Pesquisa de Staphylococcus aureus enterotoxigênicos formadores de biofilmes isolados de bovinos com mastite em rebanhos leiteiros e perfil de resistência frente a desinfetantes

• Ano de defesa: 2019
• Autor(a) principal: SOARES, Karla Danielle Almeida
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal Rural de Pernambuco; Departamento de Morfologia e Fisiologia Animal; Brasil; UFRPE; Programa de Pós-Graduação em Biociência Animal
• Palavras-chave em Português: Staphylococcus aureus; Bovino de leite; Mastite; Desinfetante; CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIA
• Link de acesso: http://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede2/handle/tede2/8189

A produção leiteira no Brasil se destaca por ser uma das atividades mais importantes para pecuária brasileira, sendo responsável pela fonte de renda de milhões de brasileiros. Entretanto, essa atividade é constantemente influenciada pela ocorrência da mastite, principalmente na forma subclínica, que ocorre nos rebanhos. Staphylococcus spp constitui o principal gênero de bactérias causadoras de mastite em bovinos. Objetivou-se com este estudo pesquisar Staphylococcus aureus enterotoxigênicos formadores de biofilmes isolados de bovinos com mastite em rebanhos leiteiros e traçar o perfil de resistência frente à desinfetantes. Foram selecionadas 10 fazendas vinculadas à uma Usina de beneficiamento de leite sob registro federal. Foi realizado o exame físico da glândula mamária e do leite dos animais e, em seguida, realizado o California Mastitis Test. Foram coletadas amostras de 960 animais para o exame microbiológico após antissepsia do óstio dos tetos com álcool 70°GL. No laboratório, alíquotas de 10 μL de leite foram semeadas em ágar sangue ovino a 5% e, em seguida, as placas incubadas a 37°C por 48 horas. Posteriormente, 213 isolados Staphylococcus spp. classificados como fortes e moderados produtores de biofilmes foram selecionados para caracterização quanto ao perfil fenotípico e presença do gene femA para identificação de S. aureus. Destes, foram confirmados 152 isolados, que foram submetidos a detecção de genes capazes de produzir biofilmes (icaA, icaD e Bap), genes que codificam as enterotoxinas (SeA, SeB, SeC, SeD, SeE), e genes relacionados a resistência (Tet(k), Vana). Testou-se a ação de desinfetantes (clorexidine e ácido láctico) utilizados na rotina de ordenha sobre o biofilme em formação e consolidado em 86 destas amostras. Em 84,16% (134/152) das amostras foram constatados o gene BAP, em 78,29% (119/152) o gene IcaD e, em apenas 1,32% (2/152) o gene IcaA. Apenas as enterotoxinas Sec em 17,76% (27/152) das amostras e See em 0,66% (1/152). Foram encontrados genes de resistência TetK em 48,68% (74/152) das amostras. Observou-se resultado satisfatório dos dois desinfetantes testados sobre o biofilme em formação, em 94,2% (81/86) dos isolados submetidos ao clorexidine e 100% dos submetidos ao ácido láctico. Entretanto, para o biofilme consolidado o percentual de ação foi bem inferior, o ácido láctico apresentou baixa eficácia sobre o biofilme já formado, com apenas 3,5% da taxa de redução, enquanto a clorexidine conseguiu reduzir 43% do biofilme consolidado. O efeito dos desinfetantes na redução da adesão de biofilmes foi bastante significativo. Sugere-se a investigação de produtos mais eficazes, que atuem tanto nas células bacterianas livres, como nos microrganismos na forma de biofilmes.