Imunolocalização de canais para sódio voltagem-dependentes em neurônios do núcleo coclear dorsal e do núcleo medial do corpo trapezoidal
| Ano de defesa: | 2013 |
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| Tipo de documento: | Dissertação |
| Tipo de acesso: | Acesso embargado |
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| Instituição de defesa: |
Universidade Federal do Triângulo Mineiro
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| Programa de Pós-Graduação: |
Curso de Pós-Graduação em Ciências Fisiológicas
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| Departamento: |
Bioquímica, Fisiologia e Farmacologia
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| País: |
BR
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| Palavras-chave em Inglês: | |
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Resumo: | The present study aimed to characterize the expression of voltage-gated sodium channels in neurons of inferior auditory system, more specifically at dorsal cochlear nucleus (DCN) and medial nucleus of trapezoid body (MNTB) of thirty days rats. For this purpose, double-labeling immunofluorescence reactions m of brain stem and documented usingwere done in slices of 40 or 150 confocal microscopy. We have used an antibody that recognizes all the isoforms of sodium channels (PAN-Nav), specific antibodies against the isoforms of voltage-dependent sodium or calcium channels Nav1.1, Nav1.2 e Nav1.6 or Cav3.2, and also antibodies against the neuronal markers anti-Map-2 e anti-ankyrin-G. It was not observed anti-Nav1.1 or Nav1.2 labeled neurons from both nuclei evaluated, at least at densities normally detected through the immunofluorescence technique utilized. The Nav1.6 channels are highly expressed at axon initial segments (AIS) of cartwheel, fusiforms and giant cells of DCN. The cartwheel cells showed a mean somatic silhouette area of 181,5 ± 16,3 (n=8), the fusiforms of 423,9 ± 43,6 (n=8) and the giant cells of 1119,3 ± 123,4 µm2 (n=3), whereas the anti-Nav1.6 labeling along the AIS measured 17,6 ± 0,5; 22,5 ±1,8; 45,3 ± 1,5 µm, respectively. When compared, both the somatic silhouette area and the extension of anti-Nav1.6 at AIS, presented a statistically significant difference between the neuronal subpopulations of DCN. At cartwheel cells from DCN, the Cav3.2 calcium channel is observed in the soma and also in processes near the soma, although the colocalization of this channel with the Nav1.6 at AIS was not detected. At MNTB principal cells, the analysis of anti-Pan and anti-Nav1.6 along the AIS, also does not suggest the presence of other isoforms besides the Nav1.6. At this neuronal domain we observed the colocalizaion of anti-Nav1.6 e anti-ankyrin-G, where only the anti-Nav1.6 labeling increases with the distance along the AIS. Therefore, our data suggest that the high density of Nav1.6 isoform at AIS is a common finding of auditory neurons. However, the extension of its expression at the probable site of the action potential generation differs between neuronal populations of auditory neurons. Besides the Nav1.6, the cartwheel cells of DCN exhibited a somatic expression of Cav3.2 calcium channel and both voltage-gated ion channels may be involved with complex action potential characteristic of these neurons. |
