Atividade celulolítica e proteolítica de bactérias isoladas do trato gastrointestinal e do processo de compostagem dos restos orgânicos de hipopótamo

• Ano de defesa: 2013
• Autor(a) principal: Ramos, Geomarcia Feitosa da Cruz [UNIFESP]
• Orientador(a): Vasconcellos, Suzan Pantaroto de [UNIFESP]
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• dARK ID: ark:/48912/001300001p667
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo
• Palavras-chave em Português: FPpase; Hipopótamo; Compostagem; Sondas peptídicas; MALDI-TOF
• Palavras-chave em Inglês: FPase; Hippopotamus; Composting; Peptide probes; MALDI-TOF
• Link de acesso: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=89834; http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/46852

A prospecção de microrganismos produtores de celulases e proteases é uma das estratégias promissoras para a obtenção de biocatalizadores potentes para processos que exijam a hidrólise de materiais lignocelulósicos e resíduos ricos em proteínas, contribuindo assim para a viabilização da produção de etanol de segunda geração a partir de diferentes fontes. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi investigar a habilidade celulolítica e proteolítica de bactérias isoladas a partir de amostras coletadas do trato gastrointestinal de hipopótamo e da compostagem dos seus resíduos orgânicos. Os isolados bacterianos foram obtidos a partir do plaqueamento das amostras em diferentes meios de cultura e temperaturas de incubação, seguindo-se a ensaios qualitativos segundo metodologia descrita por Hankin & Anagnostakis (1975) e quantitativos (FPase), de acordo com adaptação de método proposto por Xiao et al. (2004), para a detecção das habilidades celulolíticas das cepas. Paralelamente, análises para a detecção da atividade proteolítica também foram realizadas, utilizando-se triagens rápidas de alto desempenho baseadas no uso de sondas fluorescentes de acordo com metodologia reportada por Oliveira et al. (2012). Nos experimentos qualitativos, foram obtidos 70 hits positivos dentre 159 isolados bacterianos avaliados, os quais após ensaios para a quantificação do potencial celulolítico (FPase), 44% dos isolados foram selecionados, sendo que 7% (FPZSP_CTT 685; FPZSP_CTT 651; FPZSP_CTT 662; FPZSP_CTT 621; FPZSP_CTT 636) apresentaram em média valores de até 12,8 FPU/mL, tais como o controle positivo adotado, ou seja, Trichoderma reesei. Com relação à atividade proteolítica, 8 linhagens apresentaram valores de atividade relativa acima de 10%, superando resultados descritos pela literatura. Análises moleculares baseadas na identificação do rDNA 16S, aliadas à resultados de espectrometria de massa por MALDI-TOF revelaram que a maioria dos isolados selecionados através dos ensaios enzimáticos realizados pertenciam ao gênero Bacillus sp. Em suma, a partir dos resultados obtidos, pode-se afirmar que a microflora analisada constituiu importante fonte de biocatalistas interessantes a futuras investigações quanto à sua aplicação industrial, visando atividades celulolíticas e proteolíticas.