Avaliação do extrato etanólico das folhas de Eugenia uniflora L. (Myrtaceae) sobre a expressão dos genes C3, CAT, GPx e BDNF em um modelo animal de neurodegeneração

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2018
Autor(a) principal: Lira, Gilvana Scoculi de lattes
Orientador(a): Pincerati, Márcia lattes
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Positivo
Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia Industrial
Departamento: Pós-Graduação
País: Brasil
Palavras-chave em Português:
Área do conhecimento CNPq:
Link de acesso: https://repositorio.cruzeirodosul.edu.br/handle/123456789/2270
Resumo: A Doença de Alzheimer (DA) é doença neurodegenerativa progressiva que se manifesta por meio do declínio cognitivo global, principalmente sobre as funções de memória. Os prejuízos associados à DA estão relacionados a lesões celulares provenientes de danos oxidativos e neuroinflamação. Considerando que a DA é uma doença ainda sem cura, a busca por terapias alternativas que atuem na redução dos prejuízos associados à doença pode melhorar a qualidade de vida dos pacientes. Dessa forma, este estudo teve como objetivo a avaliação do potencial neuroprotetor do extrato etanólico das folhas de Eugenia uniflora L. em um modelo animal de neurodegeneração associado à DA, por meio da análise de expressão de quatro genes associados com neurogênese e plasticidade sináptica – fator neurotrófico derivado do encéfalo (BDNF), inflamação – C3 e estresse oxidativo – glutationa peroxidase (GPx) e catalase (CAT). Para os procedimentos experimentais, foram utilizados 18 ratos machos da linhagem Wistar divididos em quatro grupos. O grupo 1 (controle, n = 4), recebeu injeção intracerebroventricular (icv) de tampão citrato e etanol a 10% via oral (v.o.); o grupo 2 (n = 5) recebeu a administração icv de estreptozotocina (STZ) (3 mg/ kg) e etanol a 10% v.o.; o grupos 3 (n = 5) e o grupo 4 (n = 4) receberam a administração icv de STZ e foram tratados com o extrato de folhas de Eugenia uniflora L. v.o. nas concentrações de 300 mg/kg e 1000 mg/ kg, respectivamente. O tratamento com o extrato foi realizado durante um mês. O RNA total do hipocampo foi extraído utilizando o TRIzol™ Reagent em combinação com Kit de extração PureLink®RNA Mini Kit. As amostras de RNA foram convertidas em cDNA utilizando o kit GoScriptTM Reverse Transcriptase. A análise de expressão gênica foi realizada pela técnica de RT-qPCR. Os dados foram analisados utilizando o método comparativo de Ct (threshold cycle) para determinar os níveis relativos de expressão de mRNA. Os valores de quantificação relativa foram submetidos a ANOVA. Os resultados mostraram que não houve diferença significativa da expressão relativa dos genes estudados nos grupos analisados. Apesar destes genes serem apontados como fortes candidatos a estarem associados à DA, os resultados encontrados no presente trabalho demonstraram que a injeção icv de STZ não leva à alteração da expressão dos genes BDNF, C3, GPx e CAT no período de quatro meses após a administração de STZ. Além disso, o tratamento com o extrato etanólico de Eugenia uniflora L. v.o não altera a expressão destes genes após três meses do fim do tratamento.
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spelling 2021-05-26T13:47:59Z20182021-05-26T13:47:59Z2018https://repositorio.cruzeirodosul.edu.br/handle/123456789/2270A Doença de Alzheimer (DA) é doença neurodegenerativa progressiva que se manifesta por meio do declínio cognitivo global, principalmente sobre as funções de memória. Os prejuízos associados à DA estão relacionados a lesões celulares provenientes de danos oxidativos e neuroinflamação. Considerando que a DA é uma doença ainda sem cura, a busca por terapias alternativas que atuem na redução dos prejuízos associados à doença pode melhorar a qualidade de vida dos pacientes. Dessa forma, este estudo teve como objetivo a avaliação do potencial neuroprotetor do extrato etanólico das folhas de Eugenia uniflora L. em um modelo animal de neurodegeneração associado à DA, por meio da análise de expressão de quatro genes associados com neurogênese e plasticidade sináptica – fator neurotrófico derivado do encéfalo (BDNF), inflamação – C3 e estresse oxidativo – glutationa peroxidase (GPx) e catalase (CAT). Para os procedimentos experimentais, foram utilizados 18 ratos machos da linhagem Wistar divididos em quatro grupos. O grupo 1 (controle, n = 4), recebeu injeção intracerebroventricular (icv) de tampão citrato e etanol a 10% via oral (v.o.); o grupo 2 (n = 5) recebeu a administração icv de estreptozotocina (STZ) (3 mg/ kg) e etanol a 10% v.o.; o grupos 3 (n = 5) e o grupo 4 (n = 4) receberam a administração icv de STZ e foram tratados com o extrato de folhas de Eugenia uniflora L. v.o. nas concentrações de 300 mg/kg e 1000 mg/ kg, respectivamente. O tratamento com o extrato foi realizado durante um mês. O RNA total do hipocampo foi extraído utilizando o TRIzol™ Reagent em combinação com Kit de