Efeito de células tumorais estressadas e seus exosomos sobre a ativação de células dendríticas in vitro

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2020
Autor(a) principal: Gorgulho, Carolina Mendonça [UNESP]
Orientador(a): Kaneno, Ramon [UNESP], Romagnoli, Graziela Gorete
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: eng
Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Autofagia
Apoptose
Cólon (Anatomia) - Câncer
Células dendríticas
Quimioterapia metronômica
Bloqueio da autofagia
Palavras-chave em Inglês:
Autophagy
Apoptosis
Colon (Anatomy) - Cancer
Dendritic cells
Metronomic chemotherapy
Autophagy inhibition
Link de acesso: http://hdl.handle.net/11449/191663
Resumo: A autofagia é um processo catabólico utilizado por todas as células para a manutenção da homeostase sob estresse celular. Células tumorais podem sequestrar a maquinaria autofágica para evitar a morte celular. Células deficientes em apoptose podem acionar a via autofágica, tornando-se mais resistentes a drogas citotóxicas do que células wild type. Neste estudo, nós investigamos como células tumorais deficientes em apoptose (e consequentemente mais autofágicas) se comportam após a quimioterapia e inibição farmacológica da autofagia. Células HCT 116 wild type e variantes deficientes em apoptose p53-/-, PUMA-/- e BAX-/- foram tratadas com 5-fluorouracil (5-FU) e a autofagia induzida pelo quimioterápico foi bloqueada com hidroxicloroquina (HCQ). Nós observamos que o fenótipo das células tumorais é diferencialmente modulado pelo tratamento com baixa dose de 5-FU (especialmente a molécula CD54). O tratamento com 5-FU por 24h mata significativamente células HCT 116 wild type enquanto que as mutantes são mais resistentes. A combinação do 5-FU com o bloqueio da autofagia aumentou a morte em células BAX-/- mas não afetou as outras variantes, sugerindo maior dependência da autofagia para sobreviver à quimioterapia. A co-cultura de células dendríticas (DCs) humanas com estas células tumorais ou seus exosomos não teve efeito sobre o fenótipo de DCs.
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spelling Gorgulho, Carolina Mendonça [UNESP]Universidade Estadual Paulista (Unesp)Kaneno, Ramon [UNESP]Romagnoli, Graziela Gorete2020-02-26T19:56:13Z2020-02-26T19:56:13Z2020-02-07http://hdl.handle.net/11449/19166300092918433004064056P588458355506378090000-0002-4292-3298A autofagia é um processo catabólico utilizado por todas as células para a manutenção da homeostase sob estresse celular. Células tumorais podem sequestrar a maquinaria autofágica para evitar a morte celular. Células deficientes em apoptose podem acionar a via autofágica, tornando-se mais resistentes a drogas citotóxicas do que células wild type. Neste estudo, nós investigamos como células tumorais deficientes em apoptose (e consequentemente mais autofágicas) se comportam após a quimioterapia e inibição farmacológica da autofagia. Células HCT 116 wild type e variantes deficientes em apoptose p53-/-, PUMA-/- e BAX-/- foram tratadas com 5-fluorouracil (5-FU) e a autofagia induzida pelo quimioterápico foi bloqueada com hidroxicloroquina (HCQ). Nós observamos que o fenótipo das células tumorais é diferencialmente modulado pelo tratamento com baixa dose de 5-FU (especialmente a molécula CD54). O tratamento com 5-FU por 24h mata significativamente células HCT 116 wild type enquanto que as mutantes são mais resistentes. A combinação do 5-FU com o bloqueio da autofagia aumentou a morte em células BAX-/- mas não afetou as outras variantes, sugerindo maior dependência da autofagia para sobreviver à quimioterapia. A co-cultura de células dendríticas (DCs) humanas com estas células tumorais ou seus exosomos não teve efeito sobre o fenótipo de DCs.Autophagy is a catabolic process used by all cells to maintain homeostasis, particularly under nutrient, genomic, and oxidative stress. Tumor cells can highjack the autophagic machinery to evade cell death. Apoptosis-deficient cells are able to trigger autophagy, making them more resistant to cytotoxic drugs than wild type cells. In this study, we investigated how apoptosis-defective (and therefore with enhanced autophagic processes) tumor cell