Oligossacarídeos obtidos por hidrólise química de polissacarídeos fúngicos: purificação e atividade anticoagulante

• Ano de defesa: 2017
• Autor(a) principal: Ferreira, Jéssica Moreli [UNESP]
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
• Palavras-chave em Português: β-glucanas fúngicas; Hidrólise ácida parcial; HPAEC/PAD; Cromatografia; Oligossacarídeos sulfatados; Atividade anticoagulante; Fungal β-glucans; Partial acid hydrolysis; Chromatography; Sulfated oligosaccharides; Anticoagulant activity
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/11449/150040

Polissacarídeos e oligossacarídeos de plantas, algas, bactérias e fungos representam um grupo de moléculas com potencial para aplicação em terapia medicamentosa e em biotecnologia. Os oligossacarídeos podem ser obtidos, a partir dos respectivos polissacarídeos, por degradação química, física ou bioquímica. β-glucanas secretadas pelo fungo ascomiceto Lasiodiplodia theobromae (EPSgraviola, EPSlaranja e EPSmanga), cujas soluções apresentam elevado grau de viscosidade, dificultando os testes de atividade biológica, foram hidrolisadas parcialmente com TFA 0,2 M, 100 °C, em tempos variáveis, para a obtenção dos respectivos oligossacarídeos, que foram analisados por cromatografia líquida de íons. O EPSmanga mostrou-se, nas condições estudadas, o substrato ideal para a produção de oligossacarídeos, especialmente aos 45 minutos de hidrólise. As frações solúveis, contendo o material hidrolisado, foram submetidas, inicialmente, à cromatografia de filtração em gel Sephadex G-15, que forneceu dois picos, um composto predominantemente por mono e dissacarídeos e outro contendo oligossacarídeos maiores, de onde foi separada a Fração I, a qual foi submetida à cromatografia de adsorção em carvão-Celite, utilizando um gradiente descontínuo de etanol-água 0 a 60% (v/v). A fração etanol-água a 50%, denominada Fração II, contendo a maior proporção de oligossacarídeos com maior DP foi submetida a uma segunda condição de eluição, utilizando um gradiente contínuo de etanol-água 42-49%, gerando frações ainda compostas por mais de um oligossacarídeo. A Fração II contendo oligossacarídeos com DP > 5 foi sulfatada, e os oligossacarídeos com DS de 0,80 foram submetidos à cromatografia de filtração em gel Sephadex G-15, para remoção de sal. Após análises por FT-IR para acompanhar o aparecimento de novas bandas, provenientes dos grupos sulfatos, os oligossacarídeos derivatizados foram utilizados em testes de atividade anticoagulante. O aumento do tempo para a formação do coágulo, nos testes do aPTT e TT, foram concentração-dependente, indicando que os oligossacarídeos sulfatados apresentam ação anticoagulante.