Eletross?ntese e caracteriza??o de filmes polim?ricos aplicados ao desenvolvimento de um imunossensor para diagn?stico de Dengue
Ano de defesa: | 2019 |
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Resumo: | A infec??o pelo v?rus da Dengue constitui-se em uma das doen?as mais negligenciadas e de maior import?ncia para a sa?de p?blica no mundo. ? uma doen?a de amplo espectro cl?nico, incluindo desde formas brandas at? quadros graves, causada por diferentes sorotipos do v?rus. N?o existe tratamento espec?fico para a Dengue. No entanto, a detec??o precoce e o acesso a cuidados m?dicos adequados reduzem as taxas de mortalidade para abaixo de 1%. Novos m?todos de diagn?stico da doen?a t?m sido estudados atrav?s da imobiliza??o da prote?na n?o-estrutural 1 (NS1) do v?rus dengue, por esta ser um marcador utilizado durante a fase aguda da doen?a. Para isso, imunossensores utilizando a detec??o eletroqu?mica t?m sido explorados em v?rias an?lises, uma vez que s?o espec?ficos, simples, port?teis e geralmente descart?veis e podem realizar a detec??o in situ ou automatizada. Neste trabalho, realizou-se a s?ntese eletroqu?mica de filmes polim?ricos derivados do ?cido 4-aminobenz?ico (4-ABA), 4-aminobenzamida (4-ABZ), ?cido 4-hidroxibenz?ico (4-HBA) e 4-hidroxibenzamida (4-HBZ) na superf?cie de eletrodos de grafite atrav?s da voltametria c?clica (VC). Posteriormente, foi proposto um mecanismo de eletropolimeriza??o para os pol?meros obtidos. As propriedades eletroqu?micas, morfol?gicas e estruturais dos filmes polim?ricos formados e suas aplica??es na imobiliza??o de biomol?culas foram investigadas. Desta forma, verificou-se que os eletrodos modificados com poli(4-ABA) e poli(4-HBA) foram mais eficazes na imobiliza??o da prote?na recombinante n?o estrutural 1 (rNS1) e de anticorpos anti-NS1. Na segunda parte deste trabalho, um novo imunossensor eletroqu?mico baseado em anticorpos espec?ficos anti-NS1 acoplados a eletrodos impressos de grafite modificados com poli(4-ABA) foi desenvolvido com sucesso para o diagn?stico do v?rus da Dengue. A an?lise de valida??o foi realizada com amostras de soro humano, onde ap?s os testes sorol?gicos (ELISA), diferentes soros foram testados pelo teste r?pido da Bioclin, e os diagn?sticos foram confirmados pelo m?todo impedim?trico utilizado neste trabalho. Os resultados obtidos foram todos positivos para a metodologia imunocromatogr?fica utilizada no teste r?pido e para a detec??o impedim?trica de anticorpos anti-NS1. A compara??o entre os resultados mostra que o dispositivo fabricado pode ser aplicado satisfatoriamente para o diagn?stico preciso do v?rus da Dengue, apresentando excelentes resultados, sendo assim, uma nova alternativa de detec??o da Dengue. |
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Santos, C?tia da CruzFerreira, Lucas FrancoVerly, Rodrigo MoreiraFranco, Diego LeoniCastro, Cl?udio M?rcio deMalagutti, Andrea RenataThomasini, Ronaldo LuisUniversidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM)Ferreira, Lucas Franco2019-12-13T21:44:55Z2019-12-13T21:44:55Z20192019-08-02SANTOS, C?tia da Cruz. Eletross?ntese e caracteriza??o de filmes polim?ricos aplicados ao desenvolvimento de um imunossensor para diagn?stico de Dengue. 2019. 153 p. Tese (Doutorado Multic?ntrico em Qu?mica) ? Programa de P?s-Gradua??o Multic?ntrico em Qu?mica de Minas Gerais, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, Diamantina, 2019.http://acervo.ufvjm.edu.br/jspui/handle/1/2125A infec??o pelo v?rus da Dengue constitui-se em uma das doen?as mais negligenciadas e de maior import?ncia para a sa?de p?blica no mundo. ? uma doen?a de amplo espectro cl?nico, incluindo desde formas brandas at? quadros graves, causada por diferentes sorotipos do v?rus. N?o existe tratamento espec?fico para a Dengue. No entanto, a detec??o precoce e o acesso a cuidados m?dicos adequados reduzem as taxas de mortalidade para abaixo de 1%. Novos m?todos de diagn?stico da doen?a t?m sido estudados atrav?s da imobiliza??o da prote?na n?o-estrutural 1 (NS1) do v?rus dengue, por esta ser um marcador utilizado durante a fase aguda da doen?a. Para isso, imunossensores utilizando a detec??o eletroqu?mica t?m sido explorados em v?rias an?lises, uma vez que s?o espec?ficos, simples, port?teis e geralmente descart?veis e podem realizar a detec??o in situ ou automatizada. Neste trabalho, realizou-se a s?ntese eletroqu?mica de filmes polim?ricos derivados do ?cido 4-aminobenz?ico (4-ABA), 4-aminobenzamida (4-ABZ), ?cido 4-hidroxibenz?ico (4-HBA) e 4-hidroxibenzamida (4-HBZ) na superf?cie de eletrodos de grafite atrav?s da voltametria c?clica (VC). Posteriormente, foi proposto um mecanismo de eletropolimeriza??o para os pol?meros obtidos. 