<b>Desenvolvimento de vacinas contra Streptococcus pneumoniae utilizando componentes bacterianos como adjuvantes para o antígeno PspA.</b>

• Ano de defesa: 2025
• Autor(a) principal: Carneiro, Giovanna de Brito
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertacoes da USP; Universidade de São Paulo; Biotecnologia
• Palavras-chave em Português: Vetor vacinal; Vacinas experimentais; Toxina adenilato ciclase; PspA; <em>Streptococcus pneumoniae</em>; Experimental vacines; Adenylate cyclase toxin; Vaccine vector
• Link de acesso: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-30042026-115154/

<em>Streptococcus pneumoniae</em> (pneumococo) é um patógeno de grande impacto na saúde pública, causando doenças graves como pneumonia, sepse e meningite. É também uma causa líder de mortes entre crianças menores de cinco anos. As vacinas disponíveis no mercado são baseadas nos polissacarídeos capsulares e apresentam cobertura limitada aos sorotipos contidos nas formulações. A Proteína A da Superfície do Pneumococo (PspA) é uma candidata promissora para a composição de vacinas sorotipo-independentes. Por outro lado, um desafio para formulações vacinais baseadas em PspA é a sua variabilidade antigênica, que determina a sua classificação em 6 clados, agrupados em famílias: clados 1 e 2 pertencem à família 1; clados 2, 3 e 4 compõem a família 2; e o clado 6, raramente isolado, pertence à família 3. Dada a existência de reatividade cruzada de anticorpos entre variantes da proteína dentro da mesma família, propusemos o desenvolvimento de uma vacina de ampla cobertura pela combinação de fragmentos de variantes de PspAs. Para isso, um vetor vacinal baseado na toxina adenilato ciclase de <em>Bordetella pertussis</em> (CyaA) foi utilizado para a apresentação dos fragmentos para o sistema imune. As construções CyaA-PspA resultantes foram avaliadas como candidatas vacinais através de experimentos de imunização de camundongos. Primeiramente, foram avaliadas proteínas CyaA carreando fragmentos de PspA2 (A2) ou de PspA4 (A4) em uma mistura (CyaA-A2 + CyaA-A4) ou um antígeno único contendo ambos os fragmentos em fusão (CyaA-A2-A4). As duas formulações induziram altos níveis de anticorpos anti-PspA e conferiram proteção aos animais em modelos de infecção invasiva e pneumonia com pneumococos expressando PspAs homólogas (clado 2 e 4) ou heteróloga (clado 5). Com o intuito de ampliar a cobertura de isolados, novos antígenos foram produzidos para a inclusão de fragmentos de PspA1 (A1) e PspA3 (A3). Entre as novas construções, os melhores resultados foram obtidos com o antígeno contendo os quatro fragmentos de PspA combinados na mesma molécula CyaA (CyaA-A2-A4/A1-A3). A imunização subcutânea com três doses desta proteína, na ausência de adjuvantes, induziu níveis robustos de anticorpos, que apresentaram alta reatividade com isolados de pneumococo de sorotipos diversos, expressando os cinco clados de PspA predominantes. A formulação conferiu alta proteção em modelos de doença invasiva e pneumonia com pneumococos expressando PspAs dos clados 1, 3 e 5. A proteção foi associada à resposta imune balanceada entre os perfis Th1 e Th2, indução de altos níveis de IgG1 e IgG2a anti-PspA, deposição de complemento na superfície bacteriana mediada por anticorpos e resposta inflamatória controlada. Ainda, uma única dose da proteína CyaA-A2 A4/A1-A3 combinada a adjuvantes Alum, Addavax ou AddaS03 foi suficiente para conferir completa proteção aos animais contra doença invasiva. Portanto, foi obtida uma formulação CyaA-PspA com potencial de ampla cobertura de isolados e proteção eficaz contra doença invasiva e pneumonia pneumocócica, que pode ser proposta como candidata para uma vacina alternativa contra pneumococo.