lines behave in the setting of chemotherapeutic agents and pharmacological inhibition of autophagy. Wild type (WT) HCT-116 colon cancer cells and their apoptosis-defective mutants p53-/-, PUMA-/- and BAX-/- were treated with 5-fluorouracil (5-FU). Drug induced autophagy was blocked with hydroxychloroquine (HCQ). The phenotype of cancer cells is differentially modulated by low-dose 5-FU (especially CD54 expression). WT HCT-116 cells are significantly lysed by 5-FU after 24h of treatment, while the mutants are more resistant. Combination of 5-FU with autophagy inhibition increased the susceptibility of BAX-/- cells but did not affect the other variants, suggesting a higher dependence of BAX loss on autophagy for surviving chemotherapy. Co-culture of human dendritic cells (DC) with these cell lines or with their secreted exosomes has minimal direct effect on DC phenotype.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)CNPq: 140250/2016-6CAPES: 88881.190276/2018-01engUniversidade Estadual Paulista (Unesp)AutofagiaApoptoseCólon (Anatomia) - CâncerCélulas dendríticasQuimioterapia metronômicaBloqueio da autofagiaAutophagyApoptosisColon (Anatomy) - CancerDendritic cellsMetronomic chemotherapyAutophagy inhibitionEfeito de células tumorais estressadas e seus exosomos sobre a ativação de células dendríticas in vitroEffect of stressed tumor cells and their secreted exosomes on dendritic cell activation in vitroinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UNESPinstname:Universidade Estadual Paulista (UNESP)instacron:UNESPPatologia - FMBPatologiaImunopatologiaUniversidade Estadual Paulista (UNESP), Faculdade de Medicina, Botucatu36 meses após a data da defesa8845835550637809[1]0000-0002-4292-3298[1]Banca públicaPublicationa3cdb24b-db92-40d9-b3af-2eacecf9f2bavirtual::91592-1a3cdb24b-db92-40d9-b3af-2eacecf9f2bavirtual::91592-19da3fa8e-6c18-4b9b-8fd4-7151d6ba8c1bvirtual::190646-19da3fa8e-6c18-4b9b-8fd4-7151d6ba8c1bvirtual::190646-1THUMBNAILgorgulho_cm_dr_bot_int.pdf.jpgWritten by FormatFilter org.dspace.app.mediafilter.PDFBoxThumbnail on 2023-10-27T06:06:23Z (GMT).Generated Thumbnailimage/jpeg4052https://repositorio.unesp.br/bitstreams/5da000c1-bb9f-43c5-b0ab-0ba341597a17/download9a5a5db653772b1eb5356c2a1cbcf00dMD56falseAnonymousREADgorgulho_cm_dr_bot_par_sub.pdf.jpgWritten by FormatFilter org.dspace.app.mediafilter.PDFBoxThumbnail on 2023-10-27T06:06:23Z (GMT).Generated Thumbnailimage/jpeg2602https://repositorio.unesp.br/bitstreams/7e49282f-3d58-44c7-98c1-46d5c5048d97/download86690794335f7f8b4dc54e45d6403e19MD58falseAnonymousREADLICENSElicense.txtWritten by org.dspace.content.LicenseUtilstext/plain; charset=utf-83078https://repositorio.unesp.br/bitstreams/0b2aee66-1bbe-4783-9af4-4981255104aa/downloadd9372d047081c6779cd6548a9b643aaeMD52falseAnonymousREADORIGINALgorgulho_cm_dr_bot_int.pdfgorgulho_cm_dr_bot_int.pdfapplication/pdf1389347https://repositorio.unesp.br/bitstreams/0124143d-bee3-4141-a6cd-2810f7d113fc/download40a34edc9e17d28b983319f2ebd315e9MD53trueAnonymousREADgorgulho_cm_dr_bot_par_sub.pdfgorgulho_cm_dr_bot_par_sub.pdfapplication/pdf640663https://repositorio.unesp.br/bitstreams/3cdf7209-2e98-4d24-b2e4-b91a35836431/downloada1eb0a46d67320d0ace8ed48140d0427MD54falseAnonymousREADTEXTgorgulho_cm_dr_bot_int.pdf.txtWritten by FormatFilter org.dspace.app.mediafilter.TikaTextExtractionFilter on 2023-10-27T06:06:23Z (GMT).Extracted texttext/plain100262https://repositorio.unesp.br/bitstreams/fe34c2a3-2bf3-4e32-aa86-eaf343cca941/downloadbe9faabdf5622d0300a1c9c814e2731dMD55falseAnonymousREADgorgulho_cm_dr_bot_par_sub.pdf.txtWritten by FormatFilter org.dspace.app.mediafilter.TikaTextExtractionFilter on 2023-10-27T06:06:23Z (GMT).Extracted texttext/plain66901https://repositorio.unesp.br/bitstreams/a5fc0242-004c-4ec2-ab7d-b08a7b317bd0/downloada86367d578fefbf9ab108c089997b54fMD57falseAnonymousREAD11449/1916632026-01-26T13:05:56.828864Zopen.accessoai:repositorio.unesp.br:11449/191663https://repositorio.unesp.brRepositório InstitucionalPUBhttp://repositorio.unesp.br/oai/requestrepositoriounesp@unesp.bropendoar:29462026-01-26T13:05:56Repositório Institucional da UNESP - 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