Comportamento estrutural de matrizes colagenicas tratadas com dioxano: propriedades fisico-químicas, mecânicas e biológicas
| Ano de defesa: | 1995 |
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| Instituição de defesa: |
Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
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| Programa de Pós-Graduação: |
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| Palavras-chave em Português: | |
| Link de acesso: | https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75132/tde-15072025-145703/ |
Resumo: | Tecidos naturais tem sido muito utilizados como biomateriais na constitutição de biopróteses, em enxertos e implantes. Para isto são geralmente submetidos a tratamentos químicos de reticulação, que induzem a formação de ligações cruzadas entre grupos funcionais das cadeias protéicas através de reagentes específicos, a fim de aumentar sua biocompatibilidade e alterar suas propriedades em função do uso. O tratamento com glutaraldeído é o mais empregado, porém apresenta efeitos prejudiciais como citotoxidade e liberação contínua após implante. Este trabalho traz um tratamento altemativo para matrizes de colágeno (pericárdio bovino=PB) usando o solvente orgânico dioxano, associa este último a um tratamento de reticulação com glutaraldeído (GA) e a tratamentos alcalino e ácido, usados em extração de colágeno solúvel de outros tecidos (tendão e serosa bovina), e também faz uma avaliação dos efeitos provocados por estes tratamentos nas propriedades e estrutura da matriz nativa. As amostras utilizadas foram PB nativo, PB tratado com dioxano, com ou sem pré-tratamento alcalino e/ou ácido e PB reticulado com glutaraldeído (GA), com ou sem pré-tratamento com dioxano. Estas amostras foram avaliadas em termos: 1) estruturais, por calorimetria exploratória diferencial (DSC), microscopia eletrônica (varredura e transmissão) e óptica (avaliação histológica), 3) de resistência mecânica, por ensaio de tração mecânica e 4) de estabilidade biológica ou biodegradabilidade,por ensaio de colagenase. Os resultados térmicos mostraram um aumento de 10ºC na estabilidade térmica do PB tratado com dioxano em relação ao nativo (~64°C), ao passo que o PB tratado com GA, com ou sem dioxano, atingiu transição térmica ~16ºC superior ao nativo, muito representativa em relação ao tratamento padrão (18 dias de GA) usado em PB para confecção de válvulas cardíacas (~83ºC). Estes resultados refletem alterações da matriz colagênica com preservação da estrutura nativa do tecido e da tripla-hélice do colágeno.As amostras submetidas aos tratamentos alcalino e ácido apresentaram transição térmica em ~56ºC, cerca de 8ºC a menos que o PB nativo, devido a alterações na distribuição de carga das moléculas de colágeno e ao rompimento de ligações cruz.adas naturais do tecido, desorganizando a estrutura nativa da matriz colagênica. Quando submetidas posterior tratamento com dioxano não há aumento na estabilidade térmica. Em relação as avaliações estruturais e morfológicas, pode-se dizer que os tratamentos usando dioxano deixam o tecido mais limpo em relação lipídeos, celulas e substância amorfa, preservam e/ou recuperam a estrutura fibrilar nativa do tecido, mantém a estriação transversal das fibrilas colágenas, fragmentam e alteram a distribuição das fibras elásticas e aumentam a espessura do tecido e os espaços interfibrilares em número e tamanho, tomando-o mais poroso. Os tratamentos com GA levam reticulação do tecido com formação de feixes de fibras colágenas e elásticas. Os tratamentos alcalino e ácido provocam desorganização da estrutura nativa do tecido (principalmente colágena), removem lipídeos, células e outros componentes (inclusive fibras elásticas) e também aumentam muito a espessura e as cavidades do tecido. A análise do comportamento mecânico realizada indica que o dioxano não altera significativamente as propriedades de tensão-elongação da matriz nativa e que o GA aumenta muito estas propriedades quando longos períodos de reticulação são utilizados. Em relação a estabilidade biológica, a matriz tratada com dioxano apresentou-se muito mais resistente a digestão pela colagenase do que a nativa e, quando é posteriomente tratada com GA, sua estabilidadebiológica é tão alta quanto do PB reticulado. De todos os resultados obtidos pode-se concluir que o dioxano tem um alto potencial de aplicação, de forma direta ou como meio de reação, em matrizes colagênicas utilizadas como biomateriais e, considerando as características finais que o PB tratado com dioxano apresentou, em relação ao nativo, pode-se dizer que ele tem prováveis chances de aplicação como material para correção plástica em cirurgias (enxertos de tecidos da derme, hipoderme e da bexiga) e suporte para alteração de drogas, enzimas e até células. |