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Rodrigues, Aldo Rogelis Aquileshttp://lattes.cnpq.br/6645292290768657http://lattes.cnpq.br/2058930692787587Silva, Liciane Mateus da2015-11-27T18:51:04Z2014-01-292013-04-05SILVA, Liciane Mateus da. Immunolocalization of voltage-gated sodium channels in neurons of the dorsal cochlear nucleus and the medial nucleus of the trapezoid body.. 2013. 79 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica, Fisiologia e Farmacologia) - Universidade Federal do Triângulo Mineiro, Uberaba, 2013.http://localhost:8080/tede/handle/tede/59The present study aimed to characterize the expression of voltage-gated sodium channels in neurons of inferior auditory system, more specifically at dorsal cochlear nucleus (DCN) and medial nucleus of trapezoid body (MNTB) of thirty days rats. For this purpose, double-labeling immunofluorescence reactions m of brain stem and documented usingwere done in slices of 40 or 150 confocal microscopy. We have used an antibody that recognizes all the isoforms of sodium channels (PAN-Nav), specific antibodies against the isoforms of voltage-dependent sodium or calcium channels Nav1.1, Nav1.2 e Nav1.6 or Cav3.2, and also antibodies against the neuronal markers anti-Map-2 e anti-ankyrin-G. It was not observed anti-Nav1.1 or Nav1.2 labeled neurons from both nuclei evaluated, at least at densities normally detected through the immunofluorescence technique utilized. The Nav1.6 channels are highly expressed at axon initial segments (AIS) of cartwheel, fusiforms and giant cells of DCN. The cartwheel cells showed a mean somatic silhouette area of 181,5 ± 16,3 (n=8), the fusiforms of 423,9 ± 43,6 (n=8) and the giant cells of 1119,3 ± 123,4 µm2 (n=3), whereas the anti-Nav1.6 labeling along the AIS measured 17,6 ± 0,5; 22,5 ±1,8; 45,3 ± 1,5 µm, respectively. When compared, both the somatic silhouette area and the extension of anti-Nav1.6 at AIS, presented a statistically significant difference between the neuronal subpopulations of DCN. At cartwheel cells from DCN, the Cav3.2 calcium channel is observed in the soma and also in processes near the soma, although the colocalization of this channel with the Nav1.6 at AIS was not detected. At MNTB principal cells, the analysis of anti-Pan and anti-Nav1.6 along the AIS, also does not suggest the presence of other isoforms besides the Nav1.6. At this neuronal domain we observed the colocalizaion of anti-Nav1.6 e anti-ankyrin-G, where only the anti-Nav1.6 labeling increases with the distance along the AIS. Therefore, our data suggest that the high density of Nav1.6 isoform at AIS is a common finding of auditory neurons. However, the extension of its expression at the probable site of the action potential generation differs between neuronal populations of auditory neurons. Besides the Nav1.6, the cartwheel cells of DCN exhibited a somatic expression of Cav3.2 calcium channel and both voltage-gated ion channels may be involved with complex action potential characteristic of these neurons.O presente trabalho buscou caracterizar a expressão de canais para sódio voltagem-dependentes em neurônios do sistema auditivo inferior, mais especificamente no núcleo coclear dorsal (DCN) e no núcleo medial do corpo trapezoidal (MNTB) de ratos Wistar de 30 dias. Para isso, utilizou-se reações de imunofluorescência de dupla marcação, em fatias de 40 ou 150 µm do tronco cerebral e documentação em microscopia confocal. Foi utilizado um anticorpo que reconhece todas as isoformas de canais para sódio (PAN-Nav); anticorpos específicos contra as isoformas de canais para sódio ou cálcio voltagem-dependentes Nav1.1, Nav1.2 e Nav1.6 ou Cav3.2 e para os marcadores neuronais anti-Map-2 e anti-anquirina-G. Não foi observada a imunomarcação anti-Nav 1.1 e anti-Nav 1.2 nos dois núcleos analisados, pelo menos em densidades detectáveis, pelo método de imunofluorescência utilizado. O canal Nav1.6 é intensamente expresso nos segmentos iniciais do axônio (AIS) das células cartwheel, fusiformes e gigantes do DCN. As células cartwheel apresentaram uma área de silhueta somática média de 181,5 ± 16,3 (n=8), as fusiformes de 423,9 ± 43,6 (n=8) e as gigantes de 1119,3 ± 123,4 µm2 (n=3), enquanto a marcação anti-Nav1.6 ao longo do AIS exibiu uma extensão de 17,6 ± 0,5; 22,5 ±1,8; 45,3 ± 1,5 µm, respectivamente. Quando comparadas, tanto a