Desenvolvimento de iniciadores específicos para identificação de espécies de Macrophomina e diversidade de espécies associadas ao feijão-caupi no Nordeste brasileiro

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2021
Autor(a) principal: SANTOS, Kledson Mendes dos lattes
Orientador(a): MICHEREFF, Sami Jorge
Banca de defesa: LARANJEIRA, Delson, ISHIKAWA, Francine Hiromi, BESERRA JÚNIOR, José Evando Aguiar, TOVAR PEDRAZA, Juan Manoel
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Federal Rural de Pernambuco
Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Fitopatologia
Departamento: Departamento de Agronomia
País: Brasil
Palavras-chave em Português:
Área do conhecimento CNPq:
Link de acesso: http://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede2/handle/tede2/9407
Resumo: Macrophomina is a fungal genus belonging to the Botryosphaeriaceae family until recently considered monotypic, represented by M. phaseolina. However, after phylogenetic studies based on DNA sequences, three new species have been described: M. euphorbiicola, M. pseudophaseolina and M. vaccinii. To identify Macrophomina species on a large scale and at low cost is necessary to develop specific primers. Charcoal rot, caused by Macrophomina, is considered one of the main diseases of cowpea [Vigna unguiculata (L.) Walp.] in Northeast Brazil, mainly in semiarid regions. For many years, only M. phaseolina has been associated with this disease in Brazil and worldwide. In this context, this thesis aimed to: (i) develop specific primers and evaluate their effectiveness in identifying Macrophomina species; (ii) identify the Macrophomina species associated with the charcoal rot of cowpea in Northeastern Brazil with specific primers; (iii) characterize the prevalence of Macrophomina species associated with cowpea in Northeastern Brazil; (iv) to analyze the pathogenicity and the aggressiveness of isolates representative of the species. The specific primers MpTefF / MpTefR, MsTefF / MsTefR, MeTefF / MeTefR developed from the TEF-1α region exhibited high specificity in amplifying only the target isolates of M. phaseolina, M. pseudophaseolina and M. euphorbiicola, respectively. With these primers, were identified 263 Macrophomina isolates obtained from cowpea plants sampled in 100 growing-fields of five states in the Northeast of Brazil. Three species of Macrophomina were identified, two isolates of M. euphorbiicola (0.8%), 205 of M. phaseolina (77.1%) and 56 of M. pseudophaseolina (21.3%). Isolates of M. phaseolina and M. pseudophaseolina were found in all sampled states, with the first species registered in 92% of the fields and the second species in 41% of the fields, while M. euphorbiicola was detected in only 2% of the fields. All isolates representing the three Macrophomina species were pathogenic to cowpea, but there was a difference in aggressiveness between species. Macrophomina phaseolina and M. pseudophaseolina were the most aggressive. This is the first report of natural infection of cowpea by M. pseudophaseolina in Brazil and by M. euphorbiicola in the world.
