Caracteriza??o bioqu?mica de peroxidase da abobrinha (Cucurbita pepo)

• Ano de defesa: 2019
• Autor(a) principal: Santos, Emylle Thayssa Mendon?a
• Orientador(a): Cardoso, Val?ria Macedo
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: UFVJM
• Link de acesso: http://acervo.ufvjm.edu.br/jspui/handle/1/2144
• topic: Cin?tica enzim?tica; Purifica??o; Cucurbita pepo; Enzymatic kinetics; Purification

As peroxidases podem ser obtidas de v?rios vegetais, como batata doce, rabanete, pepino, entre outros. A raiz forte (HRP) ? a principal fonte comercial de peroxidase sendo geralmente cultivada em pa?ses de clima frio. No entanto, o alto custo da HRP restringe sua aplica??o. A abobrinha (Cucurbita pepo) ? um vegetal amplamente cultivado no Brasil, sendo relativamente acess?vel e de baixo custo, podendo vir a ser uma fonte promissora de peroxidase. Portanto, o objetivo deste estudo foi extrair, purificar e caracterizar a peroxidase produzida pela abobrinha (Cucurbita pepo) para avaliar a viabilidade desta fonte enzim?tica. O extrato bruto da casca e do fruto da abobrinha sem a casca foi obtido usando tamp?o fosfato 0,1 mol L-1, pH 7, sendo posteriormente precipitado com sulfato de am?nio e aplicado a cromatografia de exclus?o em gel. A peroxidase proveniente da casca da abobrinha apresentou maior atividade, concentra??o de prote?na, atividade espec?fica e rendimento que a enzima proveniente do fruto da abobrinha sem a casca. O processo de purifica??o demonstrou ser eficiente resultando em uma alta atividade espec?fica (11,109 U.mg-1). A presen?a da peroxidase no gel, ap?s eletroforese, foi confirmada pela presen?a de duas bandas com pesos moleculares de aproximadamente 50 kDa e 60 kDa, sugerindo a exist?ncia de duas isoenzimas. A enzima apresentou pH e temperatura ?timos na faixa de 7,0 a 8,0 e entre 25 ?C e 30 ?C, respectivamente. A estabilidade m?xima ocorreu na faixa de pH entre 6,0 e 8,0, a 30 ?C. A enzima demonstrou alta afinidade pelo guaiacol e tamb?m pelo per?xido de hidrog?nio, apresentando Km de 4,68 mM e 4,76 mM, respectivamente. A enzima foi ativada na presen?a de Cu2+ e Fe3+ nas concentra??es de 1 mM, 5 mM e 10 mM e Mn2+ e Ca2+ nas concentra??es de 1 e 5 mM. A peroxidase de abobrinha n?o sofreu ativa??o pelos solventes org?nicos testados. O estudo possibilitou a obten??o da peroxidase extra?da de uma fonte vegetal extremamente acess?vel, utilizando m?todo de extra??o simples, r?pido e econ?mico. Os resultados sugerem que a abobrinha pode ser uma fonte promissora para a obten??o de peroxidase a ser utilizada em v?rias aplica??es como em diagn?stico, detoxifica??o de efluentes, tecnologia de alimentos, entre outras ?reas.