Alterações na expressão de enzimas reguladoras da metilação de RNA em placentônios de conceptos bovinos clonados

• Ano de defesa: 2025
• Autor(a) principal: Silva, Giovanni Copello e
• Orientador(a): Bertolini, Marcelo
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Palavras-chave em Português: Expressão gênica; Metilação; Epigenética; Placentoma; Concepto; Clonagem; Bovinos
• Palavras-chave em Inglês: Embryonic and fetal development; Epigenetics; Cloning; Cattle; DOHaD
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/10183/303657

A clonagem por transferência nuclear de célula somática (TNCS) está associada a anormalidades no desenvolvimento fetal e placentário, possivelmente decorrentes de falhas na regulação epigenética. Este estudo investigou o padrão de expressão de genes reguladores da metilação (NSUN2, TRDMT1, METTL3, METTL14) e remoção da metilação (FTO, ALKBH5) de RNA em placentônios bovinos de conceptos clonados aos 225 dias de gestação. Amostras de placentônios dos tipos A, B e C, provenientes de animais produzidos in vivo por superovulação e transferência de embriões (Grupo Controle) e in vitro por clonagem via TNCS (Grupo Clone), foram analisadas por RT-qPCR para quantificar a expressão dessas enzimas. Observou-se maior expressão de METTL3, METTL14, TRDMT1 e FTO nos clones, indicando provável desequilíbrio na regulação epigenética em nível de metilação de RNA. Essas alterações sugerem afetar processos como estabilidade, tradução, comportamento de tRNAs e degradação de mRNAs, impactando diretamente a homeostase de genes envolvidos no metabolismo de carboidratos e lipídios. A remoção da metilação de m6A mediada por FTO também está associada à regulação da sensibilidade à insulina e ao transporte de glicose e lipídios. Fetos clonados apresentaram concentrações elevadas de glicose e frutose no plasma e nos fluidos fetais, crescimento excessivo, hiperlipidemia e indícios de esteatose hepática. Nos placentônios do tipo C foram observadas as maiores expressões das enzimas avaliadas, além de correlação com maior expressão de enzimas lipogênicas, indicando padrões metabólicos distintos em relação aos tipos A e B. Em conjunto, os resultados indicam que alterações epigenéticas na metilação de RNA podem modular o ambiente metabólico intrauterino em conceptos clonados, favorecendo o crescimento fetal e comprometendo a homeostase placentária. Esses achados sugerem que a clonagem pode induzir mudanças nos padrões epigenéticos associadas a desequilíbrios metabólicos que podem afetar a viabilidade e a saúde dos conceptos. Estudos futuros devem investigar a dinâmica dessas modificações ao longo da gestação e buscar estratégias para avaliar os efeitos adversos da manipulação embrionária in vitro, visando aumentar a eficiência das biotecnologias reprodutivas e promover o bem-estar animal.