Potencial de utilização de leucócitos in vitro de Astyanax lacustris como método de avaliação da eficiência de suspensões vacinais de Aeromonas hydrophila

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2024
Autor(a) principal: Rocha, Nathalia Raissa de Alcântara
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Aquaculture
Aquicultura
Bacteria
Bactérias
Immunology
Imunologia
Piscicultura
Pisciculture
Vaccine
Vacina
Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/74/74131/tde-23042025-141909/
Resumo: A demanda de proteína piscícola está diretamente ligada a necessidade da expansão aquícola. Sistemas de criação, principalmente com altas densidades, como os sistemas intensivos de criação, proporcionam condições de maior susceptibilidade dos animais a agentes infecciosos, devido ao estresse. As enfermidades bacterianas são constante motivo de preocupação aos piscicultores, inviabilizando muitas vezes a comercialização da carne; assim, a vacinação contra agentes bacterianos de peixes é uma medida profilática essencial na piscicultura, minimizando a utilização de antibióticos. Em paralelo, nos últimos anos, o desenvolvimento e utilização de vacinas têm acompanhado o aumento da frequência de estudo sobre respostas imunológicas dos peixes, destacando-se aqueles que desenvolvem técnicas de cultivo celular in vitro. Por sua vez, a espécie Astyanax lacustris, além de apresentar alto potencial zootécnico, é um modelo adequado para estudos de experimentação laboratorial, devido ao fácil manejo e adaptabilidade. O objetivo deste estudo foi analisar o potencial da utilização de respostas leucocitárias in vitro como método de avaliação da eficiência de suspensões vacinais de Aeromonas hydrophila. Para tanto, leucócitos foram isolados através de gradientes de Percoll e incubados com diferentes suspensões vacinais bacterianas, sendo então testada a viabilidade celular após 24h. Os ensaios de fagocitose com leveduras (Saccharomyces cerevisae) foram realizados após 6h de incubação com as suspensões vacinais, observando-se os melhores valores dos parâmetros Capacidade Fagocítica e Índice Fagocítico para tratamentos contendo formulações vacinais inativadas por NaOH. Os resultados obtidos para produção de EROs foram próximos ao grupo controle, demonstrando que as suspensões vacinais não diminuíram a capacidade dos leucócitos em produzir EROs e, consequentemente, não afetando a fagocitose. Em suma, os resultados obtidos no presente trabalho subsidiam nova abordagem para testes eficazes de vacinas, principalmente como método de avaliação da ativação de fagócitos por suspensões sacinais de Aeromonas hydrophila.
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Em paralelo, nos últimos anos, o desenvolvimento e utilização de vacinas têm acompanhado o aumento da frequência de estudo sobre respostas imunológicas dos peixes, destacando-se aqueles que desenvolvem técnicas de cultivo celular in vitro. Por sua vez, a espécie Astyanax lacustris, além de apresentar alto potencial zootécnico, é um modelo adequado para estudos de experimentação laboratorial, devido ao fácil manejo e adaptabilidade. O objetivo deste estudo foi analisar o potencial da utilização de respostas leucocitárias in vitro como método de avaliação da eficiência de suspensões vacinais de Aeromonas hydrophila. Para tanto, leucócitos foram isolados através de gradientes de Percoll e incubados com diferentes suspensões vacinais bacterianas, sendo então testada a viabilidade celular após 24h. Os ensaios de fagocitose com leveduras (Saccharomyces cerevisae) foram realizados após 6h de incubação com as suspensões vacinais, observando-se os melhores valores dos parâmetros Capacidade Fagocítica e Índice Fagocítico para tratamentos contendo formulações vacinais inativadas por NaOH. Os resultados obtidos para produção de EROs foram próximos ao grupo controle, demonstrando que as suspensões vacinais não diminuíram a capacidade dos leucócitos em produzir EROs e, consequentemente, não afetando a fagocitose. Em suma, os resultados obtidos no presente trabalho subsidiam nova abordagem para testes eficazes de vacinas, principalmente como método de avaliação da ativação de fagócitos por suspensões sacinais de Aeromonas hydrophila.The demand for fish protein is directly linked to the need for aquaculture expansion. Farming systems, especially those with high densities, such as intensive farming systems, create conditions that increase the animals\' susceptibility to infectious agents due to stress. Bacterial diseases are a constant concern for fish farmers, often making meat commercialization unfeasible. Thus, vaccination against bacterial agents in fish is an essential prophylactic measure in aquaculture, reducing the need for antibiotics. In parallel, in recent years, the development and use of vaccines have followed the increasing frequency of studies on fish immune responses, with particular emphasis on those involving in vitro cell culture techniques. Additionally, the species Astyanax lacustris, besides having high zootechnical potential, is a suitable model for laboratory experimentation due to its easy handling and adaptability. The objective of this study was to analyze the potential use of in vitro leukocyte responses as a method to evaluate the efficiency of Aeromonas hydrophila vaccine suspensions. For this purpose, leukocytes were isolated using Percoll gradients and incubated with different bacterial vaccine suspensions, and cell viability was tested after 24 hours. Phagocytosis assays with yeast (Saccharomyces cerevisiae) were performed after 6 hours of incubation with the vaccine suspensions, showing the best values for the Phagocytic Capacity and Phagocytic Index parameters in treatments containing vaccine formulations inactivated with NaOH. The results obtained for ROS production were similar to the control group, demonstrating that the vaccine suspensions did not reduce the leukocytes\' ability to produce ROS and, consequently, did not affect phagocytosis. In summary, the results of this study support a novel approach for effective vaccine testing, particularly as a method to evaluate phagocyte activation by Aeromonas hydrophila vaccine suspensions.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPSousa, Ricardo Luiz Moro deRocha, Nathalia Raissa de Alcântara2024-12-12info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/74/74131/tde-23042025-141909/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2025-04-23T18:38:06Zoai:teses.usp.br:tde-23042025-141909Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212025-04-23T18:38:06Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
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