Extração e purificação de peroxidase de soja (Glycine max) por adsorção de afinidade a metal imobilizado

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2001
Autor(a) principal: Sousa, Kathia Assis de
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: [s.n.]
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Peroxidase
Soja
Cromatografia de afinidade
Proteínas - Purificação
Soybean
Glycine max
Immobilized Metal Ion Affinity Chromatography
Downstream Processing
Link de acesso: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1590069
Resumo: Orientador: Telma Teixeira Franco
id UNICAMP-30_39b16704fbe24daf2f409997b3bd1a4c
oai_identifier_str oai::206804
network_acronym_str UNICAMP-30
network_name_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
repository_id_str
spelling Extração e purificação de peroxidase de soja (Glycine max) por adsorção de afinidade a metal imobilizadoPeroxidaseSojaCromatografia de afinidadeProteínas - PurificaçãoPeroxidaseSoybeanGlycine maxImmobilized Metal Ion Affinity ChromatographyDownstream ProcessingOrientador: Telma Teixeira FrancoDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia QuimicaResumo: Foram investigadas estabilidade frente a pH e temperatura e condições ótimas da enzima peroxidase do extrato bruto da casca da soja (Glycine max). Foi verificada a afinidade entre a enzima e íons cobre imobilizados no gel "Chelating Sepharose FastFlow" (CSFF) e também foi estudado o efeito do pH sobre a adsorção desta enzima. Foram construídas isotennas de adsorção para a peroxidase do extrato bruto de casca da soja e para as peroxidases padrão de soja e de nabo (horseradish), para verificar a capacidade máxima de adsorção do complexo CSFF-IDA-CU2+ para estas enzimas. Curvas de ruptura para a peroxidase do caldo bruto de casca da soja foram construídas para estudar a eficiência do complexo na adsorção da enzima. A purificação da peroxidase do extrato bruto da casca da soja foi estudada na coluna HR 5/5 empacotada com o complexo CSFF­IDA-CU2+ equilibrado com tampão fosfato de sódio O,IM a pH 6,0. Foi verificado que a peroxidase do extrato bruto da casca da soja apresentou condições ótimas de atividade a pH 4,5, mostrou-se estável por três horas em temperaturas entre 1 e 55°C. Foi observado que a adsorção mais seletiva da peroxidase do extrato bruto de casca da soja se deu a pH 6,0, quando 51% da enzima foi retida após dez minutos de contato entre a peroxidase e o complexo CSFF -IDA-Cu2+ a 25°C em tampão fosfato de sódio O,IM. A adsorção das peroxidases da casca da soja, padrão comercial de nabo e padrão comercial de soja no complexo CSFF-IDA-Cu2+ obedeceu ao modelo proposto por Langmuir. Com a construção das curvas de ruptura foi verificado que a pH 6,0 houve a melhor seletividade na separação da atividade de peroxidase, quando 96,9% de atividade foi recuperada. Na adsorção da peroxidase do extrato bruto da casca da soja na coluna HR 5/5 empacotada com CSFF-IDA-CU2+ a pH 6,0, foi obtido um fator de purificação de 5,9 vezes com um rendimento de 83,4%Abstract: The conditions for the soybean hull peroxidase activity were investigated for pH and temperature. It was observed that the best pH for maximum activity was at 4.5, however the activity was only 5% reduced at pH values 5.0 and 5.5 and was 20% reduced for pH's between 6.0 and 7.0 and 45% reduced at pH 8.0. It was stable at this pH interval for four hours period, however, it lost 20% activity at pH 4.5 after one hour incubation. Best temperature for the enzyme active was 55 °C and it was stable from 1 to 55 °C for at least three hours. The affinity between the soybean hull peroxidase and copper ions immobilized in a solid matrix was investigated. The maximum capacity ofthe CSFF-IDA-CU2+ to interact with the enzyme was calculated by plotting the concentrations of the proxidase found in the liquid phase in equilibrium with the peroxidase concentrations found in the solid phase (isotherms). Breakthrough curves were built to study the efficiency ofCSFF-IDA-CU2+ bed to adsorb the peroxidase of soybean hulI and also two standards peroxidases commercially available from soybean and ITom horseradish. The effect of pH on the adsorption of the enzyme was also investigated and it was observed that the most selective adsorption of the soybean hulI peroxidase was at pH 6.0. Purification of the soybean hull peroxidase was studied in the column HR 5/5 packed with the complex CSFF-IDA-CU2+ in 100 mM phosphate buffer at pH 6.0. The adsorption of the soybean hull peroxidase, soybean and horseradish peroxidases by the CSFF-IDA-CU2+ was observed to folIow Langmuir model. The final peroxidase purified by the process developed in this work showed that the specific activity of the enzyme was about 5.9 fold higher than that of cru de extract and the yield was about 83.4%MestradoDesenvolvimento de Processos QuímicosMestre em Engenharia Química[s.n.]Franco, Telma Teixeira, 1957-Silva, Meuris Gurgel Carlos daSilva, Maria Estela daKamimura, Eliana SetsukoUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Engenharia QuímicaPrograma de Pós-Graduação em Engenharia QuímicaUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASSousa, Kathia Assis de20012001-04-23T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf78p. : il.