Síntese e caracterização do óxido de grafeno funcionalizado com hialuronato de sódio e avaliação dos seus efeitos na cicatrização de defeitos ósseos em tibias de ratos
| Ano de defesa: | 2020 |
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Dantas, Paulo César de LacerdaMarques, Leandro SilvaMartins Júnior, Paulo AntônioOliveira, Simone Gomes Dias deGalo, RodrigoCoutinho, Danielle Carvalho OliveiraAlcântara, Carlos Eduardo Pinto deMartins Júnior, Paulo AntônioUniversidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM)Marques, Leandro Silva2021-03-15T19:32:23Z2021-03-15T19:32:23Z20202020-03-02DANTAS, Paulo César de Lacerda. Síntese e caracterização do óxido de grafeno funcionalizado com hialuronato de sódio e avaliação dos seus efeitos na cicatrização de defeitos ósseos em tibias de ratos. 2020. 92 p. Tese (Doutorado em Odontologia) – Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, Diamantina, 2020.https://acervo.ufvjm.edu.br/items/de11540a-2df8-4025-8d70-f26c8dbb35f5Área de concentração: Clínica Odontológica.Linha de pesquisa: Propriedades físicas, químicas e biológicas dos materiais odontológicos.Em todos os documentos que compõem a obra, consta o título: "Síntese e caracterização do óxido de grafeno funcionalizado com hialuronato de sódio e avaliação dos seus efeitos na cicatrização de defeitos ósseo em tibias de ratos".Este estudo teve como objetivo sintetizar e caracterizar um nanohíbrido composto pelo óxido de grafeno (OG) funcionalizado com hialuronato de sódio (HY) (OG-HY), avaliar sua viabilidade celular in vitro e seu potencial osteogênico in vivo. O HY, o OG e o OG-HY foram caracterizados por microscopia eletrônica de varredura (MEV), espectroscopia de Raman, termogravimetria, infra-vermelho e difração de raios-X. Estudo in vitro foi realizado com os biomateriais em diferentes concentrações, nos períodos de 48 e 72 horas, para avaliar a viabilidade celular de células MC3T3-E1 e a atividade da fosfatase alcalina, por meio dos ensaios usando 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide (MTT) e do kit de bromo-4-cloro-3-indolil fosfato (BCIP), sal de nitro-blue tetrazólio (NBT), respectivamente. No estudo in vivo, os grupos experimentais foram: Controle (coágulo), HY 1%, OG (50, 100 e 200 μg/mL) e OG-HY (50, 100 e 200 μg/mL) e a unidade amostral foi um "defeito ósseo" criado em cada tíbia de ratos Wistar. Os "defeitos ósseos" criados foram preenchidos, aleatoriamente, por coágulo e pelos demais biomateriais. O cálculo amostral determinou um n=5 para cada grupo experimental e portanto, foram utilizados 40 animais. Após 7 e 14 dias dos procedimentos cirúrgicos, os animais foram eutanasiados e análises histomorfométricas foram realizadas para avaliar a capacidade osteogênica dos biomateriais. A expressão do fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF) foi avaliada por imunohistoquímica. As caracterizações dos biomateriais constataram a formação do nanohíbrido (OG-HY), representado pela funcionalização do OG com HY e concentração de 5 μg/mL do OG-HY não alterou a viabilidade das células MC3T3-E1 nem estimularam a atividade da fosfatase alcalina (p˃0,05). Após 7 dias de cirurgia, o OG-HY a 100 μg/mL foi capaz de acelerar significativamente o reparo ósseo em tíbias de ratos, quando comparado ao grupo controle (p˂0,001) e foi possível observar uma expressão de VEGF significativamente menor, também, quando comparado ao controle (p=0,0223). Esses achados mostraram que o nanohíbrido OG-HY foi capaz de acelerar a cicatrização óssea in vivo e sugerem este nanomaterial como candidato para aplicações em engenharia tecidual óssea.Tese (Doutorado) – Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2020.This study aimed to synthesize and characterize a nanohybrid composed of graphene oxide (OG) functionalized with sodium hyaluronate (HY) (OG-HY), to evaluate its cell viability in vitro and its osteogenic potential in vivo. HY, OG and OG-HY were characterized by scanning electron microscopy (SEM), Raman spectroscopy, thermogravimetry, infrared and X-ray diffraction. In vitro study was carried out with biomaterials in different concentrations, in the periods of 48 and 72 hours, to evaluate the cell viability of MC3T3-E1 cells and the activity of alkaline phosphatase, through the tests using 3- (4,5-dimethylthiazole -2-yl) -2,5- diphenyl-2H-tetrazolium bromide (MTT) and the bromine-4-chloro-3-indolyl phosphate (BCIP) kit, nitro-blue tetrazolium salt (NBT), respectively. In the in vivo study, the experimental groups were: Control (clot), HY 1%, OG (50, 100 and 200 μg / mL) and OG-HY (50, 100 and 200 μg / mL) and the sample unit was a "bone defect" created in each tibia of Wistar rats. The "bone defects" created were filled, randomly, by clot and other biomaterials. The sample calculation determined an n = 5 for each experimental group and therefore, 40 animals were used. After 7 and 14 days of the surgical procedures, the animals were euthanized and histomorphometric analyzes were performed to assess the osteogenic capacity of the biomaterials. The expression of the vascular endothelial growth factor (VEGF) was evaluated by immunohistochemistry. The characterizations of biomaterials confirmed the formation of the nanohybrid (OG-HY), represented by the functionalization of OG with HY and a concentration of 5 μg / mL of OG-HY, did not alter the viability of MC3T3-E1 cells nor did they stimulate the activity of alkaline phosphatase ( p˃0.05). After 7 days of surgery, OG-HY at 100 μg / mL was able to significantly accelerate bone repair in tibiae of rats, when compared to the control group (p˂0.001) and it was possible to observe a significantly lower VEGF expression, too , when compared to the control (p = 0.0223). These findings showed that the OG-HY nanohybrid was able to accelerate bone healing in vivo and suggest this nanomaterial as a candidate for applications in bone tissue engineering.porUFVJMA concessão da licença deste item refere-se ao à termo de autorização impresso assinado pelo autor, assim como na licença Creative Commons, com as seguintes condições: Na qualidade de titular dos direitos de autor da publicação, autorizo a Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri e o IBICT a disponibilizar por meio de seus repositórios, sem ressarcimento dos direitos autorais, de acordo com a Lei nº 9610/98, o texto integral da obra disponibilizada, conforme permissões assinaladas, para fins de leitura, impressão e/ou download, a título de divulgação da produção científica brasileira, e preservação, a partir desta data.info:eu-repo/semantics/openAccessSíntese e caracterização do óxido de grafeno funcionalizado com hialuronato de sódio e avaliação dos seus efeitos na cicatrização de defeitos ósseos em tibias de ratosinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisHialuronato de sódioEngenharia tecidualGrafenoNanomaterialReparo ósseoSodium hyaluronateTissue engineeringGrapheneBone repairreponame:Repositório Institucional da UFVJMinstname:Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM)instacron:UFVJMTHUMBNAILpaulo_cesar_lacerda_dantas.pdf.jpgpaulo_cesar_lacerda_dantas.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg2876https://acervo.ufvjm.edu.br//bitstreams/0a40a9b6-a44f-44b6-815a-4686b89b9e72/download459ced8872d0054ebc64488624315eacMD57falseAnonymousREADORIGINALpaulo_cesar_lacerda_dantas.pdfpaulo_cesar_lacerda_dantas.pdfapplication/pdf2958975https://acervo.ufvjm.edu.br//bitstreams/0d4ac0b5-30fb-47fd-a610-0bdc20533044/downloade0dfaaa4abe6ea7fc2bc10a258dbd8d2MD51trueAnonymousREADCC-LICENSElicense_urllicense_urltext/plain; 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