Estudos eletroquímicos e desenvolvimento de metodologia para a determinação eletroanalítica de flavonóides

• Ano de defesa: 2005
• Autor(a) principal: Malagutti, Andréa Renata
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: chemically modified electrodes; eletrodos quimicamente modificados; flavonóides; flavonoids; square wave voltammetry; ultramicroelectrodes; ultramicroeletrodos; voltametria de onda quadrada
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75132/tde-07082025-151836/

Neste trabalho, são apresentados os resultados dos estudos sobre a reação de oxidação dos flavonoides: rutina (3\',4\',5,7-pentahidroxiflavona-3-β-D-rutinosida), quercetina (3,3\',4\',5,7-pentahidroxiflavona), morina (2\',3,4\',5,7-pentahidroxiflavona) e fisetina (3,3\',4\',7-tetraidroxiflavona), utilizando a voltametria cíclica (CV), bem como o desenvolvimento de metodologias analíticas para a determinação desses flavonoides por voltametria de onda quadrada (SWV). Os estudos foram realizados com soluções de rutina e quercetina utilizando eletrodos de 60% grafite/poliuretana (GPU), de carbono vítreo (GC) e um ultramicroeletrodo (UME) de fibra de carbono. Para os flavonoides morina e fisetina, os estudos foram conduzidos com o eletrodo de GPU e o UME de fibra de carbono. As análises foram realizadas em tampão Britton-Robinson (0,1 mol L-1), com variação de pH de 2,0 a 8,0, ajustado por adição de solução de NaOH (1,0 mol L-1). Avaliaram-se os efeitos da variação de pH do eletrólito na resposta voltamétrica das soluções de rutina e quercetina (com eletrodos GPU, GC e UME) e de morina e fisetina (com eletrodos GPU e UME). Também foram analisados os perfis voltamétricos dos flavonoides em função da velocidade de varredura. Após a otimização dos parâmetros da SWV, como frequência (f) e amplitude de pulso (Ep), foram desenvolvidas metodologias eletroanalíticas, com determinação dos limites de detecção (LD) e quantificação (LQ) para os flavonoides rutina e quercetina (utilizando GPU, GC e UME) e para morina e fisetina (com GPU e UME). Os resultados indicaram que a rutina apresenta um par de picos bem definido, característico de um sistema quase-reversível e controlado por adsorção. Os limites de detecção e quantificação com o eletrodo GPU foram: LD = 7,10 × 10-9 mol L-1 (4,33 ppb) e LQ = 2,37 × 10-8 mol L-1 (14,44 ppb); com GC: LD = 1,72 × 10-8 mol L-1 (10,52 ppb) e LQ = 5,75 × 10-8 mol L-1 (35,08 ppb); com UME: LD = 9,49 × 10-8 mol L-1 (58 ppb) e LQ = 3,16 × 10-7 mol L-1 (193 ppb). Para a quercetina, os eletrodos GPU e GC indicaram um comportamento voltamétrico de sistema quase-reversível até 800 mV, tornando-se irreversível com inversão a 1100 mV. Com o UME, observou-se uma etapa de oxidação quase-reversível. Os limites com GPU foram: LD = 5,79 × 10-9 mol L-1 (1,96 ppb) e LQ = 1,93 × 10-8 mol L-1 (6,53 ppb); com GC: LD = 8,52 × 10-9 mol L-1 (2,88 ppb) e LQ = 2,84 × 10-8 mol L-1 (9,61 ppb); com UME: LD = 3,52 × 10-7 mol L-1 (119,3 ppb) e LQ = 1,18 × 10-6 mol L-1 (399,2 ppb). As metodologias eletroanalíticas para rutina e quercetina foram aplicadas à determinação desses compostos em amostras da formulação farmacêutica Novarrutina e do fitoterápico Ginkgo Biloba (Ginkgo Catarinense®), respectivamente. As análises, realizadas com SWV e procedimento de deconvolução, apresentaram os seguintes resultados para a Novarrutina: Eletrodo GPU: recuperação média de 121% (n=4), R.S.D. = 4,92% Eletrodo GC: 117,4% (n=4), R.S.D. = 0,57% UME: 109,1% (n=4), R.S.D. = 1,17% Para a quercetina na amostra de Ginkgo Biloba, após deconvolução: GPU: 0,058 µmol L-1 ou 19,51 µg L-1 GC: 0,083 µmol L-1 ou 28,06 µg L-1 A recuperação aparente da amostra fortificada com 20 mg de quercetina foi: GPU: 72,15% (n=4), R.S.D. = 1,63% GC: 66,24% (n=4), R.S.D. = 1,74% Os voltamogramas cíclicos para a morina com o eletrodo GPU indicaram oxidação irreversível, com características mistas de controle difusional e adsortivo. A SWV, a 20 Hz, mostrou perfil totalmente irreversível; a 50 Hz, quase-reversível. Os limites com GPU foram: LD = 6,87 × 10-8 mol L-1 (20,8 ppb) e LQ = 2,29 × 10-7 mol L-1 (69,0 ppb). Com o UME, a morina apresentou processo irreversível e controlado por difusão (VC), mas quase-reversível em SWV. Os limites foram: LD = 1,14 × 10-7 mol L-1(34,5 ppb) e LQ = 3,80 × 10-7 mol L-1 (114,8 ppb). Os voltamogramas cíclicos para a fisetina, com GPU, indicaram processo quase-reversível e controlado por adsorção. Na metodologia com SWV, os limites foram: LD = 2,19 × 10-8 mol L-1 (6,27 ppb) e LQ = 7,29 × 10-8 mol L-1 (20,86 ppb). Com o UME, o processo foi também quase-reversível, com controle por adsorção e difusão. Os limites foram: LD = 3,89 × 10-9 mol L-1 (1,11 ppb) e LQ = 1,30 × 10-8 mol L-1 (3,71 ppb). As metodologias por espectroscopia de absorção no UV-vis para rutina e quercetina, baseadas nas bandas em 355 nm e 365 nm, respectivamente, permitiram calcular os seguintes valores de absortividade molar (ε): Rutina ε = 1,8 × 10-4 cm-1 mol L-1 Quercetina ε = 2,1 × 10-4 cm-1 mol L-1 Essas metodologias foram aplicadas na determinação desses flavonoides nas mesmas amostras anteriores. Os resultados das análises de recuperação aparente foram: Novarrutina (rutina): 120,7% (n=4), R.S.D. = 1,16% Ginkgo Biloba fortificado com 20 mg de quercetina: 77,61% (n=4), R.S.D. = 0,84%