área de silhueta somática quanto a extensão da marcação anti-Nav1.6 no AIS diferiram estatisticamente entre essas subpopulações neuronais do DCN. Nas células cartwheel do DCN, embora demonstrado a presença do canal Cav3.2 no soma e em processos próximos ao soma, não foi observada a colocalização desse canal com o Nav1.6 no AIS. Nas células principais do MNTB, a análise da marcação anti-PAN-Nav e anti-Nav1.6 ao longo do AIS, também não sugere a presença de outras isoformas, além da Nav1.6. Nesse domínio neuronal observou-se colocalização anti-Nav1.6 e anti-anquirina-G, onde apenas a marcação anti-Nav1.6 aumenta com a distância ao longo do AIS. Dessa forma, nossos dados sugerem que a alta densidade da isoforma Nav1.6 no AIS é comum a distintos neurônios auditivos. Entretanto, a extensão de sua expressão no provável sítio gerador do potencial de ação difere entre distintas populações neuronais do sistema auditivo. Além do canal para sódio Nav1.6, as células cartwheel do DCN exibiram uma expressão somática do canal de cálcio Cav3.2 e ambos canais iônicos voltagem-dependentes podem estar envolvidos com potenciais de ação complexos característicos desses neurônios.application/pdfhttp://localhost:8080/tede/retrieve/220/Dissert%20Liciane%20M%20Silva.pdf.jpgporUniversidade Federal do Triângulo MineiroCurso de Pós-Graduação em Ciências FisiológicasUFTMBRBioquímica, Fisiologia e FarmacologiaCanais para sódioNav1.6AxôniosNúcleo coclear dorsalNúcleo medial do corpo trapezoidalAnquirina-Geração de potenciais de açãoSistema auditivoSodium channelsNav1.6 sodium channelsAxonDorsal cochlear nucleusMedial nucleus of the trapezoidal bodyAnkyrin-GAction potential generationAuditory systemCNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::MEDICINAImunolocalização de canais para sódio voltagem-dependentes em neurônios do núcleo coclear dorsal e do núcleo medial do corpo trapezoidalImmunolocalization of voltage-gated sodium channels in neurons of the dorsal cochlear nucleus and the medial nucleus of the trapezoid body.info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/embargoedAccessreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFTMinstname:Universidade Federal do Triangulo Mineiro (UFTM)instacron:UFTMORIGINALDissert Liciane M Silva.pdfapplication/pdf3556648http://bdtd.uftm.edu.br/bitstream/tede/59/1/Dissert%20Liciane%20M%20Silva.pdf0710782e4da8c047154c6adfdc1f8d0cMD51TEXTDissert Liciane M Silva.pdf.txtDissert Liciane M Silva.pdf.txtExtracted Texttext/plain155564http://bdtd.uftm.edu.br/bitstream/tede/59/2/Dissert%20Liciane%20M%20Silva.pdf.txtefa884b26932f45f81ed67fdecd914d5MD52THUMBNAILDissert Liciane M Silva.pdf.jpgDissert Liciane M Silva.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg2101http://bdtd.uftm.edu.br/bitstream/tede/59/3/Dissert%20Liciane%20M%20Silva.pdf.jpgc6db19adf0ee2a46150579831152a321MD53tede/592019-06-26 17:05:43.878oai:bdtd.uftm.edu.br:tede/59Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://bdtd.uftm.edu.br/PUBhttp://bdtd.uftm.edu.br/oai/requestbdtd@uftm.edu.br||bdtd@uftm.edu.bropendoar:2019-06-26T20:05:43Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFTM - Universidade Federal do Triangulo Mineiro (UFTM)false |
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Imunolocalização de canais para sódio voltagem-dependentes em neurônios do núcleo coclear dorsal e do núcleo medial do corpo trapezoidal Silva, Liciane Mateus da Canais para sódio Nav1.6 Axônios Núcleo coclear dorsal Núcleo medial do corpo trapezoidal Anquirina- Geração de potenciais de ação Sistema auditivo Sodium channels Nav1.6 sodium channels Axon Dorsal cochlear nucleus Medial nucleus of the trapezoidal body Ankyrin-G Action potential generation Auditory system CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::MEDICINA |
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