Participação da formação hipocampal dorsal na modulação do medo condicionado: análise comportamental e proteica

• Ano de defesa: 2018
• Autor(a) principal: Gaiardo, Renan Barretta [UNIFESP]
• Orientador(a): Cerutti, Suzete Maria [UNIFESP]
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• dARK ID: ark:/48912/001300002tw3t
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo
• Palavras-chave em Português: Memória; Perfil proteico; Proteômica; Supressão condicionada Western
• Palavras-chave em Inglês: Memory; Protein profile; Proteomic; Conditioned suppression Western blotting
• Link de acesso: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=7374744; https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/52853

Dados comportamentais e moleculares de nosso laboratório evidenciaram que a formação hipocampal participa da formação da memória da supressão condicionada da resposta de lamber. Porém, não esclarece sobre os substratos moleculares envolvidos nas diferentes etapas do processo de formação e de evocação da memória estudada, na sua extinção e no processo de transferência de memória a longo prazo do hipocampo para outras estruturas corticais. Neste sentido, o objeto do trabalho foi estudar as alterações proteicas subjacente à aquisição, evocação e extinção da memória do medo condicionado na formação hipocampal dorsal e ventral de ratos submetidos ao teste da supressão da resposta de lamber. Para este estudo, foram utilizados ratos Wistar, machos, adultos, distribuídos aleatoriamente em dez grupos, divididos em dois experimentos. Após a aquisição da resposta de lamber (5 dias), cada rato era submetido a quatro associações entre som-choque com cinco minutos de intervalo (6º dia). A supressão do comportamento de lamber foi medida através de consecutivas apresentações do EC, no teste. O tempo utilizado para completar 10 lambidas na presença e na ausência do EC, no teste, foi utilizado para cálculo da taxa de supressão (TS) para cada animal. Para o experimento 1, foi comparado o perfil proteico da formação hipocampal dorsal dos animais testados 2 ou 40 dias após o condicionamento e com tempo de eutanásia de 24 horas após o teste. Os dados mostram que os animais adquiriram a memória do medo condicionado e que este evento vai ganhando um novo significado ao longo do tempo, o som deixa de indicar algo perigoso e retoma o seu significado original. Ainda mostram pela primeira vez que o teste realizado 40 dias após o treino não interfere na retenção da tarefa, considerando que os animais apresentaram valores da TS iguais aos demais controles. A análise do perfil proteico resultou em 1.165 proteínas identificadas e 265 quantificadas, sendo que 38 tiveram expressão diferencial significante e sete proteínas foram exclusivas. A análise de interação de proteínas indicou alterações nas vias de bainha de mielina, geração e diferenciação neuronal, regulação da neurogênese e do transporte de vesículas sinápticas, desenvolvimento axonal e o cone de crescimento. Para o experimento 2, foi analisada a expressão de sete proteínas de vias distintas de transdução de sinal em dois tempos de eutanásia (1 e 24 horas) em diferentes etapas do protocolo experimental: condicionamento, teste de retenção da aquisição (1 ou 10 tentativas) e teste da retenção da extinção. Os dados indicaram que a aquisição, consolidação e extinção da supressão condicionada compreende em mudanças morfológicas na formação hipocampal dorsal e ventral e altera a expressão de BDNF, calcineurina A, CaMKII, canal de cálcio, CREB, PI3K e PKC, proteínas que estão envolvidas na potenciação a longo prazo, principal alteração celular para a consolidação das memórias.