Avaliação das respostas imunológica e histopatológica de camundongos imunizados com vacina experimental anti "Leishmania infantum"

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2020
Autor(a) principal: Roque, Guilherme Augusto Sanches, 1994-
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: [s.n.]
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1640276
Resumo: Orientadores: Selma Giorgio, Nahiara Esteves Zorgi
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Com o objetivo de desenvolver um sistema vacinal, produzimos um plasmídeo pFL-AMA, e transfectamos em promastigotas de L. infantum. Este plasmídeo tem a sua expressão somente na fase amastigota do parasita. Ao inserir sequências que codificam proteínas tóxicas (forma ativa da tripsina bovina e avidina de ovo) no plasmídeo, os parasitas transfectados morrem após diferenciarem-se em amastigota. Neste trabalho, foi avaliada e comparada a carga parasitária em baço, fígado e medula óssea de animais imunizados com a vacina experimental (L. infantum transfectadas com os plasmídeos com sequências que codificam proteínas tóxicas) e infectados com a linhagem selvagem (WT) de L. infantum, além de análise da resposta imunológica humoral e histopatologia. Os dados mostraram que quanto à carga parasitátia, camundongos imunizados apresentaram carga parasitária em baço, fígado e medula óssea após 3 semanas similares aos animais do grupo WT acompanhados da presença de células gigantes multinucleadas em baço e infiltrados linfocitários no fígado, além de aumento dos níveis de IgG, IgG1 e IgG2a. Após 10 semanas, os animais imunizados tiveram redução da carga parasitária acompanhado da diminuição dos níveis de anticorpos, além da presença de células gigantes multinucleadas em baço e infiltrados linfocitários no fígado. Com relação à proteção frente a infecção com L. infantum WT, os camundongos imunizados com parasitas transfectados foram satisfatoriamente protegidos nos dois protocolos de imunização utilizados, pois apresentaram cargas parasitárias nos órgãos afetados menores do que as de animais do grupo WT, acompanhado de altos níveis de IgG, IgG1 e IgG2a, sugerindo um mix de resposta Th1/Th2. Portanto, L. infantum transfectada com plasmídeo contendo sequências de proteínas tóxicas, que levam à morte do parasita quando da diferenciação em amastigotas, é um ótimo candidato vacinal contra a leishmaniose visceralAbstract: In the visceral leishmaniasis, the ethiologic agents are Leishmania infantum and Leishmania donovani. Despite the variety of available drugs to treat leishmaniasis, most of them lead to serious adverse effects and resistance has been reported. Nowadays, there are no legalized vacines available for humans, there are only veterinary vaccines. In order to develop a vaccinal system, our group developed the pFL-AMA plasmid, and we transfected it to L. infantum promastigotes. This plasmid is only expressed in amastigote form. Sequences which encode toxic proteins (bovine active trypsin and egg avidin) were inserted in this plasmid and the transfected parasites die after the differentiation process. In this work, the evaluation and comparison of parasite burden in the spleen, liver and the bone marrow of immunized animals with the experimental vaccine (transfected L. infantum with plasmid containing the toxic protein sequences) and infected animals with wild type line of L. infantum were performed together with the histopathological and humoral response analysis. The data showed that immunized mice presented parasite burden in spleen, liver and bone marrow similar to infected mice at 3 weeks post-immunization/infection together with the presence of mononuclear giant cells in the spleen, linfocitary infiltrates in the liver and high levels of IgG, IgG1 and IgG2a. At 10 weeks post-immunization/infection, the immunized mice presented a reduced parasite burden in all the organs together with reduced levels of the antibodies. In addition, giant multinucleated cells were observed in the spleen and linfocitary infiltrates in the liver. The protection in the face of re-infection with wild L. infantum ocurred in both imunization protocols, because the immunized animals presented reduced parasite burden in all affected organs when compared with WT group together with high levels of IgG, IgG1 e IgG2a suggesting a mixed Th1/Th2 response. So, the transfected L. infantum with plasmid expressing toxic proteins, wchich leads the parasite to death after the differeciation process, is a great vaccine candidate against visceral leishmaniasisMestradoRelações Antrópicas, Meio Ambiente e ParasitologiaMestre em Biologia AnimalCAPES001FAPESP2018/23302-6CNPQ405581/2018-1[s.n.]Giorgio, Selma, 1962-Zorgi, Nahiara EstevesCoelho, Adriano CappellazzoGoto, HiroUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de BiologiaPrograma de Pós-Graduação em Biologia AnimalUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASRoque, Guilherme Augusto Sanches, 1994-20202020-10-29T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf1 recurso online (99 p.) : il., digital, arquivo PDF.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1640276ROQUE, Guilherme Augusto Sanches. Avaliação das respostas imunológica e histopatológica de camundongos imunizados com vacina experimental anti "Leishmania infantum". 2020. 1 recurso online (99 p.) Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1640276. Acesso em: 28 fev. 2025.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/1158088Requisitos do sistema: Software para leitura de arquivo em PDFporreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2021-02-08T17:53:47Zoai::1158088Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2021-02-08T17:53:47Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
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