Estudo peptídico e determinação do perfil de metabólitos de venenos de escorpiões da família buthidae: Tityus serrulatus, Tityus bahiensis e Tityus obscurus

• Ano de defesa: 2016
• Autor(a) principal: Dias, Nathalia Baptista [UNESP]
• Orientador(a): Palma, Mario Sergio [UNESP]
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
• Palavras-chave em Português: Peptidômica; Veneno; Toxinas; Escorpiões; LCMS
• Palavras-chave em Inglês: Venom; Toxins; Scorpions; LCMS
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/11449/138150

Numerosos estudos produzidos nos últimos 30 anos, vêm elucidando estruturas e atividades biológicas de vários componentes de venenos animais, demonstrando suas complexas composições. Os venenos de escorpiões são misturas complexas de compostos biologicamente ativos, tais como: compostos de baixa massa molar, peptídeos e proteínas, sendo estas últimas as mais amplamente estudadas. Até então, pouco se conhece sobre os pequenos peptídeos e metabolitos dos venenos de escorpiões, sendo necessárias pesquisas para ampliar esse conhecimento. Este estudo visou a obtenção de um perfil peptídico detalhado dos venenos das espécies T. serrulatus, T. bahienis e T. obscurus, com foco principal nos pequenos peptídeos lineares, antes negligenciados em venenos de escorpiões. A extração em acetonitrila 50 % (v/v) foi uma das diferenças estratégicas para esse objetivo, e a separação e sequenciamento destes peptídeos foram realizados utilizando-se um sistema LCESI- IT-TOF. Os componentes peptídicos dos venenos dos escorpiões estudados estão distribuídos na faixa de massa molar de 400-4000 Da, sendo possível detectar a presença de 521 peptídeos distintos no veneno de T. serrulatus, 460 peptídeos no veneno de T. bahiensis e 517 peptídeos no veneno de T. obscurus. Também foi possível estabelecer os perfis peptídicos dos venenos das três espécies estudadas, assim como obter a sequencia de 66 peptídeos, dos quais alguns apresentaram semelhanças com toxinas já conhecidas de escorpiões. Treze dos novos peptídeos detectados, contendo entre 6 e 19 aminoácidos, foram sintetizados e caracterizados com relação às suas atividades biológicas em ensaios de antibiose, hemólise, desgranulação de mastócitos, LDH, ensaio de campo aberto, dor e inflamação em mamíferos, demonstrando algumas atividades principalmente com relação à hemólise, dor e locomoção de mamíferos. Este trabalho também elucidou o perfil de metabólitos nestes venenos em um sistema LCMS-Q-TOF-MS de maneira qualitativa e quantitativa. Para essa finalidade, foi realizada a padronização das condições cromatográficas com utilização de cromatografia de pareamento iônico para a melhor separação e identificação de compostos tais como aminas biogênicas, poliaminas, aminoácidos, derivados de nucleosídeos, etc., detectados nos venenos. A complexidade química demonstrada no presente trabalho corrobora com o fato de que as moléculas pequenas, tanto peptídeos quanto metabólitos, deverão agir em sinergismo com as grandes toxinas nos venenos, potencializando seus efeitos em vítimas de ferroadas por esses animais.