Hemoderivados como suplemento no meio de cultivo para células-tronco dentárias humanas

• Ano de defesa: 2011
• Autor(a) principal: Pisciolaro, Ricardo Luiz [UNIFESP]
• Orientador(a): Duailibi, Silvio Eduardo [UNIFESP]
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• dARK ID: ark:/48912/001300001tp6n
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
• Palavras-chave em Português: Células-tronco adultas; Meios de cultura; Proliferação de células; Técnicas de cultura de células; Engenharia tecidual; Polpa dentária
• Palavras-chave em Inglês: Dental pulp; Adult stem cells; Culture Media; Cell proliferation; Cell culture techniques; Tissue engineering
• Link de acesso: http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/9687

Introdução: Um dos objetivos da Medicina é superar os danos causados ao organismo por doenças, senilidade e traumas, restabelecendo um equilíbrio normo-funcional. Nas perdas teciduais, inúmeros autores afirmam que o substituto "ideal" é o próprio tecido saudável, de mesma origem ou o tecido produzido por Engenharia Tecidual (ET). Porém, ainda são necessárias muitas pesquisas para a utilização in vivo. Objetivo: Avaliar três suplementos hemoderivados, empregados em meios de cultivo, quanto à proliferação celular e o dano celular de células-tronco de origem dentária. Métodos: Foram realizados cinco experimentos a partir de dentes terceiros molares em desenvolvimento. Após a digestão enzimática, as células-tronco adultas foram cultivadas em quatro diferentes meios de cultivo. Meio I, isento de suplemento hemoderivado; meio II, suplementado com FBS (heterólogo); meio III, suplementado com soro humano homólogo; meio IV, suplementado com soro humano autólogo. Essas culturas foram analisadas comparativamente quanto à proliferação celular, submetidas a testes com marcadores Von Kossa e Alizarina Vermelha durante quatro semanas (avaliadas semanalmente) e a cada duas semanas quanto às unidades formadoras de colônias (UFCs). No 28º dia as quatro culturas foram submetidas ao teste do ¿cometa¿, analisando-se possível dano no DNA celular. Os resultados foram submetidos à análise estatística de Variância de Friedman, estabelecendo-se significância para (p) = a 5%. Resultados: O meio de cultivo IV atingiu uma proliferação celular superior ao Meio I, demonstrando um resultado significante (p*=0,0074). O meio de cultivo II, mostrou proliferação superior ao meio I e desenvolvimento semelhante ao meio III, porem nenhum demonstrou significância em relação ao meio IV. Os resultados do teste do cometa evidenciaram um menor dano celular nas culturas do meio IV em relação ao meio II e meio III. As UFCs foram numerosas nos meios IV e III respectivamente, havendo maior índice de mineralização no meio IV do que nos meios II e III. Conclusão: O meio de cultivo suplementado com hemoderivado autólogo favoreceu significativamente a proliferação celular. O hemoderivado humano mostrou-se viável como suplemento nas culturas de células-tronco dentárias humanas.