Investigação de marcadores de epileptogênese no modelo animal zebrafish

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2013
Autor(a) principal: Barbalho, Patrícia Gonçalves, 1985-
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: [s.n.]
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Epilepsia
Interleucina-1beta
Peixe-zebra
Pentilenotetrazol
Epilepsy
Interleukin-1 beta
Zebrafish
Pentylenetetrazol
Link de acesso: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1621261
Resumo: Orientador: Cláudia Vianna Maurer-Morelli
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spelling Investigação de marcadores de epileptogênese no modelo animal zebrafishMarkers of epileptogenesis in the zebrafish seizure modelEpilepsiaInterleucina-1betaPeixe-zebraPentilenotetrazolEpilepsyInterleukin-1 betaZebrafishPentylenetetrazolOrientador: Cláudia Vianna Maurer-MorelliDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências MédicasResumo: O Danio rerio é um peixe teleósteo popularmente conhecido como zebrafish que têm se destacado como modelo animal favorável para investigações genéticas devido à facilidade de manipulação in vivo, por sua transparência nas fases embrionária e larval e por seu desenvolvimento externo. Recentemente, foi demonstrado que o zebrafish é capaz de exibir padrão comportamental e alteração da atividade eletrográfica durante crise epiléptica como visto em roedores, tornando-o um modelo promissor para as investigações moleculares das epilepsias. Os estudos sobre os diferentes eventos já conhecidos das epilepsias no zebrafish estão apenas começando e, portanto, há ainda muito que ser investigado para uma melhor caracterização deste modelo para estudos em epilepsia. Estudos clínicos e em modelos animais mostraram que a crise epiléptica eleva os níveis da interleucina-1 beta e induz morte neuronal. Nesse sentido, o presente trabalho se propôs a investigar (i) o perfil temporal de expressão do transcrito do gene da interleucina-1 beta (il1b) no cérebro imaturo e adulto do zebrafish após a indução de crise epiléptica pelo agente químico Pentilenotetrazol por transcriptase reversa-PCR quantitativa e também, sua relação da expressão com a idade em que é realizada a indução da crise no cérebro imaturo e (ii) a morte neuronal pela histoquímica do Fluoro-Jade B (FJB) no cérebro imaturo e adulto do zebrafish após a indução de crise epiléptica pelo agente químico Pentilenotetrazol. Neste trabalho conseguimos estabelecer com sucesso as condições ideais para o acasalamento desta espécie e obtenção de embriões e, para a criação de larvas. Além disso, padronizamos o processamento histológico para a criosecção do cérebro do zebrafish. A análise temporal do transcrito do gene il1b revelou um padrão de expressão similar ao observado em roedores. A marcação por FJB não identificou inequivocadamente a presença de morte neuronal após crise epilépticaAbstract: Danio rerio is a teleost fish popular named as zebrafish that has emerged as a suitable animal model for genetic investigations due to its features such as: facility for in vivo manipulation, transparency during embryonic and larval stages and external development. Recently, It was demonstrated that larvae and adult zebrafish (Danio rerio) seizure model mimics the behavior, eletrographic and c-fos features that are well established in rodent models of epilepsy, making the zebrafish as a promising model for studying the molecular mechanisms underlying epilepsies. However, the potential of the zebrafish model for epilepsy studies has been partly described since the molecular changes and neuronal loss after seizure has not yet been investigated. Proinflammatory cytokines, such as interleukin-1beta (il1b), has shown to be upregulated in surgical specimens of pharmacoresistent patients and in experimental rodent models of seizure, however the profile of this cytokine in zebrafish model for epilepsy is unknown. For this reason, and in view of the importance of inflammatory response in the pathophysiology of epilepsy, we sought to investigate the temporal transcript profile of interleukin-1b (il1b), a proinflammatory cytokine, in adult and immature (larvae) zebrafish brain after Pentylenetetrazole-evoked seizure, as well its aged-related expression in the developing brain by reverse transcriptase-quantitative PCR and neuronal death by Fluoro-Jade B (FJB) staining in adult zebrafish brain. Zebrafish breeding was successfully established during this work as well as the protocol for histological procedures using the zebrafish brain. Our results showed a short up-regulation of il1b mRNA levels after seizure in immature and adult zebrafish brain similar as with those patterns observed in rodent models. FJB did not show a reliable neuronal death staining in the zebrafish brain after seizureMestradoCiências BiomédicasMestra em Ciências Médicas[s.n.]Maurer-Morelli, Cláudia Vianna, 1966-Lopes-Cendes, Íscia TeresinhaGodard, Ana Lúcia BrunialtiUniversidade Estadual de Campinas. Faculdade de Ciências MédicasPrograma de Pós-Graduação em Ciências MédicasUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASBarbalho, Patrícia Gonçalves, 1985-2013info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf87 f. : il.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1621261BARBALHO, Patrícia Gonçalves. Investigação de marcadores de epileptogênese no modelo animal zebrafish. 2013. 87 f. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1621261. Acesso em: 15 mai. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/914282porreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2017-02-18T07:07:41Zoai::914282Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2017-02-18T07:07:41Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
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