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Comportamento estrutural de matrizes colagenicas tratadas com dioxano: propriedades fisico-químicas, mecânicas e biológicasStructural behavior of collagen matrices treated with dioxane: physicochemical, mechanical and biological propertiesbovine pericardiumcolágenocollagendioxanedioxanopericardio bovinoTecidos naturais tem sido muito utilizados como biomateriais na constitutição de biopróteses, em enxertos e implantes. Para isto são geralmente submetidos a tratamentos químicos de reticulação, que induzem a formação de ligações cruzadas entre grupos funcionais das cadeias protéicas através de reagentes específicos, a fim de aumentar sua biocompatibilidade e alterar suas propriedades em função do uso. O tratamento com glutaraldeído é o mais empregado, porém apresenta efeitos prejudiciais como citotoxidade e liberação contínua após implante. Este trabalho traz um tratamento altemativo para matrizes de colágeno (pericárdio bovino=PB) usando o solvente orgânico dioxano, associa este último a um tratamento de reticulação com glutaraldeído (GA) e a tratamentos alcalino e ácido, usados em extração de colágeno solúvel de outros tecidos (tendão e serosa bovina), e também faz uma avaliação dos efeitos provocados por estes tratamentos nas propriedades e estrutura da matriz nativa. As amostras utilizadas foram PB nativo, PB tratado com dioxano, com ou sem pré-tratamento alcalino e/ou ácido e PB reticulado com glutaraldeído (GA), com ou sem pré-tratamento com dioxano. Estas amostras foram avaliadas em termos: 1) estruturais, por calorimetria exploratória diferencial (DSC), microscopia eletrônica (varredura e transmissão) e óptica (avaliação histológica), 3) de resistência mecânica, por ensaio de tração mecânica e 4) de estabilidade biológica ou biodegradabilidade,por ensaio de colagenase. Os resultados térmicos mostraram um aumento de 10ºC na estabilidade térmica do PB tratado com dioxano em relação ao nativo (~64°C), ao passo que o PB tratado com GA, com ou sem dioxano, atingiu transição térmica ~16ºC superior ao nativo, muito representativa em relação ao tratamento padrão (18 dias de GA) usado em PB para confecção de válvulas cardíacas (~83ºC). Estes resultados refletem alterações da matriz colagênica com preservação da estrutura nativa do tecido e da tripla-hélice do colágeno.As amostras submetidas aos tratamentos alcalino e ácido apresentaram transição térmica em ~56ºC, cerca de 8ºC a menos que o PB nativo, devido a alterações na distribuição de carga das moléculas de colágeno e ao rompimento de ligações cruz.adas naturais do tecido, desorganizando a estrutura nativa da matriz colagênica. Quando submetidas posterior tratamento com dioxano não há aumento na estabilidade térmica. Em relação as avaliações estruturais e morfológicas, pode-se dizer que os tratamentos usando dioxano deixam o tecido mais limpo em relação lipídeos, celulas e substância amorfa, preservam e/ou recuperam a estrutura fibrilar nativa do tecido, mantém a estriação transversal das fibrilas colágenas, fragmentam e alteram a distribuição das fibras elásticas e aumentam a espessura do tecido e os espaços interfibrilares em número e tamanho, tomando-o mais poroso. Os tratamentos com GA levam reticulação do tecido com formação de feixes de fibras colágenas e elásticas. Os tratamentos alcalino e ácido provocam desorganização da estrutura nativa do tecido (principalmente colágena), removem lipídeos, células e outros componentes (inclusive fibras elásticas) e também aumentam muito a espessura e as cavidades do tecido. A análise do comportamento mecânico realizada indica que o dioxano não altera significativamente as propriedades de tensão-elongação da matriz nativa e que o GA aumenta muito estas propriedades quando longos períodos de reticulação são utilizados. Em relação a estabilidade biológica, a matriz tratada com dioxano apresentou-se muito mais resistente a digestão pela colagenase do que a nativa e, quando é posteriomente