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To identify Macrophomina species on a large scale and at low cost is necessary to develop specific primers. Charcoal rot, caused by Macrophomina, is considered one of the main diseases of cowpea [Vigna unguiculata (L.) Walp.] in Northeast Brazil, mainly in semiarid regions. For many years, only M. phaseolina has been associated with this disease in Brazil and worldwide. In this context, this thesis aimed to: (i) develop specific primers and evaluate their effectiveness in identifying Macrophomina species; (ii) identify the Macrophomina species associated with the charcoal rot of cowpea in Northeastern Brazil with specific primers; (iii) characterize the prevalence of Macrophomina species associated with cowpea in Northeastern Brazil; (iv) to analyze the pathogenicity and the aggressiveness of isolates representative of the species. The specific primers MpTefF / MpTefR, MsTefF / MsTefR, MeTefF / MeTefR developed from the TEF-1α region exhibited high specificity in amplifying only the target isolates of M. phaseolina, M. pseudophaseolina and M. euphorbiicola, respectively. With these primers, were identified 263 Macrophomina isolates obtained from cowpea plants sampled in 100 growing-fields of five states in the Northeast of Brazil. Three species of Macrophomina were identified, two isolates of M. euphorbiicola (0.8%), 205 of M. phaseolina (77.1%) and 56 of M. pseudophaseolina (21.3%). Isolates of M. phaseolina and M. pseudophaseolina were found in all sampled states, with the first species registered in 92% of the fields and the second species in 41% of the fields, while M. euphorbiicola was detected in only 2% of the fields. All isolates representing the three Macrophomina species were pathogenic to cowpea, but there was a difference in aggressiveness between species. Macrophomina phaseolina and M. pseudophaseolina were the most aggressive. This is the first report of natural infection of cowpea by M. pseudophaseolina in Brazil and by M. euphorbiicola in the world.Macrophomina é um gênero fúngico pertencente à família Botryosphaeriaceae até recentemente considerado monotípico, representado por M. phaseolina. No entanto, após estudos filogenéticos baseados em sequências de DNA, foram descritas três novas espécies: M. euphorbiicola, M. pseudophaseolina e M. vaccinii. Para identificação das espécies de Macrophomina em larga escala e a baixo custo, há necessidade do desenvolvimento de iniciadores específicos. A podridão cinzenta do caule, causada por Macrophomina, é considerada uma das principais doenças do feijão-caupi [Vigna unguiculata (L.) Walp.] no Nordeste brasileiro, principalmente em regiões semiáridas. Por muitos anos, apenas M. phaseolina foi associada à essa doença no Brasil e em nível mundial. Nesse contexto, essa tese teve como objetivos: (i) desenvolver iniciadores específicos e avaliar a eficácia dos mesmos para identificação das espécies de Macrophomina; (ii) identificar com iniciadores específicos as espécies de Macrophomina associadas com a podridão cinzenta do feijão-caupi no Nordeste brasileiro; (iii) caracterizar a prevalência das espécies de Macrophomina associadas ao feijão-caupi no Nordeste brasileiro; (iv) analisar a patogenicidade e a agressividade de isolados representativos das espécies. Os iniciadores específicos MpTefF / MpTefR, MsTefF / MsTefR, MeTefF / MeTefR desenvolvidos a partir da região TEF-1α exibiram alta especificidade na amplificação apenas dos isolados-alvo de M. phaseolina, M. pseudophaseolina e M. euphorbiicola, respectivamente. Com esses iniciadores foram identificados 263 isolados de Macrophomina obtidos de plantas de feijão-caupi coletadas em 100 áreas de plantio de cinco estados do Nordeste brasileiro. Foram identificadas três espécies de Macrophomina, sendo dois isolados de M. euphorbiicola (0,8%), 205 de M. phaseolina (77,1%) e 56 de M. pseudophaseolina (21,3%). Isolados de M. phaseolina e M. pseudophaseolina foram constatados em todos os estados amostrados, sendo a primeira espécie registrada em 92% das áreas de produção e a segunda espécie em 41% das áreas de produção, enquanto M. euphorbiicola foi detectada em apenas 2% das áreas de produção. Todos os isolados representantes das três espécies de Macrophomina foram patogênicos ao feijão-caupi, mas houve diferença na agressividade entre as espécies. Macrophomina phaseolina e M. pseudophaseolina foram as mais agressivas. Este é o primeiro relato de infecção natural do feijão-caupi por M. pseudophaseolina no Brasil e por M. euphorbiicola no mundo.Submitted by (ana.araujo@ufrpe.br) on 2023-10-18T16:36:09Z No. of bitstreams: 1 Kledson Mendes dos Santos.pdf: 1608432 bytes, checksum: bc099d7e3d365a79d123010e8151fb60 (MD5)Made available in DSpace on 2023-10-18T16:36:09Z (GMT). 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