Precipitação de miosinas IIA e IIB de rim por congelamento
Ano de defesa: | 2010 |
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Tipo de documento: | Tese |
Tipo de acesso: | Acesso aberto |
Idioma: | por |
Instituição de defesa: |
Universidade Federal de Uberlândia
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Programa de Pós-Graduação: |
Programa de Pós-graduação em Genética e Bioquímica
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Departamento: |
Ciências Biológicas
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País: |
BR
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Palavras-chave em Português: | |
Área do conhecimento CNPq: | |
Link de acesso: | https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/15710 |
Resumo: | Myosins, a family of motor proteins involved in movement along of actin filaments plays a fundamental role in cell motility. Myosin constitute a superfamily with over 20 classes, wich is ubiquitous distributed in eukaryotic cells. Some myosins are known only the primary structure and others by recombinant protein. Some of this protein already were purified like full length protein and have been biochemically characterized, as myosin I, II, V and VI. Myosins share some common biochemical properties: ATPase activity in the presence of EDTA and high potassium concentration (K/EDTA-ATPase activity) and low Mg-ATPase activity that is markedly increased by the interaction with actin. Precipitation of actomyosin constitutes an important step to purification of full length myosins. Actomyosin preparation is obtained starting from the precipitation soluble fraction of brain, both in low or high ionic strength buffer and this process allow the purification of myosin II and V. Myosin precipitation (II and V) is assumed to result from its interaction with actin and vesicles. We have obtained actomyosin precipitation starting from freezing of soluble fraction from brain or rat testis. In this work, we shown the purification of myosin IIA and IIB from kidney starting from actomyosin obtained by freezing the soluble fraction of rat kidney. |
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2016-06-22T18:43:22Z2010-06-092016-06-22T18:43:22Z2010-02-10DIAS, Decivaldo dos Santos. Precipitação de miosinas IIA e IIB de rim por congelamento. 2010. 92 f. Tese (Doutorado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2010.https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/15710Myosins, a family of motor proteins involved in movement along of actin filaments plays a fundamental role in cell motility. Myosin constitute a superfamily with over 20 classes, wich is ubiquitous distributed in eukaryotic cells. Some myosins are known only the primary structure and others by recombinant protein. Some of this protein already were purified like full length protein and have been biochemically characterized, as myosin I, II, V and VI. Myosins share some common biochemical properties: ATPase activity in the presence of EDTA and high potassium concentration (K/EDTA-ATPase activity) and low Mg-ATPase activity that is markedly increased by the interaction with actin. Precipitation of actomyosin constitutes an important step to purification of full length myosins. Actomyosin preparation is obtained starting from the precipitation soluble fraction of brain, both in low or high ionic strength buffer and this process allow the purification of myosin II and V. Myosin precipitation (II and V) is assumed to result from its interaction with actin and vesicles. We have obtained actomyosin precipitation starting from freezing of soluble fraction from brain or rat testis. In this work, we shown the purification of myosin IIA and IIB from kidney starting from actomyosin obtained by freezing the soluble fraction of rat kidney.Miosinas são ATPases que realizam trabalho celular translocando-se sobre microfilamentos de actina. Constituem uma superfamília com mais de 20 classes. São amplamente distribuídas em todas as células eucarióticas. Algumas são conhecidas apenas a estrutura primária através de seqüência gênica, outras como proteínas expressas através de sistemas recombinantes. Algumas dessas miosinas já foram purificadas como proteínas nativas e encontram-se bem caracterizadas bioquimicamente, como as miosinas I, II, V e VI. Apresentam como características bioquímicas: atividade ATPase na presença de EDTA e alta concentração de potássio (atividade K/EDTA-ATPase) e uma baixa atividade Mg-ATPase, que é altamente estimulada por F-actina. A precipitação de actomiosina é um passo importante para a purificação de miosinas nativas. Preparação de actomiosina é obtida a partir da precipitação de fração solúvel de cérebro tanto em baixa quanto em alta força iônica e esse processo de precipitação permite a purificação de miosina II ou V. É postulado que essa precipitação de miosina (II ou V) seja resultado de sua interação com actina e vesículas. Temos obtido a precipitação de actomiosina a partir do congelamento de fração solúvel de cérebro ou testículo de rato. Neste trabalho mostramos a purificação de miosina IIA e IIB de rim, partindo de actomiosina precipitada através do congelamento de fração solúvel.Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas GeraisDoutor em Genética e Bioquímicaapplication/pdfporUniversidade Federal de UberlândiaPrograma de Pós-graduação em Genética e BioquímicaUFUBRCiências BiológicasProteínasMiosinasCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::GENETICAPrecipitação de miosinas IIA e IIB de rim por congelamentoinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisCoelho, Milton Vieirahttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4785825A8Madurro, Ana Graci Britohttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4709037T3Ávila, Veridiana de Melo Rodrigueshttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4720590E9Sousa, Marcelo Valle dehttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4781286E7Espreafico, Enilza Mariahttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4785455E6http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4702269J4Dias, Decivaldo dos Santosinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFUinstname:Universidade Federal de Uberlândia (UFU)instacron:UFUTHUMBNAILde.pdf.jpgde.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1255https://repositorio.ufu.br/bitstream/123456789/15710/3/de.pdf.jpg09fc517de2cc203eb588b8a091f575d5MD53ORIGINALde.pdfapplication/pdf3283376https://repositorio.ufu.br/bitstream/123456789/15710/1/de.pdf06d4c4c4efee09dcd962020a76664634MD51TEXTde.pdf.txtde.pdf.txtExtracted texttext/plain113235https://repositorio.ufu.br/bitstream/123456789/15710/2/de.pdf.txt8dbf185c3799e814dcf1a2e1cbf9abceMD52123456789/157102017-06-26 15:47:58.935oai:repositorio.ufu.br:123456789/15710Repositório InstitucionalONGhttp://repositorio.ufu.br/oai/requestdiinf@dirbi.ufu.bropendoar:2017-06-26T18:47:58Repositório Institucional da UFU - Universidade Federal de Uberlândia (UFU)false |
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Myosins, a family of motor proteins involved in movement along of actin filaments plays a fundamental role in cell motility. Myosin constitute a superfamily with over 20 classes, wich is ubiquitous distributed in eukaryotic cells. Some myosins are known only the primary structure and others by recombinant protein. Some of this protein already were purified like full length protein and have been biochemically characterized, as myosin I, II, V and VI. Myosins share some common biochemical properties: ATPase activity in the presence of EDTA and high potassium concentration (K/EDTA-ATPase activity) and low Mg-ATPase activity that is markedly increased by the interaction with actin. Precipitation of actomyosin constitutes an important step to purification of full length myosins. Actomyosin preparation is obtained starting from the precipitation soluble fraction of brain, both in low or high ionic strength buffer and this process allow the purification of myosin II and V. Myosin precipitation (II and V) is assumed to result from its interaction with actin and vesicles. We have obtained actomyosin precipitation starting from freezing of soluble fraction from brain or rat testis. In this work, we shown the purification of myosin IIA and IIB from kidney starting from actomyosin obtained by freezing the soluble fraction of rat kidney. |
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