Eficácia de dentifrícios experimentais à base de óleos essenciais sobre biofilme de próteses totais - estudo in vitro
| Ano de defesa: | 2023 |
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Resumo: | O objetivo desse estudo in vitro foi avaliar a ação antimicrobiana de dentifrícios experimentais para próteses totais à base de óleos essenciais de Bowdichia virgilioides Kunth (BvK - Sucupira), Copaifera officinalis (Co - Copaíba), Eucalyptus citriodora (Ec - Eucalipto), Melaleuca alternifolia (Ma - Melaleuca) e Pinus strobus (Ps - Pinheiro Branco) a 1% sobre biofilmes multiespécies. Corpos de prova de resinas acrílicas (13x5mm) ativadas por banho de água quente (BAQ), energia de micro-ondas (MIC) e radiação ultravioleta (impressão 3D) foram esterilizados e distribuídos em placas de 24 poços. Meio de cultura contendo Candida albicans, Candida glabrata (Cb) (106 UFC/mL), Streptococcus mutans (Sm), Staphylococcus aureus (Sa) (107 UFC/mL) foi adicionado aos poços e o conjunto foi incubado sob agitação por 72 horas, para a formação do biofilme. Em seguida, os corpos de prova foram escovados manualmente, em câmara de fluxo laminar, por 20 segundos com água destilada (CN: controle negativo); dentifrício Trihydral (CP: controle positivo); dentifrício placebo (Pl); dentifrício sucupira (BvK); dentifrício copaíba (Co); dentifrício eucalipto (Ec); dentifrício melaleuca (Ma) e dentifrício pinheiro branco (Ps). As variáveis de resposta foram redução da carga microbiana (contagem de Unidades Formadoras de Colônias - UFC/mL, Log10, n=9 por resina), atividade metabólica do biofilme (ensaio de XTT, n=9 por resina) e viabilidade celular (microscopia de fluorescência - VC, n=2 por resina). Para os dados de UFC e XTT foi empregado o Wald test em modelo linear generalizado seguido de teste de Bonferroni. Para análise dos dados da microscopia de VC foi empregado o Teste GEE (Equações de Estimação Generalizadas) (=0.05). A carga microbiana de Streptococcus mutans foi influenciada pelos fatores Grupo (p<0,001) e Resina (p<0,001), sem interação entre eles (p=0,085). A carga microbiana de S. aureus foi influenciada pela interação entre Grupo x Resina (p=0,043), porém não houve diferença significante entre as resinas para cada grupo. A carga microbiana de Candida albicans foi influenciada pelos fatores Grupo (p<0,001) e Resina (p<0,001). Não houve interação entre Grupo x Resina (p=0,435). Os fatores Grupo (p<0,001) e Resina (p<0,001) influenciaram de forma significativa a carga microbiana da C. glabrata e não houve interação entre os fatores (p=0,088). A atividade metabólica foi influenciada pelos fatores Grupo (p<0,001) e Resina (p=0,003), não havendo interação entre eles (p=0,906). A análise dos dados indicou interação entre os fatores resina X grupo e biofilme total/células vivas (p<0,001). Concluiu-se todos os dentifrícios reduziram a carga microbiana quando comparados ao grupo não escovado. Considerando o controle positivo, os dentifrícios experimentais contendo Bowdichia virgilioides Kunth, Eucalyptus citriodora, Melaleuca alternifolia e Pinus strobus foram os mais promissores na redução da carga microbiana, especialmente para C. albicans. Todos os grupos reduziram a atividade metabólica do biofilme, e entre os dentifrícios experimentais, o dentifrício contendo Eucalyptus citriodora foi o mais eficiente para esta variável. Todos os grupos promoveram redução de biofilme total e os dentifrícios com óleos essenciais de Bowdichia virgilioides Kunth, Melaleuca alternifolia e Pinus strobus apresentaram redução similar ao dentifrício Trihydral (controle positivo). Todos os grupos reduziram a porcentagem de células vivas. A resina BAQ apresentou melhores resultados, seguida de MIC. |