tratada com GA, sua estabilidadebiológica é tão alta quanto do PB reticulado. De todos os resultados obtidos pode-se concluir que o dioxano tem um alto potencial de aplicação, de forma direta ou como meio de reação, em matrizes colagênicas utilizadas como biomateriais e, considerando as características finais que o PB tratado com dioxano apresentou, em relação ao nativo, pode-se dizer que ele tem prováveis chances de aplicação como material para correção plástica em cirurgias (enxertos de tecidos da derme, hipoderme e da bexiga) e suporte para alteração de drogas, enzimas e até células.Natural tissues have been commonly applied as biomaterials on the bioprosthesis manufacture, grafts and implants. Consequently, they are generally submitted to chemical treatments as crosslinking, in order to improve biocompatibility and modify some properties in accordance with practical use. Glutaraldehyde is the most employed as crosslinking reagent due to several advantages, however it showsprejudicial effects of citotoxity and releasing after implant. With the pwpose of finding new kinds of treatment for natural tissues, this work carried out an ahemative treatment for collagenic manices (bovine pericardium=BP), using dimcane organic solvent, associated with alkaline and acid treatments, used in coilagen extraction proceedings. The effects of dioxane on the native matrix structure have been also investigated. The samples utilized were native BP and treated with dioxane, with or without alkaline and acid pre-treatments, and BP crosslinked with GA, with or without dioxane pre-treatment. The samples were evaluated according to: 1) thermal stability, by differential scanning calorimetry (DSC); 2) tissue structure, by electron microscopy (scanning and transmission) and optical (histological examination); 3) mechanical resistance, by mechanical stress-strain assay; and 4) biological stability,by collagenase assay. The thermal resuhs showed an increase of 10ºC inthe thermal stability of BP treated with dioxane compared to the native one (64ºC),while BP treated with glutaraldehyde (GA),with or without dioxane treatment, reached thermal transition of ~16°C higher than the BP native,very significative when compared to standard treatment (18 days in GA), used on BP for cardiac valves confection (~83ºC). These results strongly suggest aherations on the collagenic matrix with simnlUmeous preservation of both the native tissue and the collagen triple-helix structure. The thermal transitions of samples submitted to alkaline and acid treatment occurred at ~56ºC, about 8ºC lower than the native BP, probably due to aherations on the charge distribuition over the collagen molecules and to the breaking of tissue natural crosslinks, with consequent disorganization of the native structure of the BP coilagenic matrix. When these latter samples are submitted to posterior dioxane treatment there were no aherations inthe thermal stability. The structural evaluations show that ail treatments using dioxane make the tissue cleaner in relation to lipids, cells and ground substance than the native one, preserve or recover the native fibrilar structure of the tissue, maintain the characteristic transversal striation of the collagen fibrils, break up and modify the elastic fibers distribution, and magnify the thickness and the interfibrilar gaps of the tissue, in quantity and size, producing a more porous stmcture than the native matrix. The treatments with GA allow the formation of elastic and collagen fiber bundles. The alkaline and acid treatments provoke disorganization of tissue native structure (mainly the collagenic matrix), remove lipids, cells and other tissular components (including elastic fibers) and magnify considerably the thickness and the gaps ofthe tissue. The mechanical behavior analysis performed show that dioxane do not modify significantly the stress-strain properties of the native matrix and the GA treatment increases notably these properties when long periods of cross Hnking are used. With respect to biological properties, the matrix treated with dioxane show a significant increase of resistance to collagenase digestion compared to the native one, and when the treatment is associated with GA the biological stability is as high as BP only crosslinked. The conclusion of the experimental results suggests wide potentialities of dioxane r applied directly or as reaction medium at collagenic matrices used as biomaterials. The characteristics showed by BP treated with dioxane, when compared to the native one, give the indication that this material has probable chances of application for corrective plastic surgeries (grafts of dermis, hypoderm and bladder tissues) and matrix (reservoir) for drugs, enzymes and cells release.