Obtenção de nanopartículas de PMMAbPDMAEMA para sistemas de liberação controlada de moléculas bioativas

• Ano de defesa: 2018
• Autor(a) principal: Engelmann, Klauss [UNIFESP]
• Orientador(a): Daghastanli, Katia Regina Perez [UNIFESP]
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
• Palavras-chave em Português: Nanopartículas; PMMA-b-PDMAEMA; Liberação controlada; Terapia gênica
• Palavras-chave em Inglês: Nanoparticles; Controlled release; Gene therapy
• Link de acesso: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=6326457; https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/53050

A associação do PMMA (polimetacrilato de metila), polímero solúvel em solventes orgânicos, e o PDMAEMA (poli2dimetilamina metacrilato de etila), solúvel em água, gera um copolímero anfifílico de propriedades dependentes do pH e com tendência de formação de micelas. O objetivo deste trabalho foi obter e caracterizar nanopartículas (NPs) deste copolímero para veicular DNA plasmidial para células HEK 293T como forma de demonstrar sua eficiência no processo de transfecção celular. As metodologias testadas para o preparo das NPs foram adaptações da emulsificação com evaporação de solvente, da salting out e da nanoprecipitação. A caracterização das NPs foi feita pela avaliação de tamanho e potencial zeta (PZ), pela análise de espectros de FTIR e por estudos de DSC das suspensões obtidas. Rodamina 6G (Rd6G) foi encapsulada para estudo de microscopia de altaresolução SR GSD 3D. Para os testes de estabilidade, foram monitoradas suspensões das NPs em água a 37 °C durante 30 dias. O método da nanoprecipitação foi o mais eficiente não apresentando perda de massa, com NPs entre 60–100 nm e PZ de 20 a 30 mV. O FTIR apresentou o mesmo perfil para o polímero e as NPs Os estudos de estabilidade mostraram que as NPs em meio aquoso apresentaram estabilidade de tamanho e PZ. A microscopia GSD mostra a presença de NPs fluorescentes com característica esférica. Também indicam que os sistemas de perfil equilibrado das frações hidrofílicas e hidrofóbicas dos copolímeros é importante na sua aplicação como veiculador de DNA. A nanoprecipitação foi a melhor metodologia de obtenção de NPs de PMMAPDMAEMA. As NPs do copolímero 1:1 e 2:1 se mostraram mais eficientes na aplicação como agentes de transfecção de DNA Plasmidial em sistemas com células do tipo HEK 293T.