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Eficácia de dentifrícios experimentais à base de óleos essenciais sobre biofilme de próteses totais - estudo in vitroEfficacy of experimental dentifrices based on essential oils on complete denture biofilm - in vitro studyBiofilmBiofilmesComplete denturesDentifricesDentifríciosDenture bases resinDenture cleanserEssential oilsHigienizadores de dentaduraÓleos essenciaisPrótese totalResinas para base de próteseO objetivo desse estudo in vitro foi avaliar a ação antimicrobiana de dentifrícios experimentais para próteses totais à base de óleos essenciais de Bowdichia virgilioides Kunth (BvK - Sucupira), Copaifera officinalis (Co - Copaíba), Eucalyptus citriodora (Ec - Eucalipto), Melaleuca alternifolia (Ma - Melaleuca) e Pinus strobus (Ps - Pinheiro Branco) a 1% sobre biofilmes multiespécies. Corpos de prova de resinas acrílicas (13x5mm) ativadas por banho de água quente (BAQ), energia de micro-ondas (MIC) e radiação ultravioleta (impressão 3D) foram esterilizados e distribuídos em placas de 24 poços. Meio de cultura contendo Candida albicans, Candida glabrata (Cb) (106 UFC/mL), Streptococcus mutans (Sm), Staphylococcus aureus (Sa) (107 UFC/mL) foi adicionado aos poços e o conjunto foi incubado sob agitação por 72 horas, para a formação do biofilme. Em seguida, os corpos de prova foram escovados manualmente, em câmara de fluxo laminar, por 20 segundos com água destilada (CN: controle negativo); dentifrício Trihydral (CP: controle positivo); dentifrício placebo (Pl); dentifrício sucupira (BvK); dentifrício copaíba (Co); dentifrício eucalipto (Ec); dentifrício melaleuca (Ma) e dentifrício pinheiro branco (Ps). As variáveis de resposta foram redução da carga microbiana (contagem de Unidades Formadoras de Colônias - UFC/mL, Log10, n=9 por resina), atividade metabólica do biofilme (ensaio de XTT, n=9 por resina) e viabilidade celular (microscopia de fluorescência - VC, n=2 por resina). Para os dados de UFC e XTT foi empregado o Wald test em modelo linear generalizado seguido de teste de Bonferroni. Para análise dos dados da microscopia de VC foi empregado o Teste GEE (Equações de Estimação Generalizadas) (=0.05). A carga microbiana de Streptococcus mutans foi influenciada pelos fatores Grupo (p<0,001) e Resina (p<0,001), sem interação entre eles (p=0,085). A carga microbiana de S. aureus foi influenciada pela interação entre Grupo x Resina (p=0,043), porém não houve diferença significante entre as resinas para cada grupo. A carga microbiana de Candida albicans foi influenciada pelos fatores Grupo (p<0,001) e Resina (p<0,001). Não houve interação entre Grupo x Resina (p=0,435). Os fatores Grupo (p<0,001) e Resina (p<0,001) influenciaram de forma significativa a carga microbiana da C. glabrata e não houve interação entre os fatores (p=0,088). A atividade metabólica foi influenciada pelos fatores Grupo (p<0,001) e Resina (p=0,003), não havendo interação entre eles (p=0,906). A análise dos dados indicou interação entre os fatores resina X grupo e biofilme total/células vivas (p<0,001). Concluiu-se todos os dentifrícios reduziram a carga microbiana quando comparados ao grupo não escovado. Considerando o controle positivo, os dentifrícios experimentais contendo Bowdichia virgilioides Kunth, Eucalyptus citriodora, Melaleuca alternifolia e Pinus strobus foram os mais promissores na redução da carga microbiana, especialmente para C. albicans. Todos os grupos reduziram a atividade metabólica do biofilme, e entre os dentifrícios experimentais, o dentifrício contendo Eucalyptus citriodora foi o mais eficiente para esta variável. Todos os grupos promoveram redução de biofilme total e os dentifrícios com óleos essenciais de Bowdichia virgilioides Kunth, Melaleuca alternifolia e Pinus strobus apresentaram redução similar ao dentifrício Trihydral (controle positivo). Todos os grupos reduziram a porcentagem de células vivas. A resina BAQ apresentou melhores resultados, seguida de MIC.The objective of this in vitro study was to evaluate the antimicrobial action of experimental dentifrices for complete dentures based on essential oils of Bowdichia virgilioides Kunth (BvK), Copaifera