Efeito da remoção seletiva de tecido cariado nas características imunofenotípicas apresentadas por células-tronco mesenquimais da polpa de dentes decíduos humanos

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2018
Autor(a) principal: Bottezini, Paola Arosi
Orientador(a): Casagrande, Luciano
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Não Informado pela instituição
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Palavras-chave em Inglês:
Link de acesso: http://hdl.handle.net/10183/202374
Resumo: A Remoção Seletiva de Tecido Cariado (RSTC) consiste na manutenção de uma dentina contaminada sob o material restaurador, com o objetivo de evitar a exposição da polpa e manter a sua vitalidade. A interação dos metabólitos bacterianos com os resíduos inflamatórios, provenientes do processo carioso e do procedimento restaurador, sinaliza e modula o processo de formação de dentina terciária. Células mesenquimais indiferenciadas presentes na polpa participam desse reparo, migrando, proliferando e diferenciando-se em células tipo-odontoblasto que passam a secretar matriz dentinária. Entretanto, permanece incerto como essas interações podem afetar a manutenção de células-tronco mesenquimais (CTMs) presentes na polpa de dentes decíduos (SHEDs). O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito da RSTC nas características imunofenotípicas, no potencial de diferenciação e proliferação celular apresentadas por SHEDs. Células da polpa de dentes decíduos hígidos (n=9) e com RSTC (n=3) foram isoladas e cultivadas. Para caracterização imunofenotípica, células incubadas com os anticorpos CD14, CD29, CD34, CD45, CD73, CD90, CD105, CD184, HLA-DR e STRO-1 foram avaliadas por citometria de fluxo. A capacidade de diferenciação celular foi avaliada através da indução das células em linhagens adipogênica, osteogênica e condrogênica. Para mensuração da viabilidade e proliferação celular, foi realizado o ensaio de MTT nos dias 1, 3 e 7. A taxa de sucesso no isolamento foi de 66,6% e 100% para as culturas de dentes hígidos e com RSTC, respectivamente. Não houve diferença estatisticamente significativa entre os grupos na média de fluorescência para os marcadores de superfície testados (p>0.05). Células de ambos os grupos foram positivas para CD29, CD73, CD90 e negativas para CD14, CD34, CD45, CD73, CD184, HLA-DR e STRO-1/PE. Culturas de ambos os grupos foram capazes de se diferenciar nas linhagens adipogênica, condrogênica e osteogênica e apresentaram taxa de proliferação semelhantes (p>0.05). Desta forma, pode-se concluir que CTMs da polpa de dentes decíduos submetidos à RSTC exibiram características semelhantes às células obtidas de dentes decíduos hígidos, sugerindo que a presença de um tecido desmineralizado infectado na base de uma restauração adesiva não altera as características apresentadas por SHEDs.
