Influência da inibição de JAK na progressão da periodontite

• Ano de defesa: 2024
• Autor(a) principal: Godoi, Mariely Araújo de [UNESP]
• Orientador(a): Stabili, Morgana Rodrigues Guimarães [UNESP]
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
• Palavras-chave em Português: Periodontite; Inibidores de Janus Quinases; Transdução de sinais; Imunomodulação
• Palavras-chave em Inglês: Periodontitis; Janus Kinase inhibitors; Signal transduction; Immunomodulation
• Link de acesso: https://hdl.handle.net/11449/255095

A periodontite, semelhante a outras doenças crônicas, envolve a ativação de citocinas que são moduladas por vias de sinalização intracelular, incluindo a via Janus kinase/Signal Transducers and Activators of Transcription (JAK/STAT). Considerando o papel desta via de sinalização no processo inflamatório, diversos inibidores farmacológicos de JAK foram aprovados pela Food and Drug Administration (FDA) para o tratamento de doenças inflamatórias, e têm sido associados a redução dos sinais e sintomas destas doenças, além de apresentarem um perfil farmacológico seguro e eficaz. Na periodontite, poucos estudos avaliaram o papel de JAK no processo de patogênese da doença, e os resultados são divergentes. O presente estudo tem como objetivo avaliar o efeito da administração sistêmica de inibidores de JAK1-3 e JAK3, sobre a progressão da periodontite em ratos, e investigar seu papel modulatório em células do microambiente periodontal. No estudo in vivo, os animais foram submetidos a colocação de ligaduras nos primeiros molares inferiores para indução da periodontite, e receberam, concomitantemente à progressão da doença, água destilada ou inibidores de JAK1-3 ou JAK3, via oral (gavagem intragástrica) por 7 dias. Animais do grupo controle negativo, sem ligaduras, receberam administração de água pelo mesmo período. Ao fim do período experimental os animais foram eutanasiados, e as mandíbulas contendo tecido gengival ao redor do primeiro molar, removidas para avaliação dos seguintes desfechos: reabsorção óssea alveolar; quantificação do número de osteoclastos; expressão gênica de Il-6, Tnf-alfa e Rankl, e proteica de TNF-alfa; expressão e localização de células inflamatórias (CD45 e CD3); e quantificação de elementos celulares (infiltrado celular, vasos sanguíneos e matriz extracelular). Os resultados demonstraram que ambos os inibidores preveniram a perda óssea induzida pela periodontite (p<0.05), e reduziram a quantidade de osteoclastos em quase 30%. Redução significativa do infiltrado celular, bem como um aumento da matriz colágena e de vasos sanguíneos foram encontrados nos animais tratados com os inibidores (p<0.05). Corroborando os dados da análise estereométrica, os inibidores de JAK também reduziram a quantidade de células CD45+ (marcador de leucócitos) no tecido gengival. Redução significativa na expressão dos marcadores inflamatórios (em nível gênico e proteico) também foi encontrada no tecido gengival dos animais tratados com os inibidores farmacológicos. Adicionalmente, experimentos in vitro investigaram o efeito dos inibidores de JAK sobre a diferenciação de osteoclastos (RAW 264.7) induzidos por RANKL, produção de espécies reativas de oxigênio (ROS), bem como sobre a formação de nódulos de mineralização e proliferação de células pré-osteoblásticas (MC3T3-E1). Através da microscopia de fluorescência, observamos que ambos os inibidores demonstraram redução significativa na formação de osteoclastos. Os dados também indicaram que a inibição de JAK inibiu a produção de ROS após estímulo com LPS. Em relação à osteogênese, foi observado que a inibição de JAK estimulou a proliferação celular e a formação de nódulos de mineralização. Os resultados demonstram que a inibição das isoformas de JAK apresentaram um impacto significativo na redução das alterações inflamatórias em animais com periodontite, indicando o protagonismo da via na patogênese e progressão da doença, além do papel relevante sobre células do metabolismo ósseo.