Caracterização biofísica de vesículas catiônicas de DODAB contendo α-galactosilceramida (α-galcer) e lisofosfatidilcolinas (LPC 18:1 e LPC 18:0)

• Ano de defesa: 2024
• Autor(a) principal: Martins, Leticia de Souza [UNIFESP]
• Orientador(a): Rozenfeld, Julio Henrique Kravcuks [UNIFESP]
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• dARK ID: ark:/48912/001300001kf8x
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo
• Palavras-chave em Português: Brometo de dioctadecildimetilamônio
• Link de acesso: https://hdl.handle.net/11600/71394

Objetivo: Caracterizar a estrutura e as propriedades térmicas de arranjos supramoleculares formados entre o lipídio catiônico brometo de dioctadecildimetilamônio (DODAB) e frações molares de lipídios que apresentam atividade agonista sobre as células CD1d-restritas, tais como α-galactosilceramida (α-GalCer) ou lisofosfatidilcolina 18:1 (LPC 18:1), e comparar os efeitos de LPC18:1 e 18:0 no contexto desses arranjos supramoleculares. Métodos: Foram preparadas dispersões coloidais em tampão HEPES (10 mM, pH 7,4) a partir da hidratação de filmes lipídicos contendo DODAB, LPC18:0, LPC18:1, α-GalCer, ou misturas de DODAB e demais lipídios. Essas dispersões foram caracterizadas por Calorimetria Diferencial de Varredura (DSC) e por Espectroscopia de Ressonância Paramagnética Eletrônica (EPR). Resultados: α-GalCer diminui a temperatura e a cooperatividade de transição de fase das vesículas de DODAB, bem como o empacotamento da fase gel de DODAB. Já a fase fluida de DODAB é enrijecida na presença de α-GalCer. Com relação às lisofosfatidilcolinas, foi observado que o LPC18:1 diminui a cooperatividade e a temperatura de transição gel-fluida de DODAB, enquanto LPC18:0 aumenta a entalpia dessa transição. Também foi observada a coexistência de duas populações com rigidez diferente na presença de LPC18:1 na fase gel de DODAB, que se torna mais enrijecida na presença de LPC18:0. Na fase fluida, LPC18:1 induz um aumento de rigidez da superfície das vesículas de DODAB, enquanto LPC18:0 aumenta a rigidez tanto na superfície quanto no centro das bicamadas que formam estas vesículas. Conclusão: Os efeitos observados em misturas de DODAB com α-GalCer são, provavelmente, resultantes da conformação da ligação amida rígida que conecta a fitoesfingosina e a cadeia de acila longa e saturada de α-GalCer. Já a diferença de uma única ligação dupla tipo cis entre LPC18:0 e LPC18:1 teve um impacto significativo nos efeitos dessas lisofosfatidilcolinas sobre as propriedades termotrópicas e a estrutura das vesículas de DO-DAB. A caracterização biofísica destes arranjos supramoleculares é fundamental para planejar e desenvolver novas aplicações biotecnológicas que envolvem o uso dessas vesículas mistas de DODAB.