O sistema Pil-Chp de Xanthomonas citri

• Ano de defesa: 2025
• Autor(a) principal: Araujo, Pedro Bonato
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Pil-Chp; Pilus tipo IV; Sistemas de dois componentes; Two-components systems; Type IV pilus; Xanthomonas citri
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-24022026-163119/

Xanthomonas citri subsp. citri (XAC) é a bactéria causadora do cancro cítrico, uma doença que afeta a produção de citros no mundo inteiro. A motilidade bacteriana e a adaptação ao hospedeiro são processos fundamentais para a virulência de XAC, e estruturas como o pilus do tipo IV (T4P) desempenham papel central nessas funções. O T4P é uma estrutura dinâmica capaz de se estender e retrair, promovendo a motilidade do tipo twitching, adesão a superfícies, formação de biofilme e também atuando como receptor de bacteriófagos. A regulação do T4P é coordenada por vias complexas, incluindo o sistema de sinalização Pil-Chp, cuja função ainda não foi elucidada em XAC. Este trabalho teve como objetivo investigar o papel dos genes chpA e pilJ, que codificam componentes do sistema Pil-Chp, na regulação do T4P em XAC. Através de linhagens mutantes, os fenótipos associados ao T4P foram avaliados por diferentes abordagens. Ensaios de motilidade do tipo twitching, infecção por bacteriófagos e degradação de carboximetilcelulose (CMC) foram utilizados para caracterizar o papel funcional destes genes. Os resultados demonstraram que a deleção de chpA afeta todos os fenótipos associados ao T4P, incluindo a motilidade por twitching e a suscetibilidade à infecção pelo fago ΦXacm4-11, sugerindo que ChpA é essencial para o funcionamento do pilus. Por outro lado, a deleção de pilJ afetou apenas o twitching, sem interferir na infecção pelo fago. Essa diferença funcional sugere que ChpA pode ser ativada por outras proteínas sensoras além de PilJ, em resposta a diferentes estímulos. Análises in silico das proteínas ChpA e PilJ, com base em predição estrutural por AlphaFold e identificação de domínios funcionais, apoiaram a presença de múltiplos domínios de fosfotransferência em ChpA e regiões conservadas de sinalização em PilJ. Adicionalmente, os mutantes não apresentaram alterações na produção de endoglucanases, indicando que a via Pil-Chp não influencia diretamente a regulação do fator de transcrição Clp, ligado à percepção de quórum e à produção dessas enzimas. Os achados deste trabalho contribuem para o entendimento da sinalização associada ao T4P em XAC e levantam novas hipóteses sobre a especificidade da via Pil-Chp nesta espécie.