Avaliação de fatores envolvidos na foliculogênese de búfalas com a utilização de primers delineados para bovinos

• Ano de defesa: 2021
• Autor(a) principal: Silva Junior, Edjalma Rodrigues da [UNESP]
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
• Palavras-chave em Português: FGF; FSHR; IGF; Ovário; PCR; Ovary
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/11449/215043

O conhecimento da fisiologia ovariana é importante durante a aplicação de biotécnicas assistidas de reprodução, tanto animal quanto humana. Durante a foliculogênese, os folículos apresentam aumento em número e diferenciação morfológica das células que os circundam e, com a progressão do desenvolvimento, se tornam unidades funcionais no parênquima ovariano. Esses folículos podem ser considerados como pool de reserva e, na dependência do estímulo, podem permanecer quiescentes, sofrerem atresia ou chegar até a ovulação. Durante esse desenvolvimento, podemos ter a presença de fatores de crescimento produzidos no parênquima ovariano, que são modulados pela presença dos hormônios folículo estimulante (FSH) e luteinizante (LH). Além disso, o FSH e o LH também apresentam ação direta durante todo o curso da foliculogênese. Dentre os fatores de crescimento mais comuns, podemos citar o fibroblástico (FGF), insulínico (IGF), epidermal (EGF) e seus respectivos receptores que atuam na diferenciação e progressão do desenvolvimento folicular, desde as fases iniciais até a ovulação. Sendo assim, os objetivos do presente trabalho foram revisar a regulação parácrina dos fatores de crescimento durante a foliculogênese, atresia folicular, descrever e quantificar a expressão gênica desses fatores (FGF2, IGF1 e EGF), seus receptores (FSHR, FGFR2C e FGFR3C) e agentes envolvidos na apoptose (CASP3) presentes no ovário de búfalas vazias e gestantes. Em abatedouros, coletaram-se ovários de búfalas vazias (n=12) e gestantes (n=12), que se encontravam no terço final da gestação. Para a padronização das amostras, todas as búfalas vazias se encontravam cíclicas, com a presença de folículos em desenvolvimento e corpo lúteo evidente no parênquima. As amostras foram encaminhadas ao laboratório em tempo máximo de uma hora após a coleta. Todos os ovários foram dissecados, os folículos antrais aspirados e as amostras de tecido ovariano coletadas e armazenadas em nitrogênio líquido (-196°C) para posterior análise. No laboratório, foram utilizados primers delineados para bovinos na utilização do RT-qPCR na quantificação gênica das amostras. Após a padronização técnica, normalização das amostras e transformações dos valores em bases logarítmicas foi realizado a quantificação por RT-qPCR das amostras dos ovários de búfalas. Foram consideradas com diferença estatística, as amostras que apresentaram significância em 5% no pós-teste de Wilcoxon. Todos os primers foram expressos no RT-qPCR, entretanto, apenas o FSHR apresentou diferença significativa entre os grupos experimentais. O FSH atua na estimulação e regulação dos fatores parácrinos na regulação da foliculogênese, uma vez que houve variação da expressão de seu receptor (FSHR) entre os grupos experimentais. No grupo experimental de búfalas vazias, houve oscilação na expressão do FSHR decorrente das diferentes fases do ciclo estral que as fêmeas se encontravam, pois a modulação da secreção de esteroides pode afetar o desenvolvimento e progressão do desenvolvimento folicular. Sendo assim, conclui-se que houve expressão gênica dos fatores de crescimento testados presentes no tecido ovariano que são responsáveis pela modulação e progressão da foliculogênese em búfalas gestantes e vazias. Não foi possível visualizar a diferença na expressão do fator apoptótico pesquisado (CASP3) entre os grupos experimentais e, em adição, é viável a utilização de primers desenhados para bovinos na pesquisa de fatores de crescimento em ovário de búfalas.