Avaliação da eficiência catalítica de células de Aspergillus oryzae IPT-301 imobilizadas por reticulação para a síntese de fruto-oligossacarídeos em modo batelada
| Ano de defesa: | 2025 |
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| Tipo de documento: | Dissertação |
| Tipo de acesso: | Acesso aberto |
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| Instituição de defesa: |
Universidade Federal de Alfenas
Campus Poços de Caldas Mestrado em Engenharia Química |
| Programa de Pós-Graduação: |
Programa de Pós-Graduação em Engenharia Química
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| Departamento: |
Instituto de Ciência e Tecnologia
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Não Informado pela instituição
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Resumo: | A crescente demanda por fruto-oligossacarídeos (FOS) como prebióticos funcionais tern estimulado o desenvolvimento de bioprocessos mais eficientes e sustentáveis. Neste trabalho, foi investigada a produção de FOS em biorreatores em modo batelada utilizando células de Aspergillus oryzae IPT-301 imobilizadas por reticulação com glutaraldeído. A estratégia eliminou etapas de purificação enzimática, reduziu limitações difusionais e conferiu maior estabilidade operacional ao biocatalisador. O planejamento experimental do tipo Delineamento Composto Central Rotacional (DCCR) permitiu otimizar as condições de concentração de biomassa (m.m -1) e velocidade de agitação (rpm), alcançando atividade máxima de transfrutosilação de 240,50 U g 1 após 32 horas de reação. Estudos cinéticos e termodinâmicos revelaram parâmetros de elevada robustez com o tempo de meia-vida superior a 230 minutos em determinadas condições, energia de ativação de 729,96 kJ/mol e valores positivos de energia livre de Gibbs (AG), que indicam resistência à desnaturação. Os valores de entalpia (AH) mostraram que a desnaturaşão exige altos níveis de energia, refletindo forte integridade estrutural, enquanto a entropia (AS) indicou baixa desordem molecular, característica desejável para aplicações em processos prolongados. Esses resultados comprovam que o biocatalisador mantém atividade mesmo em condições industriais, com vantagens para reatores contínuos e de leito fixo. A combinação de elevada atividade enzimática, estabilidade térmica e viabilidade operacional demonstra que a imobilização por reticulação é uma estratégia promissora para o escalonamento da produção de FOS. Este trabalho contribui com evidências experimentais que fortalecem o uso de biocatalisadores mais duráveis e sustentáveis na biotecnologia de alimentos, aproximando o processo da realidade industrial. |
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Campos, Ana Carolina SudárioOttoni, Cristiane AngélicaOliveira, Flávio Augusto Dias dePerna, Rafael Firmani2025-12-22T15:14:37Z2025-12-22T15:14:37Z2025-08-29https://repositorio.unifal-mg.edu.br/handle/123456789/3234http://lattes.cnpq.br/3056768842268230http://lattes.cnpq.br/75914609691356292023.1.220.001A crescente demanda por fruto-oligossacarídeos (FOS) como prebióticos funcionais tern estimulado o desenvolvimento de bioprocessos mais eficientes e sustentáveis. Neste trabalho, foi investigada a produção de FOS em biorreatores em modo batelada utilizando células de Aspergillus oryzae IPT-301 imobilizadas por reticulação com glutaraldeído. A estratégia eliminou etapas de purificação enzimática, reduziu limitações difusionais e conferiu maior estabilidade operacional ao biocatalisador. O planejamento experimental do tipo Delineamento Composto Central Rotacional (DCCR) permitiu otimizar as condições de concentração de biomassa (m.m -1) e velocidade de agitação (rpm), alcançando atividade máxima de transfrutosilação de 240,50 U g 1 após 32 horas de reação. Estudos cinéticos e termodinâmicos revelaram parâmetros de elevada robustez com o tempo de meia-vida superior a 230 minutos em determinadas condições, energia de ativação de 729,96 kJ/mol e valores positivos de energia livre de Gibbs (AG), que indicam resistência à desnaturação. Os valores de entalpia (AH) mostraram que a desnaturaşão exige altos níveis de energia, refletindo forte integridade estrutural, enquanto a entropia (AS) indicou baixa desordem molecular, característica desejável para aplicações em processos prolongados. Esses resultados comprovam que o biocatalisador mantém atividade mesmo em condições industriais, com vantagens para reatores contínuos e de leito fixo. A combinação de elevada atividade enzimática, estabilidade térmica e viabilidade operacional demonstra que a imobilização por reticulação é uma estratégia promissora para o escalonamento da produção de FOS. Este trabalho contribui com evidências experimentais que fortalecem o uso de biocatalisadores mais duráveis e sustentáveis na biotecnologia de alimentos, aproximando o processo da realidade industrial.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais – FAPEMIGThe growing demand for fructo-oligosaccharides (FOS) as functional prebiotics has driven the development of more efficient and sustainable bioprocesses. In this study, FOS production was investigated in batch bioreactors using Aspergillus oryzae IPT- 301 cells immobilized by cross-linking with glutaraldehyde. This strategy eliminated enzymatic purification steps, reduced diffusional limitations, and provided greater operational stability to the biocatalyst. A Central Composite Rotational Design (CCRD) experimental approach was used to optimize biomass concentration (g•L"’) and agitation speed (rpm), achieving a maximum transfructosylation activity of 240.50 U g 1 after 32 hours of reaction. Kinetic and thermodynamic studies revealed highly robust parameters, with a half-life exceeding 230 minutes under certain conditions, an activation energy of 729.96 kJ/mol, and positive Gibbs free energy (AG) values, indicating resistance to denaturation. The enthalpy (AH) values showed that denaturation requires high energy levels, reflecting strong structural integrity, while entropy (AS) indicated low molecular disorder a desirable trait for long-term process applications. These results demonstrate that the biocatalyst maintains activity even under industrial conditions, offering advantages for continuous and fixed-bed reactors. The combination of high enzymatic activity, thermal stability, and operational feasibility shows that cross-linking immobilization is a promising strategy for scaling up FOS production. This work provides experimental evidence supporting the use of more durable and sustainable biocatalysts in food biotechnology, bringing the process closer to industrial reality.67Universidade Federal de AlfenasCampus Poços de CaldasMestrado em Engenharia QuímicaPrograma de Pós-Graduação em Engenharia QuímicaUNIFAL-MGInstituto de Ciência e Tecnologiainfo:eu-repo/semantics/openAccesshttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 BrazilEngenharias::Engenharia QuímicaAspergillus oryzaeFrutosiltransferaseReticulaçãoImobilização de células inteirasFruto-oligossacarídeosOtimização de processosFructosyltransferaseCrosslinkingWhole-cell immobilizationFructooligosaccharidesAvaliação da eficiência catalítica de células de Aspergillus oryzae IPT-301 imobilizadas por reticulação para a síntese de fruto-oligossacarídeos em modo bateladainfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionporreponame:Repositório Institucional da Universidade Federal de Alfenas - RiUnifalinstname:Universidade Federal de Alfenas (UNIFAL)instacron:UNIFALORIGINALDissertação de Ana Carolina Sudário Campos.pdfDissertação de Ana Carolina Sudário Campos.pdfapplication/pdf14674958https://repositorio.unifal-mg.edu.br/bitstreams/d41dea19-721e-4745-b579-be39773c4af7/download0f340009ab5564731750ca3ea7c3971cMD51CC-LICENSElicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; 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