Biofilmes mistos de Mycobacterium tuberculosis e Paracoccidioides brasiliensis e ação de chalcona livre e carreada no sistema nanoemulsionado

• Ano de defesa: 2018
• Autor(a) principal: Medina-Alarcón, Kaila Petronila [UNESP]
• Orientador(a): Fusco Almeida, Ana Marisa, Pavan, Fernando Rogerio
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
• Palavras-chave em Português: Mycobacterium tuberculosis; Paracoccidioides brasiliensis; Coinfecção; Biofilme misto; chalconas; Nanoemulsão; Coinfection; Mixed Biofilm; chalcone; Nanoemulsion
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/11449/157177

As infecções pulmonares são um problema global e estão classificadas em terceiro lugar entre as principais causas de morte. Entre as infecções pulmonares crônicas estão a tuberculose (TB) e a paracoccidioidomicose (PCM). A TB é uma doença cujo principal agente etiológico é o Mycobacterium tuberculosis e a PCM tem como agente etiológico o complexo Paracoccidioides spp. As duas doenças podem ocorrer na forma de coinfecção, com incidência aproximada de 2,8 a 5,5% dos casos nos países da América do Sul e 10% no Brasil. Ambos os microrganismos já foram descritos na forma de biofilme monoespécie e o tratamento de ambas as doenças tem merecido atenção, devido a casos de resistência e as poucas opções terapêuticas. Diante do exposto, este trabalho visa mostrar, pela primeira vez, a capacidade de M. tuberculosis e P. brasiliensis se associarem por meio do crescimento na forma de um biofilme misto in vitro, a fim de elaborar um novo protótipo de 3’chalcona carreada numa nanoemulsão com atividade para as formas planctônica e de biofilme. Para isso, inicialmente foi padronizada e caracterizada a formação dos biofilmes monoespécie da linhagem ATCC M. tuberculosis (H37Rv), da linhagem clínica (Rv40) e da linhagem de P. brasiliensis (Pb18) e dos biofilmes mistos das associações de H37Rv+Pb18 e Rv40+ Pb18 (nesta ordem de crescimento), ambas as associações mostraram um aparente sinergismo entre elas. Na formação do biofilme misto inverso denominado assim pela ordem de associação, onde primeiramente colocou-se a linhagem de P. brasiliensis (Pb18), seguida da adição de linhagem ATCC M. tuberculosis (H37Rv), formando o biofilme misto (Pb18+H37Rv), foi observada aparente competição entre os microrganismos. Todos os biofilmes, seja monoespécie e mistos se mostraram consolidados entre 30 a 45 dias de formação para todas as situações. Posteriormente avaliou-se a atividade antifúngica e antimicobacteriana dos derivados de chalconas semissintéticas frente às linhagens já relatadas anteriormente na sua forma planctônica. Os melhores resultados foram para a 3’chalcona, a qual foi selecionada para verificação da atividade antibiofilme. Devido à pouca solubilidade e estabilidade da 3’chalcona, foram desenvolvidas três nanoemulsões. Assim, a 3’chalcona foi incorporada na nanoemulsão 1 (SNL+3’chalcona), nanoemulsão 2 sem ergosterol (Me+3’chalcona) e a nanoemulsão 3 com ergosterol (Me+E+3’chalcona), sendo que as duas primeiras possuem colesterol na sua composição e a terceira possui colesterol e ergosterol. Todas as nanoemulsões mostraram uma alta atividade antifúngica e boa atividade antimicobacteriana, melhorando a atividade antifúngica em 4 vezes e em 2 vezes a atividade antimicobacteriana quando comparada com a 3’chalcona livre, além de estas formulações não apresentarem citotoxicidade com altos Índices de seletividade (IS) e alta atividade contra os biofilmes monoespécie, com inibição de até 78%. Também mostraram uma alta inibição dos biofilmes misto, com inibição de até 78% e 76% para H37Rv + Pb18 e Rv40 + Pb18, respectivamente, melhorando a atividade antibiofilme da 3’chalcona livre em até 50%. Além disso, todas as nanoemulsões apresentaram maior atividade antibiofilme do que a rifampicina, fármaco utilizado como controle de tratamento. Portanto, todas as nanoemulsões apresentaram resultados muito promissores; ressalta-se que a nanoemulsão SNL+3’chalcona apresentou os melhores resultados antibiofilme em todas as situações e, poderia se tornar um possível protótipo medicamentoso para o tratamento desta coinfecção.