Plataformas diagnósticas para a análise de processos alérgicos e contaminantes alergênicos derivados dos ácaros Blomia tropicalis e Dermatophagoides sp

• Ano de defesa: 2018
• Autor(a) principal: Alves, Claudiney de Freitas
• Orientador(a): Goulart Filho, Luiz Ricardo
• Banca de defesa: Teixeira, David Nascimento Silva , Silva, Robinson Sabino da , Castellano, Lúcio Roberto Cançado
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso embargado
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Uberlândia
• Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-graduação em Genética e Bioquímica
• País: Brasil
• Palavras-chave em Português: Plataformas diagnósticas; diagnostic platforms; Ácaros; mites; Blomia tropicalis; Dermatophagoides sp; Espectroscopia de Raman-SERS; Raman-SERS spectroscopy; Micropartículas magnéticas; magnetic microparticles; Electrochemical immunosensor; imunossensor eletroquímico; Detecção de alérgenos; Allergens detection; IgE; pacientes atópicos; atopic patients
• Área do conhecimento CNPq: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS; CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICA::BIOLOGIA MOLECULAR; CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA::IMUNOLOGIA APLICADA; CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::GENETICA::GENETICA MOLECULAR E DE MICROORGANISMOS
• Link de acesso: https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/31587; http://doi.org/10.14393/ufu.te.2021.5006

As doenças alérgicas, representam um importante problema de saúde pública e são frequentes na população em geral. Estas doenças têm aumentado de forma considerável ao longo das últimas décadas. Atualmente, as alergias, ditas pela mídia como: “mal do século”, representam o 4º grupo de doenças crônicas com alta prevalência e rápido crescimento mundial. Estas afetam cerca de 35-40% da população e são consideradas epidemias da civilização moderna. Este aumento exponencial se deve principalmente às mudanças de hábitos da vida moderna (Teoria da Higiene) e à poluição ambiental. A alergia consiste de uma resposta exagerada do sistema imunológico, quando o indivíduo geneticamente predisposto (atópico), está exposto à presença de algum alérgeno. Estes estímulos (alérgenos) podem ser a presença de poeira, de fumaça, de algum componente medicamentoso, de cheiros fortes, de picadas de insetos, da ingestão de determinados alimentos, dentre outros que sejam capazes de provocar uma reação exacerbada do sistema imunológico. Esta reação tem como resultado a produção de níveis elevados de imunoglobulina E (IgE) com baixas doses de estímulos alergênicos que além de incômoda, pode oferecer risco de vida ao portador, visto que pode levar a choque anafilático. As alergias são reações de hipersensibilidade do tipo I e atingem na sua heterogeneidade diferentes órgãos e sistemas, como a pele, as vias respiratórias e digestivas, como mencionado nos exemplos anteriores. Estas reações afetam de forma negativa a qualidade de vida dos indivíduos. Em ambientes domésticos e de armazenagem, os ácaros são os principais causadores dessas reações. Os ácaros são animais microscópicos pertencem a uma subclasse de aracnídeos. Os ácaros de armazenamento se encontram principalmente em alimentos armazenados, cereais, farinhas, celeiros e feno. Contudo, estes ácaros também podem ser encontrados no pó doméstico e, assim sendo, a exposição a estes animais também pode ocorrer em casa, em especial em locais húmidos. Os ácaros mais estudados são do gênero Dermatophagoides e Blomia, visto que estes possuem alérgenos clinicamente relevantes para o desenvolvimento de alergias. As dificuldades no diagnóstico e tratamento adequado constituem uma realidade quando se fala de doenças alérgicas e representam dificuldades acrescidas para a qualidade de vida dos indivíduos. Tal diagnóstico pode ser feito por testes cutâneos ou pela mensuração dos níveis séricos de IgE específica. Contudo, estes métodos são dispendiosos e demoram muito tempo para indicar o resultado de uma amostra. Desta forma, o desenvolvimento de novos métodos de prevenção, detecção, diagnóstico e tratamento para doenças alérgicas fazem-se necessário. A espectroscopia Raman é uma técnica promissora para aplicações biomédicas uma vez que não exibe os sinais da água em seu resultado. Esta é uma técnica de espectroscopia vibracional rápida e não destrutiva, na qual um laser é focalizado em uma amostra. A técnica se baseia na interação dos fótons incidentes com as moléculas da amostra gerando um espalhamento inelástico de fótons com frequências e intensidades característica das moléculas na amostra. O espectro Raman resultante fornece uma impressão digital característica da composição molecular o que pode identificar as espécies da amostra. Além de técnicas de diagnóstico preciso e rápido, o controle das manifestações alérgicas está baseado na redução à exposição alergênica. O desenvolvimento de (imuno)biossensores eletroquímicos desperta a atenção da comunidade científica pois estes dispositivos, associados à seletividade das medidas eletroquímicas, têm permitido a medição de vários analitos importantes em diferentes áreas como na médica, farmacêutica, de alimentos e de meio ambiente. A demanda pelo desenvolvimento de instrumentos analíticos simples, rápidos, precisos, sensíveis, específicos, seletivos, de baixo custo e portáteis está crescendo e os (imuno)biossensores atendem a esses requisitos. Almejando aprimorar as formas de diagnóstico e identificação de possíveis meios de exposição, com consequente melhoria do tratamento destas doenças, esta tese tem por objetivo identificar padrões específicos para cada tipo de antígeno usando anticorpos monoclonais, soro (Raman) e anticorpos policlonais (biossensor) que indicaram se o indivíduo é atópico ou não – atópico além de possíveis fontes de contaminação com os antígenos dos ácaros de Blomia tropicalis. Para uma melhor compreensão deste trabalho, esta tese foi dividida em capítulos. O Capítulo 1 refere-se à fundamentação teórica da tese. Nesse capítulo, estão descritos os principais marcos relacionados ao desenvolvimento das doenças alérgicas. Esse capítulo também traz uma breve revisão sobre a epidemiologia da doença, uma apresentação de seus fatores de risco e menciona alguns métodos empregados no diagnóstico destas doenças. O Capítulo 2 investiga o emprego da Técnica de Raman para determinar se o indivíduo é alérgico (atópico) ou não. Portanto, o objetivo deste capítulo é investigar o soro de diferentes pacientes em busca de evidências que os enquadre em doentes ou não, analisando os espectros obtidos com a técnica de Raman. E, por fim, o Capítulo 3 que investiga a utilização dos imunossensores eletroquímicos como uma alternativa futura para identificação de amostras contaminadas com alérgenos de ácaros. Portanto, o objetivo deste capítulo é expor de maneira detalhada a utilização de imunossensores eletroquímicos com imunoglobulina Y policlonal para Blomia tropicalis – Blot 5.