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O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito da RSTC nas características imunofenotípicas, no potencial de diferenciação e proliferação celular apresentadas por SHEDs. Células da polpa de dentes decíduos hígidos (n=9) e com RSTC (n=3) foram isoladas e cultivadas. Para caracterização imunofenotípica, células incubadas com os anticorpos CD14, CD29, CD34, CD45, CD73, CD90, CD105, CD184, HLA-DR e STRO-1 foram avaliadas por citometria de fluxo. A capacidade de diferenciação celular foi avaliada através da indução das células em linhagens adipogênica, osteogênica e condrogênica. Para mensuração da viabilidade e proliferação celular, foi realizado o ensaio de MTT nos dias 1, 3 e 7. A taxa de sucesso no isolamento foi de 66,6% e 100% para as culturas de dentes hígidos e com RSTC, respectivamente. Não houve diferença estatisticamente significativa entre os grupos na média de fluorescência para os marcadores de superfície testados (p>0.05). Células de ambos os grupos foram positivas para CD29, CD73, CD90 e negativas para CD14, CD34, CD45, CD73, CD184, HLA-DR e STRO-1/PE. Culturas de ambos os grupos foram capazes de se diferenciar nas linhagens adipogênica, condrogênica e osteogênica e apresentaram taxa de proliferação semelhantes (p>0.05). Desta forma, pode-se concluir que CTMs da polpa de dentes decíduos submetidos à RSTC exibiram características semelhantes às células obtidas de dentes decíduos hígidos, sugerindo que a presença de um tecido desmineralizado infectado na base de uma restauração adesiva não altera as características apresentadas por SHEDs.Selective caries removal (SCR) is the maintenance of a contaminated dentin under the restorative material, in order to avoid the exposure of the pulp and maintain its vitality. The interaction of bacterial metabolites with inflammatory residues from the carious process and the restorative procedure, signals and modulates the process of tertiary dentinformation. Undifferentiated mesenchymal cells present in the pulp participate in this repair, migrating, proliferating and differentiating into odontoblast-like cells that starts to secrete dentin matrix. However, it remains unclear how these interactions may affect the maintenance of mesenchymal stem cells (MSCs) present in the pulp of deciduous teeth (SHEDs). The present study aimed to evaluate the effect of SCR on immunophenotypic characteristics, on the potential for cell differentiation and viability presented by SHEDs. Dental pulp cells from sound (n = 9) and SCR teeth (n = 3) were isolated and cultured. For immunophenotypic characterization, cells incubated with the antibodies CD14, CD29, CD34, CD45, CD73, CD90, CD105, CD18, HLA-DR and STRO-1 were evaluated by flow cytometry. Cell differentiation capacity was evaluated through the induction of the cells in adipogenic, osteogenic and chondrogenic lineages. To measure cell viability, the MTT assay was performed on days 1, 3 and 7. The success rate in isolation was 66.7% and 100% for healthy and RSTC cultures, respectively. There was no statistically significant difference between the groups in the mean fluorescence for the surface markers tested (p>0.05). Cells from both groups were positive for CD29, CD73, CD90 and negative for CD14, CD34, CD45, CD73, CD184, HLA-DR and STRO-1. Cultures of both groups were able to differentiate in the adipogenic, chondrogenic and osteogenic lines and presented similar v rates (p>0.05). Thus, it can be concluded that MSCs from deciduous pulp submitted to SCR exhibited similar characteristics to cells obtained from sound deciduous teeth, suggesting that the presence of infected demineralized tissue on the basis of an adhesive restoration does not alter the characteristics presented by SHEDs.application/pdfporCélulas-troncoCárie dentáriaDente decíduoPolpa dentáriaStem cellsDental cavityDeciduous toothDental pulpEfeito da remoção seletiva de tecido cariado nas características imunofenotípicas apresentadas por células-tronco mesenquimais da polpa de dentes decíduos humanosThe effect of seletive carious removal on the immunophenotypic characteristics presented by mesenchymal stem cells from human deciduous teeth info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisUniversidade Federal do Rio Grande do SulFaculdade de OdontologiaPrograma de Pós-Graduação em Odontologia / Clínica odontológica / PediatriaPorto Alegre, BR-RS2018mestradoinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGSinstname:Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)instacron:UFRGSTEXT001089629.pdf.txt001089629.pdf.txtExtracted Texttext/plain62132http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/202374/2/001089629.pdf.txtf274cb45ef0a12455f4076dae790c52cMD52ORIGINAL001089629.pdfTexto completoapplication/pdf1168065http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/202374/1/001089629.pdfc9bfe9bd3434949838d0eea498e25004MD5110183/2023742022-09-17 05:09:36.429717oai:www.lume.ufrgs.br:10183/202374Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttps://lume.ufrgs.br/handle/10183/2PUBhttps://lume.ufrgs.br/oai/requestlume@ufrgs.br||lume@ufrgs.bropendoar:18532022-09-17T08:09:36Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS - Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)false
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