Purificação e caracterização de proteína ligante de heparina de promastigotas de Leishmania chagasi: implicações na infecciosidade do parasito

• Ano de defesa: 2013
• Autor(a) principal: Martins, Thaís Viana Fialho
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Viçosa; BR; Análises quantitativas e moleculares do Genoma; Biologia das células e dos tecidos; Mestrado em Biologia Celular e Estrutural; UFV
• Palavras-chave em Português: Leishmania; Lectina; Proteína Ligante de Heparina; Lectin; Heparin Binding Protein; CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOLOGIA GERAL
• Link de acesso: http://locus.ufv.br/handle/123456789/2364

A leishmaniose visceral é uma doença humana fatal causada pelo protozoário intracelular Leishmania infantum/chagasi. A captação de promastigotas de Leishmania por células do hospedeiro é um processo mediado por receptores clássicos que iniciam a fagocitose. A busca por moléculas que estejam envolvidas no processo de infecção da célula do hospedeiro pelo parasito é importante para a concepção de estratégias para o controle da doença. Entre estas moléculas estão a Proteína Ligante de Heparina (PLH), uma lectina do grupo das proteínas ubíquas, cuja característica principal é a capacidade de se ligar a carboidratos presentes em glicoproteínas ou glicolípidos. A presença dessas moléculas em espécies de Leishmania é pouco estudada. Portanto, neste trabalho, a presença de PLH em formas promastigotas de L. chagasi foi avaliada, assim como o seu papel no processo de infecção do parasito. PLH de L. chagasi (PLHLc) foi purificada por cromatografia de afinidade em coluna de heparina-agarose em sistema automatizado FPLC e a produção de anticorpos policlonais antiPLHLc foi realizada. Nós verificamos a afinidade do anticorpo pela proteína e sua localização por intermédio de ensaios de Western blotting e imunomarcação. Uma vez detectada, utilizamos o anticorpo antiPLHLc e heparina sódica como agentes bloqueadores da PLH e investigamos o efeito causado pelo seu bloqueio no processo de infecção de macrófagos J774 in vitro. Pudemos verificar que esta proteína é um importante receptor que medeia o processo de infecção parasitário. Seu bloqueio gerou uma redução parcial no processo de adesão e internalização de Leishmania. De acordo com os resultados apresentados, acredita-se que esta proteína com atividade lectínica possa se tornar, a partir de estudos futuros in vivo, uma alternativa profilática ou terapêutica para resolução da leishmaniose visceral.