A evolução tumoral durante a gravidez : interação entre a via mTOR, via apoptótica e atividade celular em células neoplásicas (adenocarcinoma de cólon- MAC16) e placentárias (BeWo)
Ano de defesa: | 2021 |
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Resumo: | Orientadores: Maria Cristina Cintra Gomes Marcondes, Laís Rosa Viana e André Gustavo de Oliveira |
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A evolução tumoral durante a gravidez : interação entre a via mTOR, via apoptótica e atividade celular em células neoplásicas (adenocarcinoma de cólon- MAC16) e placentárias (BeWo)Tumour evolution during pregnancy : interaction between the mTOR pathway, apoptotic pathway and cellular activity in neoplastic (murine adenocarcinoma of the colon- MAC16) and placental (BeWo) cellsCâncerGravidezTumor trofoblástico de localização placentáriaNeoplasias do cólonSerina-treonina quinases TORSobrevivência celularCancerPregnancyTrophoblastic tumor, Placental siteColonic neoplasmsTOR serine threonine kinasesCell survivalOrientadores: Maria Cristina Cintra Gomes Marcondes, Laís Rosa Viana e André Gustavo de OliveiraDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de BiologiaResumo: O câncer se caracteriza pela alta taxa de proliferação e invasividade, que necessita de elevado aporte energético. Quando associado à gravidez, seu tratamento exige atenção especial, pois afeta dois pacientes, mãe e feto, e porque as alterações fisiológicas da gravidez, que garantem o desenvolvimento do embrião e do feto, também necessitam de um elevado aporte energético. A combinação de ambas as alterações metabólicas pode acarretar em competição por substratos entre células tumorais e do concepto, que pode causar prejuízos no seu desenvolvimento. Tendo em vista a interação de células placentárias e tumorais, este trabalho estudou as interações entre células MAC16 (adenocarcinoma de cólon murino) e células trofoblásticas placentárias humanas (BeWo), in vitro, observando os efeitos mútuos através de meio condicionado (MC) submetido ou não à influência do aminoácido de cadeia ramificada leucina. Para tal, células MAC16 e BeWo foram mantidas em cultura celular e tratadas com diferentes proporções de MC de modo que células BeWo receberam MC provindo de células MAC16 e vice-versa. Cada tratamento foi analisado por 24h, 48h e 72h em triplicata e, ao final, as células foram coradas com Cristal Violeta para avaliação da viabilidade celular. As células BeWo também foram cultivadas e tratadas com MC-50 (meio composto por 50% de RPMI fresco e 50% RPMI provindo de cultura celular), acrescidos ou não com leucina (25 ou 50µM) por um período de 72h e então analisadas quanto à expressão das proteínas mTOR, Akt, 4EBP1, S6K1 (p70), BAX e Bcl-2. Os resultados mostram que o MC das células MAC16 não impactou a viabilidade de células BeWo, porém o MC de células BeWo alterou de forma negativa a viabilidade celular de células tumorais MAC16. O MC-50 proveniente das células MAC16 não causou diferenças estatísticas ao que se refere à expressão de proteínas da via mTOR e via apoptótica em células BeWo, independente da suplementação nutricional com leucina. Assim, conclui-se que células BeWo produzem fatores que podem alterar as células cancerígenas MAC16, porém o oposto não é verdadeiro e que mais estudos são necessários para elucidar os efeitos de produtos em ambas as célulasAbstract: Cancer is characterised by a high proliferation and invasiveness rate, dispending high energy supply, while the physiologic adaptation during pregnancy guarantees the embryo and foetus’ healthy development. When associated with pregnancy, cancer treatment requires special attention, as it affects two patients, mother and foetus, and because the physiological changes in pregnancy, which ensure the development of the embryo and foetus, also require a high energy intake. The combination of both metabolic changes can lead to competition for substrates between tumour cells and the conceptus, which can damage its development. Thus, this study aimed to evaluate the interactions and mutual effects between MAC16 tumour cells (murine colon adenocarcinoma) and human placental trophoblastic cells (BeWo), subjected or not to leucine influence. For this purpose, some important proteins related to the mTOR pathway and apoptotic pathways were analysed to answer whether these cells’ signalling pathways decreased or were impaired in BeWo cells when treated with MAC16 conditioned medium (CM) and vice-versa; whether any difference in cell viability was found in BeWo cells when treated with CM from MAC16 cells and vice-versa; and whether leucine modulated the mTOR pathway and apoptotic signalling. Thus, MAC16 and BeWo cells were grown in cell culture procedures and treated with different proportions of CM-culture medium from BeWo or MAC16 cells. Each treatment occurred in 24h, 48h and 72h times in triplicate and then stained with Violet Crystal for evaluation of cellular viability. The cells BeWo were also grown and treated with CM-50 (medium composed by 50% of fresh RPMI and 50% of medium provided from MAC16 cellular culture), added or not to leucine (25 or 50µM) for 72h to procedure the Western Blot analysis, for protein analysis of mTOR, Akt, 4EBP1, S6K1 (p70), BAX and Bcl-2. Treatment with the CM of MAC16 cells had no effect on BeWo cells; on the other hand, the BeWo cell’s CM negatively impacted the cellular viability of MAC16 tumour cells. The MAC16 cells’ CM also caused no statistical differences regarding the expression of proteins from the mTOR pathway and apoptotic pathway in BeWo cells studied in this thesis, independently of nutritional supplementation. Summing up, the results showed that BeWo cells tend to produce factors that cause changes in MAC16 cancer cells, but not vice-versa and that more experiments are necessary to elucidate de interaction of these two cells and their productsMestradoBiologia CelularMestre em Biologia Celular e EstruturalCAPES88882.329632/2019-01[s.n.]Gomes-Marcondes, Maria Cristina Cintra, 1961-Viana, Laís Rosa, 1988-Oliveira, André Gustavo de, 1980-Cruz, Bread Leandro Gomes daAreas, Miguel ArcanjoUniversidade Estadual de Campinas. Instituto de BiologiaPrograma de Pós-Graduação em Biologia Celular e EstruturalUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASOliveira, Melina de Moraes Santos, 1994-20212021-05-05T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf1 recurso online ( 97p.) : il., digital, arquivo PDF.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1589OLIVEIRA, Melina de Moraes Santos. A evolução tumoral durante a gravidez: interação entre a via mTOR, via apoptótica e atividade celular em células neoplásicas (adenocarcinoma de cólon- MAC16) e placentárias (BeWo). 2021. 1 recurso online ( 97p.) Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1589. Acesso em: 15 mai. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/1233741Requisitos do sistema: Software para leitura de arquivo em PDFporreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2021-12-02T14:43:21Zoai::1233741Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2021-12-02T14:43:21Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false |
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