officinalis (Co), Eucalyptus citriodora (Ec), Melaleuca alternifolia (Ma) and Pinus strobus (Ps) at 1% on multispecies biofilms. Acrylic resin specimens (13x5mm) activated by a hot water bath (BAQ), microwave energy (MIC) and ultraviolet radiation (3D printing) were sterilized and distributed in 24-well plates. Culture medium containing Candida albicans, Candida glabrata (Cb) (106 CFU/mL), Streptococcus mutans (Sm), Staphylococcus aureus (Sa) (107 CFU/mL) was added to the wells and the set was incubated under shaking for 72 hours, for the formation of biofilm. Then, the specimens were brushed manually, in a laminar flow chamber, for 20 seconds with distilled water (CN: negative control); Trihydral toothpaste (CP: positive control); placebo toothpaste (Pl); sucupira toothpaste (BvK); copaiba toothpaste (Co); eucalyptus toothpaste (Ec); tea tree toothpaste (Ma) and white pine toothpaste (Ps). The response variables were reduction in microbial load (colony forming unit count - CFU/mLLog10, n=9 per resin), biofilm metabolic activity (XTT assay, n=9 per resin) and cell viability (fluorescence microscopy - VC, n=2 per resin. For UFC and XTT data, the Wald test was used in a generalized linear model followed by the Bonferroni test. To analyze CV data, the GEE Test (Generalized Estimation Equations was used (α=0.05). The results showed that, for the CFU count, for Sm, comparing the groups, there was a reduction for Ps in relation to CN (p==0.001) and an increase for all in relation to CP (p<0.001); the 3D resin presented a lower microbial load for Sm than BAQ (p<0.001) and MIC (p<0.001); For Sa, there was similarity to CN (p=1.000) and an increase for all in relation to CP (p<0.001): For Ca, the toothpastes BvK (p=0.004), Ec (p=0.001), Ma (p=0.009 ) and Ps (p=0.016) reduced the microbial load in relation to CN and presented similar results to CP (p=1.000); the 3D resin presented higher values than BAQ (p<0.001) and MIC (p<0.001). For Cg, Ma (p<0.001) and Ps (p<0.001) reduced the microbial load in relation to CN and all dentifrices were similar to CP, except Co (p<0.001). For XTT, there was a reduction for Pl (p=0.015) and Ec (p<0.001) in relation to CN and an increase for all in relation to CP (p<0.001); the BAQ resin presented significantly lower values than the 3D resin (p=0.002) and the MIC resin presented intermediate results. For Epifluorescence Microscopy, all dentifrices promoted a reduction in the total BAQ resin biofilm in a similar way to CP (p=1.000); with MIC and 3D resins, all were similar to CN (p=1.000) and CP (p=1.000). Furthermore, with the BAQ resin there was a reduction in live biofilm with Co (p=0.006), Ec (p<0.001), Ma (p=0.007) and Ps (p<0.001) in relation to CN and a reduction for Ec (p= 0.029) in relation to CP; with MIC resin, all toothpastes promoted a reduction in cellular metabolism in a similar way to CP (p=1.000); with 3D resin, all dentifrices promoted a reduction similar to CN (p=1.000), except Ma, which promoted an increase in metabolism in relation to CP (p=0.042). It was concluded that BvK, Ec, Ma and Ps toothpastes showed a significant reduction in microbial load as well as a decrease in metabolic activity and viability of the mixed biofilm; although, none have managed to eliminate all cells and completely remove dead cells. These dentifrices can be useful in cleaning complete dentures, as they have antimicrobial action against prosthetic biofilm.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPSilva, Cláudia Helena Lovato daSantos, Andrezza Cristina Moura dos2023-12-07info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/58/58131/tde-04112024-180534/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2024-11-21T19:13:02Zoai:teses.usp.br:tde-04112024-180534Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212024-11-21T19:13:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false |
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