As expressões CD163 e CD206 na superfície celular não se correlacionam com a modulação da produção de citocinas por monocitos humanos tolerantes ao lipopolissacarídeo

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2015
Autor(a) principal: Alves-Januzzi, Amanda Barba [UNIFESP]
Orientador(a): Salomão, Reinaldo [UNIFESP]
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
dARK ID: ark:/48912/001300001qqnn
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Monócitos
Ativação de macrófagos
Lipopolissacarídeos
Imunofenotipagem
Citocinas
Citometria de fluxo
Link de acesso: http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/48723
https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=2618789
Resumo: Monócitos tolerantes ao LPS produzem pequenas quantidades de citocinas inflamatórias, que também é uma das características dos macrófagos activados alternativos (AAM, M2). Estas células apresentam um aumento da expressão de CD206 (receptor de manose) e CD163 (receptor de hemoglobina-haptoglobina), que são marcadores típicos da ativação alternativa. Dadas as semelhanças funcionais de AAM com a modulação das funções de monócitos observados durante a sepse e a tolerância induzida por LPS, há um crescente interesse em avaliar se as alterações funcionais observadas nestes modelos estão relacionadas com o aumentode M2. Neste trabalho, nós investigamos se monócitos humanos tolerantes apresentariam modulaçãoda expressão de CD206 e CD163, marcadores de ativação alternativa, e se esta modulação estaria relacionada à detecção de citocinas. A tolerância ao LPS foi induzida em células mononucleares do sangue periférico por meio de pré-incubação com concentrações crescentes de LPS. A expressão de CD206 e CD163 e a detecção intracelular deTNF- e IL-6 foram determinadas 24 h após o desafio com LPS por citometria de fluxo. Não foram observadas diferenças na expressão de CD163 entre células tolerantes e não tolerantes, enquanto que a expressão de CD206 foi diminuída após estímulo por LPS em células não tolerantes e ainda mais reduzida em células tolerantes. A diminuição da produção de citocinas inflamatórias foi observada nas células tolerantes, independentemente da expressão de CD163 e CD206, com a exceção de IL-6 em monócitos CD206+, a qual foi igualmente expresso em ambas as células tolerantes e não tolerantes. Em conclusão, o efeito de LPS na expressão de CD163 e CD206 em monócitos não é revertido em células tolerantes LPS, e a inibição de citocinas inflamatórias em células tolerantes não está relacionada com a modulação destes receptores.
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Neste trabalho, nós investigamos se monócitos humanos tolerantes apresentariam modulaçãoda expressão de CD206 e CD163, marcadores de ativação alternativa, e se esta modulação estaria relacionada à detecção de citocinas. A tolerância ao LPS foi induzida em células mononucleares do sangue periférico por meio de pré-incubação com concentrações crescentes de LPS. A expressão de CD206 e CD163 e a detecção intracelular deTNF- e IL-6 foram determinadas 24 h após o desafio com LPS por citometria de fluxo. Não foram observadas diferenças na expressão de CD163 entre células tolerantes e não tolerantes, enquanto que a expressão de CD206 foi diminuída após estímulo por LPS em células não tolerantes e ainda mais reduzida em células tolerantes. A diminuição da produção de citocinas inflamatórias foi observada nas células tolerantes, independentemente da expressão de CD163 e CD206, com a exceção de IL-6 em monócitos CD206+, a qual foi igualmente expresso em ambas as células tolerantes e não tolerantes. Em conclusão, o efeito de LPS na expressão de CD163 e CD206 em monócitos não é revertido em células tolerantes LPS, e a inibição de citocinas inflamatórias em células tolerantes não está relacionada com a modulação destes receptores. LPS-tolerant monocytes produce small amounts of inflammatory cytokines, which is one of the characteristics of the alternative activated macrophages (AAM, M2). These cells exhibited an increased expression of CD206 (mannose receptor) and CD163 (hemoglobin-haptoglobin receptor), which are typical markers of alternative activation. Given the functional similarities of AAMs with the modulation of monocytes´ functions observed during sepsis and LPS-induced tolerance, there is increasing interest to evaluate if the functional changes observed in these models are related with M2 shift. Here, we investigated if tolerant human monocytes would modulate their expression of CD206 and CD163, markers of alternative activation, and if the level of their expression would be related to cytokines detection. Tolerance to LPS was induced in peripheral blood mononuclear cell by pre-incubating the cells with increasing concentrations of LPS. The expression of CD206 and CD163 and intracellular TNF- and IL-6 was determined 24 h after LPS challenge by flow cytometry. No differences in CD163 expression were observed between tolerant and non-tolerant cells, while the expression of CD206, which was decreased following LPS stimulation in non-tolerized cells, was further reduced in tolerant cells. Decreased production of inflammatory cytokines was observed in the tolerized cells, regardless of the expression of CD163 and CD206, with the exception of IL-6 in CD206+ monocytes, which was similarly expressed in both tolerized and nontolerized cells. In conclusion, the effect of LPS in the expression of CD163 and CD206 on monocytes is not reverted in LPS tolerant cells, and the inhibition of inflammatory cytokines in tolerant cells is not related with modulation of these receptors.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)CNPq: 135200/2011-3FAPESP: 2011/20401-458 f.ALVES, Amanda Barba. As expressões cd163 e cd206 na superfície celular não se correlacionam com a modulação da produção de citocinas por monocitos humanos tolerantes ao lipopolissacarídeo. 2015. 58 f. Dissertação (Mestrado em Infectologia) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2015.http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/48723https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=2618789ark:/48912/001300001qqnnporUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)info:eu-repo/semantics/openAccessMonócitosAtivação de macrófagosLipopolissacarídeosImunofenotipagem CitocinasCitometria de fluxoAs expressões CD163 e CD206 na superfície celular não se correlacionam com a modulação da produção de citocinas por monocitos humanos tolerantes ao lipopolissacarídeoCD163 and CD206 expression does not correlate with tolerance and cytokine production in LPS-tolerant human monocytesinfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionreponame:Repositório Institucional da UNIFESPinstname:Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)instacron:UNIFESPSão Paulo, Escola Paulista de Medicina (EPM)InfectologiaCiências da saúdeMedicinaORIGINALAmanda Barba Alves Januzzi.pdfapplication/pdf6327315https://repositorio.unifesp.br/bitstreams/94cbf7e6-d428-4aa8-9ec1-abd3c5f5de78/download60813453d66558efb95f22f16da33fe0MD5111600/487232024-09-02 14:36:54.311oai:repositorio.unifesp.br:11600/48723https://repositorio.unifesp.brRepositório InstitucionalPUBhttp://www.repositorio.unifesp.br/oai/requestbiblioteca.csp@unifesp.bropendoar:34652024-09-02T14:36:54Repositório Institucional da UNIFESP - Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)false
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