Formação de biofilmes monotípicos e heterotípicos por Enterococcus faecalis E Enterococcus faecium em dentina radicular

• Ano de defesa: 2018
• Autor(a) principal: Santos, Ana Carolina Chipoletti dos [UNESP]
• Orientador(a): Junqueira, Juliana Campos [UNESP]
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
• Palavras-chave em Português: Enterococcus faecalis; Enterococcus faecium; Dentina Radicular; Interações Microbianas; Biofilme; Dentin Radicular
• Palavras-chave em Inglês: Microbial interactions; Biofilm
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/11449/152839

E. faecalis e E. faecium possuem grande relevância nas infecções hospitalares porapresentarem facilidade em adquirir resistência aos antibióticos. E. faecalis tambémapresentam alta prevalência nas infecções endodônticas, entretanto a importânciade E. faecium para a odontologia ainda precisa ser esclarecida. Assim, o objetivodesse estudo foi comparar cepas clínicas de E. faecium com as cepas de E. faecalisem relação a capacidade de formação de biofilme na dentina radicular e penetraçãonos túbulos dentinários. Além disso, foi avaliada a interação dessas espécies embiofilmes mistos. Para a realização desse estudo, foram utilizadas cepas clínicas,previamante, isoladas de canais radiculares com infecções endodõnticas eidentificadas pelo PCR multiplex. Entre as cepas isoladas, foram selecionadas 4cepas de E. faecalis e 2 cepas de E. faecium. Primeiramente, foi realizado aformação dos biofilmes monotípicos das cepas de E. faecalis e E. faecium sobredentinas radiculares de dentes bovinos. Os biofilmes foram formados em placas demicrotitulação por diferentes tempos: 2, 4, 6, 24, 48, 72, 96 e 120 horas. Os biofilmesformados foram, então, analisados pela contagem de células viáveis (UFC/mL) equantificação da biomassa total (método do cristal violeta). Além disso, os biofilmesforam analisados por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) procurando-seobservar a penetração das células de E. faecalis e E. faecium nos túbulosdentinários. A seguir foram formados biofilmes heterotípicos de E. faecalis e E.faecium para estudo das interações ecológicas estabelecidas entre as espécies. Aanálise dos biofilmes heterotípicos foi feita pela quantificação da biomassa total(cristal violeta) procurando-se detectar a presença de relações sinérgicas ouantagônicas. Os resultados foram submetidos à Análise de Variância (ANOVA) eteste de Tukey, considerando-se nível de 5%. Os resultados obtidos na contagem deUFC/mL dos biofilmes monotípicos, revelaram que as 6 cepas testadas apresentamgrande capacidade para formar biofilmes na dentina radicular, alcançando valoresde UFC/mL entre 8 a 12 log de acordo com o tempo de observação. Em relação aanálise das imagens de MEV, as cepas clínicas de E. faecalis e E. faeciumdemonstraram capacidade semelhante para formar biofilmes e penetrar nos túbulosdentinários. Na comparação da quantificação da biomassa dos biofilmesmonotípicos e heterotípicos, observamos que a interação das cepas clínicas E.faecalis e E. faecium favoreceu a adesão e crescimento do biofilme. Assim, concluiuseque as cepas de E. faecalis e E. faecium apresentam a mesma capacidade deformar biofilmes sobre a superfície radicular. Além disso, em biofilmes mistos, essasduas espécies estabelecem relações ecológicas sinérgicas, aumentandosignificativamente a formação de biofilmes.