Desenvolvimento de um bioinseticida específico contra Aedes aegypti e Aedes albopictus utilizando leveduras transgênicas e a tecnologia de interferência de RNA.

• Ano de defesa: 2025
• Autor(a) principal: Bozoni, Filipe Trindade [UNESP]
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
• Palavras-chave em Português: Aedes aegypti; Aedes albopictus; RNA de interferência; shRNA; Bioinseticida; Levedura; Controle de vetores; RNA interference; Bioinsecticide; Yeast; Vector control
• Link de acesso: https://hdl.handle.net/11449/311114

Aedes aegypti e Aedes albopictus são espécies de mosquitos vetores de doenças graves, como dengue, zika e chikungunya. O controle desses mosquitos é um desafio para a saúde pública em todo o mundo. O uso de inseticidas químicos é a abordagem mais utilizada de controle atualmente, porém o surgimento de resistência aos inseticidas químicos convencionais, a poluição ambiental e efeitos em espécies não-alvo causados por estes, dificultam ainda mais o processo de controle. Portanto, novas estratégias para o controle desses mosquitos são necessárias. O uso de tecnologias de interferência de RNA, como os Short-hairpin RNAs (shRNAs) tem o potencial de interromper a expressão de genes específicos nos mosquitos, como genes envolvidos no desenvolvimento neural e no metabolismo, se mostrando promissores para o controle de vetores. O presente estudo tem como objetivo desenvolver um bioinseticida específico para Aedes aegypti e Aedes albopictus usando shRNAs. O vetor escolhido para a produção e entrega de shRNA foi a levedura Saccharomyces cerevisiae, que tem se mostrado um sistema eficiente e seguro para a produção de RNA interferente. Foram identificados 2 genes alvo: 1) Semaforina-1a (SEMA1A), importante para o desenvolvimento neural dos mosquitos; 2) Receptor 1 da serotonina (5-HTR1) que expressam receptores que regulam numerosas cascatas de sinalização intracelular; Essenciais para os mosquitos e que já tem resultados publicados, então shRNAs foram projetados para silenciá-los. As sequências específicas para expressão dos shRNAs foram inseridas em plasmídeos os quais são clonados em E.coli e posteriormente transformados em leveduras, que transcrevem os shRNAs específicos, antes de serem inativadas por calor. Em seguida, os shRNAs, foram testados em larvas de mosquitos vivos em ensaios laboratoriais para a avaliação de aspectos como mortalidade e sobrevivência larval. Os resultados de ensaios laboratoriais demonstraram que o consumo de levedura SEMA1A e 5-HTR1 apresenta taxas de mortalidade significativas em larvas dos mosquitos Aedes spp. Estudos futuros devem ser realizados para otimizar a produção e entrega de levedura que expressa shRNA inseticida e, assim, melhor avaliar esta nova e promissora intervenção de controle de mosquitos, possibilitando o desenvolvimento de abordagens ainda mais eficazes baseadas nessa tecnologia.