Investigação da proteína anti-inflamatória Anexina A1 em culturas de explantes de vilos placentários humanos infectados por Toxoplasma gondii

• Ano de defesa: 2015
• Autor(a) principal: Cardoso, Marystela Fávero de Oliveira [UNIFESP]
• Orientador(a): Oliani, Sonia Maria [UNIFESP]
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• dARK ID: ark:/48912/0013000025p1k
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
• Palavras-chave em Português: Processo inflamatório; Proteína Anexina A1; Células cultivadas; Ciclo-oxigenase 2; Dinoprostona
• Palavras-chave em Inglês: Toxoplasma gondii; Inflammatory process; Protein Annexin A1; Explant culture; COX-2; PGE2
• Link de acesso: http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/47973; https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=3674895

Introdução - No desenvolvimento placentário são intensos os processos de invasão, diferenciação e adaptação que ocorrem no organismo. Algumas complicações estão relacionadas com o desenvolvimento inadequado da placenta, como a expressão aumentada de citocinas tipo Th2, que podem causar maior susceptibilidade à toxoplasmose, consequentemente, à infecção placentária e fetal. Várias investigações indicam que entre as ações anti-inflamatórias da proteína anexina A1 (ANXA1) está a redução dos níveis das citocinas. Essa proteína também tem sido associada com processos proliferativos e apoptóticos, e estudos indicam que suas ações podem ser mediadas pelos receptores para peptídeos formilados (FPR). Embora os efeitos anti-inflamatórios da ANXA1 e do peptídeo Ac2-26, tenham sido explorados em diversas investigações, suas atividades durante o desenvolvimento placentário ainda não estão completamente esclarecidas. Objetivos -Considerando esses aspectos, avaliamosa ANXA1 em culturas de explantes dos vilos placentários humanos, de terceiro trimestre, infectados ou não com Toxoplasma gondii. Ainda, os explantespós-infecção foram tratados com o peptídeo Ac2-26.Métodos? Os vilos coriônicos placentários foram cultivados em meio RPMI suplementado, incubados a 37o C em estufa com 5% de CO2 e, após, infectados ou não com a cepa RH de T. gondii. Após 48 horas da infecção, as amostras foram tratadas com o peptídeo Ac2-26 por 24 horas, fixadas, incluídas em parafina e analisadas histologicamente. Nesses explantes analisamos imuno-histoquímicamente as expressões da ANXA1, dos receptores FPR1 e FPR2, da enzima COX-2 e do T. gondii. Nos explantes tratados com Ac2-26, investigamos a taxa de parasitismo por ensaio colorimétrico de ?-galactosidase, a expressão gênica de ANXA1 e os níveis de PGE2 pelo método de ELISA. Resultados - Nas análises histopatológicas dos vilos placentários, infectados com T. gondii,observamos a presença de células inflamatórias e taquizoítas e, no pós-tratamento com o peptídeo Ac2-26,diminuição dos parasitos intracelulares por meio da técnica de ?-galactosidase. A expressão da proteína ANXA1, coincidente com o receptor FPR1, foi detectada no epitélio trofoblásticodos grupos controle e infectado. Ainda, nos explantes pós-infecção e pós-tratamentocom Ac2-26 a imunorreatividade foi observada no sinciciotrofoblasto. Não houve imunomarcação para o receptor FPR2. A expressão gênica para ANXA1 não diferenciou entre os grupos sem tratamento e tratados com Ac2-26 (30 ?M). Coincidente com a redução da infecção, após administração do peptídeo, também houve redução da expressão de COX-2 e dos níveis de PGE2.Conclusão - Em conjunto, nossos dados mostram que o peptídeo Ac2-26 induzefeito antiparasitário em modelo experimental de explantes de vilos placentários humanos. Nesse contexto, o receptor FPR1, COX-2 e PGE2podem estar envolvidos no controle da infecção por T. gondii.