Efeitos do resveratrol isolado e/ou combinado ao ranelato de estrôncio no tecido ósseo de ratas ooforectomizadas e o perfil genotóxico destes tratamentos

• Ano de defesa: 2016
• Autor(a) principal: Beirão, Dhyôvanna Carine Cardoso [UNIFESP]
• Orientador(a): Reginato, Rejane Daniele [UNIFESP]
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
• Palavras-chave em Português: Resveratrol; Ranelato de estrôncio; Tecido ósseo; Ratas ooforectomizadas genotoxidade
• Palavras-chave em Inglês: Resveratrol; Strontium ranelate; Bone tissue; Oophorectomized rats; Genotoxicity
• Link de acesso: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=4016437; http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/47717

Avaliar os efeitos do resveratrol (RSV) isolado ou combinado (SrR+RSV) com ranelato de estrôncio (SrR) no tecido ósseo de ratas ooforectomizadas, e o perfil genotóxico destes tratamentos. Métodos: 32 ratas adultas Wistar com 6 meses de idade foram ooforectomizadas (OVX) e 8 sham-operadas (Sham). Após 3 meses, os animais foram divididos em 5 grupos: Sham: tratadas com solução veículo; Controle: OVX e tratadas com solução veículo; SrR: OVX e tratadas com 625mg/kg/dia de SrR; RSV: OVX e tratadas com 80mg/kg/dia de RSV; SrR+RSV: OVX e tratadas com 625mg/kg/dia de SrR + 80mg/kg/dia de RSV. Os tratamentos e a solução veículo (H2O) foram administrados por gavage, 7 dias/semana durante 90 dias. Os animais foram pesados e avaliados por densitometria óssea no dia da OVX, no início e ao final do tratamento. Após o tratamento, os animais foram submetidos à eutanásia e os fêmures distais foram fixados em formaldeído 4% (preparado a partir do paraformaldeído) em tampão fosfato 0.1M (pH 7.2), descalcificados em EDTA à 10% em tampão fosfato de sódio (pH 7.2), desidratados em etanol, diafanizados em xilol, impregnados e incluídos em parafina. Cortes semi sequenciados foram realizados com 5?m de espessura, aderidos a lâminas de vidro e destinados às análises histomorfométricas, histoquímicas e imunoistoquímicas. Os fêmures distais foram submetidos a quantificação dos glicosaminoglicanos sulfatados por eletroforese em gel de agarose e do ácido hialurônico pelo método ELISA. As propriedades biofísicas e biomecânicas foram avaliadas nas tíbias e vértebras. A análise cito-genotoxica foi realizada pelo teste Allium cepa. 40 bulbos foram dividos em 8 grupos: Controle: tratadas com solução veículo; SrR10: tratadas com 10?M de SrR; SrR200: tratadas com 200?M de SrR; SrR1000: tratadas com 1000?M de SrR; RSV10: tratadas com 10?M de RSV; RSV25: tratadas com 25?M de RSV; RSV80: tratadas com 80?M de RSV; SrR200+RSV80: tratadas com 200?M de SrR + 80?M de RSV. Os meristemas foram coletados após 48hs de tratamento, seccionados e corados para as análises das células radiculares. Resultados: Todos os grupos obtiveram ganho de massa corporal após a OVX. Ao final do tratamento a porcentagem de gordura aumentou no grupo SrR+RSV e a massa magra diminuiu nos grupos SrR, RSV e SrR+RSV. Todos os tratamentos foram efetivos em aumentar a densidade mineral óssea (DMO) quando comparado cada grupo individualmente, no entanto ao compararmos todos grupos ao final do tratamento, este aumento foi mais evidente no grupo SrR+RSV. Os grupos submetidos aos tratamentos com SrR demonstraram aumento do volume ósseo trabecular e apresentaram melhores resultados que o RSV isolado. Não houve diferença na espessura do osso cortical. Os grupos que receberam o RSV (isolado e/ou combinado) apresentaram predominância de fibras delgadas (fibras imaturas), enquanto os grupos Sham, Controle e SrR predominância de fibras espessas (maduras). Todos os tratamentos levaram a diminuição da morte dos osteócitos, e ao aumento dos osteoclastos, principalmente no grupo SrR. Diminuição da concentração de condroitim sulfato foi observado nos grupos Sham, SrR e SrR+RSV, enquanto os níveis de AH aumentaram no Sham e SrR. Não houve diferença na quantificação de cálcio e nos parâmetros biofísicos de tíbias e vértebras. Os tratamentos com SrR isolado exibiram citotoxidade e genotoxidade, apresentando efeito clastogênico e aneugênico. Enquanto o RSV (25?M e 80?M) e o tratamento combinado não foram citotóxicos, sendo inclusive capazes de reduzir os danos ao DNA, evidenciando portanto, o potencial anti-genotóxico deste fitoestrógeno. Conclusão: O RSV isolado e/ou combinado ao SrR tiveram diferentes efeitos sobre os constituintes do tecido ósseo, sendo que o SrR demonstra melhor eficácia em reestabelecer a microarquitetura óssea, possivelmente por acelerar o processo de remodelação. O RSV quando associado ao SrR é mais eficaz do que isolado e protege da genotoxidade causada pelo SrR.