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Os resultados obtidos foram todos positivos para a metodologia imunocromatogr?fica utilizada no teste r?pido e para a detec??o impedim?trica de anticorpos anti-NS1. A compara??o entre os resultados mostra que o dispositivo fabricado pode ser aplicado satisfatoriamente para o diagn?stico preciso do v?rus da Dengue, apresentando excelentes resultados, sendo assim, uma nova alternativa de detec??o da Dengue.Submitted by Nivaldo Melo (nivaldo.melo@ufvjm.edu.br) on 2019-12-12T19:24:33Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) catia_cruz_santos.pdf: 3213611 bytes, checksum: cd7a0b1fba2c3e85c2ff7d952b5cff18 (MD5)Approved for entry into archive by Jos? Henrique Henrique (jose.neves@ufvjm.edu.br) on 2019-12-13T21:44:55Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) catia_cruz_santos.pdf: 3213611 bytes, checksum: cd7a0b1fba2c3e85c2ff7d952b5cff18 (MD5)Made available in DSpace on 2019-12-13T21:44:55Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) catia_cruz_santos.pdf: 3213611 bytes, checksum: cd7a0b1fba2c3e85c2ff7d952b5cff18 (MD5) Previous issue date: 2019Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM)Tese (Doutorado) ? Programa de P?s-Gradua??o Multic?ntrico em Qu?mica de Minas Gerais, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2019.Dengue virus infection is one of the most neglected diseases of major importance to public health in the world. It is a disease of wide clinical spectrum, including from soft forms to severe frames, caused by different serotypes of the virus. There is no specific treatment for Dengue. However, early detection and access to adequate medical care reduce mortality rates to below 1%. New methods of diagnosis of the disease have been studied through the immobilization of dengue virus nonstructural protein 1 (NS1), as a marker used during the acute phase of the disease. For this purpose, immunoassays using electrochemical detection have been explored in several analyzes, since they are specific, simple, portable and generally disposable and can perform in situ or automated detection. In this work, the electrochemical synthesis of polymeric films derived from 4-aminobenzoic acid (4-ABA), 4-aminobenzamide (4-ABZ), 4-hydroxybenzoic acid (4-HBA) and 4-hydroxybenzamide (4-HBZ) on the surface of graphite electrodes through cyclic voltammetry (VC). Subsequently, an electropolymerization mechanism was proposed for the obtained polymers. The electrochemical, morphological and structural properties of the polymeric films formed and their applications in the immobilization of biomolecules were investigated. In this way, electrodes modified with poly(4-ABA) and poly(4-HBA) were found to be more effective immobilization of the non-structural recombinant protein 1 (rNS1) and anti-NS1 antibodies. In the second part of this work, a new electrochemical immunosensor based on specific anti-NS1 antibodies coupled to poly(4-ABA) modified graphite printed electrodes has been successfully developed for the diagnosis of Dengue virus. Validation analysis was carried with human serum samples, where after the serological tests (ELISA), different sera were tested by the Bioclin rapid test, and the diagnoses were confirmed through the impedimetric method used in this work. The results obtained were all positive for the immunochromatographic methodology used in the rapid test and for the impedimetric detection of anti-NS1 antibodies. The comparison between the results shows that the manufactured device can be applied satisfactorily for the precise diagnosis of the Dengue virus, presenting excellent results, thus being a new alternative for the detection of Dengue specific antibodies.porUFVJMA concess?o da licen?a deste item refere-se ao ? termo de autoriza??o impresso assinado pelo autor, assim como na licen?a Creative Commons, com as seguintes condi??es: Na qualidade de titular dos direitos de autor da publica??o, autorizo a Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri e o IBICT a disponibilizar por meio de seus reposit?rios, sem ressarcimento dos direitos autorais, de acordo com a Lei n? 9610/98, o texto integral da obra disponibilizada, conforme permiss?es assinaladas, para fins de leitura, impress?o e/ou download, a t?tulo de divulga??o da produ??o cient?fica brasileira, e preserva??o, a partir desta data.info:eu-repo/semantics/openAccessEletross?ntese e caracteriza??o de filmes polim?ricos aplicados ao desenvolvimento de um imunossensor para diagn?stico de Dengueinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisFilmes polim?ricosEletrodos modificadosMecanismo de polimeriza??oAnt?geno rNS1ImunossensoresPolymeric filmsModified electrodesPolymerization mechanismrNS1 antigenImmunosensorsreponame:Repositório Institucional da UFVJMinstname:Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM)instacron:UFVJMTEXTcatia_cruz_santos.pdf.txtcatia_cruz_santos.pdf.txtExtracted texttext/plain300779http://acervo.ufvjm.edu.br/jspui/bitstream/1/2125/7/catia_cruz_santos.pdf.txt8dff20423477733e77dab37ac155a885MD57LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; 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