(Broch.)https://hdl.handle.net/20.500.12733/1590069SOUSA, Kathia Assis de. Extração e purificação de peroxidase de soja (Glycine max) por adsorção de afinidade a metal imobilizado. 2001. 78p. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1590069. Acesso em: 27 fev. 2025.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/206804porreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2017-02-18T03:20:46Zoai::206804Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2017-02-18T03:20:46Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
dc.title.none.fl_str_mv Extração e purificação de peroxidase de soja (Glycine max) por adsorção de afinidade a metal imobilizado
title Extração e purificação de peroxidase de soja (Glycine max) por adsorção de afinidade a metal imobilizado
spellingShingle Extração e purificação de peroxidase de soja (Glycine max) por adsorção de afinidade a metal imobilizado
Sousa, Kathia Assis de
Peroxidase
Soja
Cromatografia de afinidade
Proteínas - Purificação
Peroxidase
Soybean
Glycine max
Immobilized Metal Ion Affinity Chromatography
Downstream Processing
title_short Extração e purificação de peroxidase de soja (Glycine max) por adsorção de afinidade a metal imobilizado
title_full Extração e purificação de peroxidase de soja (Glycine max) por adsorção de afinidade a metal imobilizado
title_fullStr Extração e purificação de peroxidase de soja (Glycine max) por adsorção de afinidade a metal imobilizado
title_full_unstemmed Extração e purificação de peroxidase de soja (Glycine max) por adsorção de afinidade a metal imobilizado
title_sort Extração e purificação de peroxidase de soja (Glycine max) por adsorção de afinidade a metal imobilizado
author Sousa, Kathia Assis de
author_facet Sousa, Kathia Assis de
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Franco, Telma Teixeira, 1957-
Silva, Meuris Gurgel Carlos da
Silva, Maria Estela da
Kamimura, Eliana Setsuko
Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Engenharia Química
Programa de Pós-Graduação em Engenharia Química
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS
dc.contributor.author.fl_str_mv Sousa, Kathia Assis de
dc.subject.por.fl_str_mv Peroxidase
Soja
Cromatografia de afinidade
Proteínas - Purificação
Peroxidase
Soybean
Glycine max
Immobilized Metal Ion Affinity Chromatography
Downstream Processing
topic Peroxidase
Soja
Cromatografia de afinidade
Proteínas - Purificação
Peroxidase
Soybean
Glycine max
Immobilized Metal Ion Affinity Chromatography
Downstream Processing
description Orientador: Telma Teixeira Franco
publishDate 2001
dc.date.none.fl_str_mv 2001
2001-04-23T00:00:00Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv (Broch.)
https://hdl.handle.net/20.500.12733/1590069
SOUSA, Kathia Assis de. Extração e purificação de peroxidase de soja (Glycine max) por adsorção de afinidade a metal imobilizado. 2001. 78p. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1590069. Acesso em: 27 fev. 2025.
identifier_str_mv (Broch.)
SOUSA, Kathia Assis de. Extração e purificação de peroxidase de soja (Glycine max) por adsorção de afinidade a metal imobilizado. 2001. 78p. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1590069. Acesso em: 27 fev. 2025.
url https://hdl.handle.net/20.500.12733/1590069
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.none.fl_str_mv https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/206804
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
78p. : il.
dc.publisher.none.fl_str_mv [s.n.]
publisher.none.fl_str_mv [s.n.]
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instacron:UNICAMP
instname_str Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instacron_str UNICAMP
institution UNICAMP
reponame_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
collection Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
repository.name.fl_str_mv Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
repository.mail.fl_str_mv sbubd@unicamp.br
_version_ 1829137413159518208

Registros relacionados