Análise da sinalização química e virulência em Escherichia coli enterohemorrágica e Citrobacter rodentium mediado por membros da microbiota

• Ano de defesa: 2020
• Autor(a) principal: Melchior, Karine [UNESP]
• Orientador(a): Moreira, Cristiano Gallina
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
• Palavras-chave em Português: microbiota; Sinalização Química; Virulência; Patogenicidade
• Palavras-chave em Inglês: Chemical signaling; Pathogenicity
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/11449/193009

Escherichia coli Enterohemorrágica (EHEC) é um patógeno gastrointestinal conhecido por sua capacidade de causar colites hemorrágicas. Possui em seu genoma a Ilha de patogenicidade locus of enterocyte effacement (LEE), responsável por codificar genes relacionados a importantes fatores de virulência. O sensor de histidina quinase QseC, presente na membrana de EHEC, mostrou-se importante para a regulação dessa ilha. Recentemente nosso grupo demonstrou que bactérias comensais benéficas para a microbiota como o Bacteroides tethaitaomicron (Bt), podem antagonicamente aumentar a expressão de genes de virulência em bactérias patogênicas, como EHEC, pela alteração do panorama metabólico. Dessa forma este trabalho visou entender como é a regulação da virulência de EHEC na presença de bactérias comensais, com intuito de compreender a relação entre microbiota – patógeno, como o patógeno responde e modula sua resposta ao ambiente, bem como a participação do sensor QseC na sinalização envolvida nesses processos. Com os resultados obtidos foi possível evidenciar que QseC muda a regulação gênica por butirato em EHEC e houve diferenças do fenótipo de motilidade e crescimento na presença desse ácido graxo. A expressão de hcp-2 do T6SS está aumentada em baixa glicose, porém diminuída na linhagem mutante, indicando participação de QseC na regulação desse sistema. No entanto, a introdução de Bt na condição de baixa glicose, levou diminuição da expressão do gene hcp-2 de T6SS em EHEC, indicando regulação dessa bactéria comensal no T6SS deste patógeno. Membros benéficos da microbiota humana estavam aumentados na ausência de QseC em Simulador de Ecossistema Microbiano Intestinal Humano, indicando diferenças na competição de EHEC na ausência desse sensor. Lactobacillus acidophilus, diminuiu drasticamente o crescimento de EHEC, porém o mesmo não foi observado para Lactobacillus reuteri, demonstrando que a competição é espécie-dependente dos lactobacilos presentes. Ainda, o sensor QseC é necessário para uma efetiva colonização e disseminação de Citrobacter rodentium em camundongos C57BL/6. Assim, evidenciou-se que membros da microbiota modulam a resposta de EHEC, o sensor QseC têm participação na sinalização promovida por essas bactérias comensais e é necessário para uma efetiva colonização no hospedeiro.