extração PureLink®RNA Mini Kit. As amostras de RNA foram convertidas em cDNA utilizando o kit GoScriptTM Reverse Transcriptase. A análise de expressão gênica foi realizada pela técnica de RT-qPCR. Os dados foram analisados utilizando o método comparativo de Ct (threshold cycle) para determinar os níveis relativos de expressão de mRNA. Os valores de quantificação relativa foram submetidos a ANOVA. Os resultados mostraram que não houve diferença significativa da expressão relativa dos genes estudados nos grupos analisados. Apesar destes genes serem apontados como fortes candidatos a estarem associados à DA, os resultados encontrados no presente trabalho demonstraram que a injeção icv de STZ não leva à alteração da expressão dos genes BDNF, C3, GPx e CAT no período de quatro meses após a administração de STZ. Além disso, o tratamento com o extrato etanólico de Eugenia uniflora L. v.o não altera a expressão destes genes após três meses do fim do tratamento.AD is a progressive neurodegenerative disorder that manifests itself through the global cognitive decline, mainly on memory functions. The damages associated with AD are related to cellular lesions from oxidative damage and neuroinflammation. Considering that AD is an uncured disease yet, the search for alternative therapies that act to reduce the damages associated with this disease can improve patients’ quality of life. Therefore, this study aimed to evaluate the neuroprotective potential of the ethanolic extract leaves of E. uniflora L. in an animal model of neurodegeneration associated with AD, through the expression analysis of four genes associated with neurogenesis and synaptic plasticity - brain derived neurotrophic factor (BDNF), inflammation – C3 and oxidative stress - glutathione peroxidase (GPx) and catalase (CAT). Eighteen male Wistar rats were divided into four groups. Group 1 received icv citrate buffer and 10% of ethanol v.o; group 2 (n = 5) received icv administration of STZ (3 mg / Kg) and 10% of ethanol v.o; group 3 (n = 5) and group 4 (n = 4) received icv administration of STZ and were treated with ethanolic extract of E. uniflora L. v.o at concentrations of 300 mg / Kg and 1000 mg/ Kg, respectively. Treatement with the extract was performed for one month after the icv injection of STZ. After three months of the end of treatement, the animals were euthanized. Total hippocampal RNA was extracted using TRIzolTM Reagent in combination with the PureLink® RNA Mini Kit. The RNA samples were converted to cDNA using the GoScripTM Reverse Transcriptase kit. Expression analysis of the BDNF, C3, GPx and CAT genes was performed by the RT-qPCR techinique. Data were analyzed using the comparative Ct (Threshold cycle) method to determinate relative levels of mRNA expression. Relative quantification values were submitted to ANOVA. The results showed that there was no significant difference in the relative expression of the studied genes in the analyzed groups. Although these genes are reported to be strong candidates for AD, the results found in the present study demonstrated that icv injection of STZ does not lead to altered expression of BDNF, C3, GPx and CAT genes within four months afterwards administration of STZ. In addition, the treatement with ethanolic extract of E. uniflora L. v.o does not changes the expression of these genes three months after the end of the treatment.porUniversidade PositivoPrograma de Pós-Graduação em Biotecnologia IndustrialUPBrasilPós-GraduaçãoCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOLOGIA GERALBiotecnologia industrialDoença de AlzheimerEstresse oxidativoEstreptozocinaDoenças neurodegenerativasAvaliação do extrato etanólico das folhas de Eugenia uniflora L. (Myrtaceae) sobre a expressão dos genes C3, CAT, GPx e BDNF em um modelo animal de neurodegeneraçãoinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisPincerati, Márciahttp://lattes.cnpq.br/1632493068360047Silva, Iltonhttp://lattes.cnpq.br/2457028554249650http://lattes.cnpq.br/6039244323432115Lira, Gilvana Scoculi deinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da Universidade Cruzeiro do Sulinstname:Universidade Cruzeiro do Sul (UNICSUL)instacron:UNICSULORIGINALGilvana Lira.pdfGilvana Lira.pdfDissertaçãoapplication/pdf2797810http://dev.siteworks.com.br:8080/jspui/bitstream/123456789/2270/1/Gilvana%20Lira.pdfbe03599447c742a9ebbb1fcc879b7a40MD51LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81748http://dev.siteworks.com.br:8080/jspui/bitstream/123456789/2270/2/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD52123456789/22702021-05-28 13:01:16.587oai:repositorio.cruzeirodosul.edu.br: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Repositório InstitucionalPRIhttps://repositorio.cruzeirodosul.edu.br/oai/requestmary.pela@unicid.edu.bropendoar:2021-05-28T16:01:16Repositório Institucional da Universidade Cruzeiro do Sul - Universidade Cruzeiro do Sul (UNICSUL)false
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