf
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
• Palavras-chave em Português: Fungos; Glicoesfingolipídeos; Glucosilceramidas; Patogenicidade
• Link de acesso: http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/21043

A busca de alternativas para novas terapias antifúngicas levou o nosso laboratório ao isolamento e caracterização estrutural de glicoesfingolipídeos (GSLs) específicos presentes apenas em fungos e ausentes em mamíferos. Analisamos as estruturas moleculares de glicoinositol fosforilceramidas (GIPCs) do fungo oportunista Aspergillus fumigatus. GSLs foram extraídos e purificados por uma combinação de DEAE-Sephadex, HPLC e HPTLC preparativa. As estruturas foram elucidadas por análises realizadas utilizando GC/MS, ESI/MS e NMR. Foram descritas as estruturas de GIPCs presentes em Aspergillus fumigatus: Af-2: Manpalfa 1flecha3 Manpalfa 1flecha 2InsPCer Af-3a: Galfbeta1 flecha 6Manpalfa1 flecha 3Manpalfa1 flecha 2InsPCer Af-3b: Manpalfa1 flecha (Galfbeta1flecha6)Manpalfa 1 flecha 2InsPCer Af-3c: Manpalfa1 flecha 3Manpalfa 1 flecha 6GlcpNalfa1 flecha2InsPCer Af-4:Galfbeta 1flecha Manpalfa1flecha3(Galfbeta1flecha6)Manpalfa 1flecha2InsPCer apresentaram reatividade com soros de pacientes com aspergilose, provavelmente o resíduo terminal de Galf seria o componente antigênico reconhecido por anticorpos presentes nestes soros. Esta é a primeira descrição de GIPCs com as estruturas glicanas de Af-3a e Af-4. As estruturas Af-2 e Af-3b foram anteriormente descritas em Paracoccidiodes brasiliensis (Pb-2 e Pb-3, respectivamente). Af-3c foi previamente descrito em S. schenckii (Ss-Y6). Estes resultados indicam novos caminhos que poderiam levar ao desenvolvimento de metodologias mais eficientes no imunodiagnóstico diferencial de aspergiloses, aumentando a especificidade dos protocolos utilizados no momento. Para um melhor entendimento da importância e do papel dos GSLs na biologia de diferentes fungos, inibidores da GlcCer sintase e IPC sintase foram testados em culturas de diferentes fungos patogênicos. A adição do inibidor de GlcCer sintase, D-P4, foi eficaz na inibição do crescimento em todas as espécies de fungos estudadas nesta tese: Paracoccidioides brasiliensis, Histoplasma capsulatum, Sporothrix schenckii e Criptococcus neoformans. O inibidor de IPC sintase, Aureobasidina A (AbA), também se mostrou eficaz na inibição do crescimento destes fungos. AbA (40µM) inibiu em 100% o crescimento de P. brasiliensis, H. capsulatum e C. neoformans, no entanto, em S. schenckii verificou-se que esta mesma dose inibiu apenas 50% do crescimento. Tanto D-P4 quanto AbA, foram capazes de inibir a transição levedura-micélio em P. brasiliensis e H. capsulatum. Os resultados apresentados abrem perspectivas promissoras para novas terapias antifúngicas baseadas na inibição específica da síntese de GSLs de fungos.