Expressão de miRNAs relacionados com a proliferação de precursores neuronais durante desenvolvimento cerebelar

• Ano de defesa: 2019
• Autor(a) principal: Nakamura, Thabatta Karollynne Estevam [UNIFESP]
• Orientador(a): Porcionatto, Marimelia Aparecida [UNIFESP]
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• dARK ID: ark:/48912/001300002ck93
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
• Palavras-chave em Português: MicroRNAs; Precursores de células granulares; Via de sinalização SHH; Desenvolvimento cerebelar; Espécies reativas de oxigênio
• Palavras-chave em Inglês: MicroRNAs; Granular cell precursors; SHH signaling pathway; Cerebellar development; Reactive oxygen species
• Link de acesso: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=7628591; https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/59717

O cerebelo maduro possui córtex dividido em três camadas bem definidas que começam a ser formadas durante o período embrionário e com término no período pós-natal. Os precursores de células granulares (PCG), que originam os neurônios mais abundantes do cerebelo, passam por processo de maturação durante o período de desenvolvimento pós-natal. A proliferação de PCG é induzida pelo fator morfogênico sonic hedgehog (SHH), produzido e secretado pelas células de Purkinje. A ativação da via do SHH ativa os fatores de transcrição GLI e MYCN. A superexpressão desses fatores está relacionada ao desenvolvimento de meduloblastoma, tumor cerebelar que acomete principalmente crianças. Os microRNAs (miRNAs) têm papel na regulação de diversos processos celulares, incluindo proliferação, diferenciação e desenvolvimento tumoral. Contudo, pouco tem sido estudado a respeito da proliferação de PCG induzida por espécies reativas de oxigênio (ERO) bem como da expressão de miRNAs durante a fase proliferativa de PCG. Nosso laboratório descreveu um camundongo mutante que apresenta aumento da produção de ERO como consequência de mutação pontual em Nox3, o camundongo Nox3eqlb. Essa linhagem murina exibe fenótipo de ataxia, com citoarquitetura cerebelar anormal devido à proliferação excessiva de PCG e células de Purkinje desorganizadas e com árvores dendríticas pouco desenvolvidas. Este projeto objetivou analisar a expressão de miRNAs preditos de regularem genes alvo da via de sinalização SHH durante proliferação induzida por ERO em PCG. Usando estratégias de bioinformática para selecionar os miRNAs, e qPCR para quantificar a expressão em PCG, sugerimos a ocorrência de uma regulação da biogênese de miRNAs pelas ERO produzidas pelo complexo enzimático NADPH oxidase. Camundongos Nox3eqlb apresentam perfil de expressão similar para todos os miRNAs estudados durante o desenvolvimento, enquanto que observamos diferentes perfis para os diferentes miRNAs expressos pelo camundongo selvagem BALB/c. Adicionalmente, a inibição da produção de ERO pelas NOX por apocinina, mostrou redução da expressão de miRNAs de forma tempo-dependente. Assim, em conclusão, observamos que em PCG, a biogênese dos miRNAs preditos de regularem genes alvo da via do SHH, parece estar relacionada à atividade de NOX, mas ainda é incerto os mecanismos destas interações, sendo necessários novos estudos para desvendá-los.