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPPlepis, Ana Maria de GuzziForti, Fábio Luís1995-09-19info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75132/tde-15072025-145703/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2025-07-16T14:57:02Zoai:teses.usp.br:tde-15072025-145703Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212025-07-16T14:57:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false |
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Tecidos naturais tem sido muito utilizados como biomateriais na constitutição de biopróteses, em enxertos e implantes. Para isto são geralmente submetidos a tratamentos químicos de reticulação, que induzem a formação de ligações cruzadas entre grupos funcionais das cadeias protéicas através de reagentes específicos, a fim de aumentar sua biocompatibilidade e alterar suas propriedades em função do uso. O tratamento com glutaraldeído é o mais empregado, porém apresenta efeitos prejudiciais como citotoxidade e liberação contínua após implante. Este trabalho traz um tratamento altemativo para matrizes de colágeno (pericárdio bovino=PB) usando o solvente orgânico dioxano, associa este último a um tratamento de reticulação com glutaraldeído (GA) e a tratamentos alcalino e ácido, usados em extração de colágeno solúvel de outros tecidos (tendão e serosa bovina), e também faz uma avaliação dos efeitos provocados por estes tratamentos nas propriedades e estrutura da matriz nativa. As amostras utilizadas foram PB nativo, PB tratado com dioxano, com ou sem pré-tratamento alcalino e/ou ácido e PB reticulado com glutaraldeído (GA), com ou sem pré-tratamento com dioxano. Estas amostras foram avaliadas em termos: 1) estruturais, por calorimetria exploratória diferencial (DSC), microscopia eletrônica (varredura e transmissão) e óptica (avaliação histológica), 3) de resistência mecânica, por ensaio de tração mecânica e 4) de estabilidade biológica ou biodegradabilidade,por ensaio de colagenase. Os resultados térmicos mostraram um aumento de 10ºC na estabilidade térmica do PB tratado com dioxano em relação ao nativo (~64°C), ao passo que o PB tratado com GA, com ou sem dioxano, atingiu transição térmica ~16ºC superior ao nativo, muito representativa em relação ao tratamento padrão (18 dias de GA) usado em PB para confecção de válvulas cardíacas (~83ºC). Estes resultados refletem alterações da matriz colagênica com preservação da estrutura nativa do tecido e da tripla-hélice do colágeno.As amostras submetidas aos tratamentos alcalino e ácido apresentaram transição térmica em ~56ºC, cerca de 8ºC a menos que o PB nativo, devido a alterações na distribuição de carga das moléculas de colágeno e ao rompimento de ligações cruz.adas naturais do tecido, desorganizando a estrutura nativa da matriz colagênica. Quando submetidas posterior tratamento com dioxano não há aumento na estabilidade térmica. Em relação as avaliações estruturais e morfológicas, pode-se dizer que os tratamentos usando dioxano deixam o tecido mais limpo em relação lipídeos, celulas e substância amorfa, preservam e/ou recuperam a estrutura fibrilar nativa do tecido, mantém a estriação transversal das fibrilas colágenas, fragmentam e alteram a distribuição das fibras elásticas e aumentam a espessura do tecido e os espaços interfibrilares em número e tamanho, tomando-o mais poroso. Os tratamentos com GA levam reticulação do tecido com formação de feixes de fibras colágenas e elásticas. Os tratamentos alcalino e ácido provocam desorganização da estrutura nativa do tecido (principalmente colágena), removem lipídeos, células e outros componentes (inclusive fibras elásticas) e também aumentam muito a espessura e as cavidades do tecido. A análise do comportamento mecânico realizada indica que o dioxano não altera significativamente as propriedades de tensão-elongação da matriz nativa e que o GA aumenta muito estas propriedades quando longos períodos de reticulação são utilizados. Em relação a estabilidade biológica, a matriz tratada com dioxano apresentou-se muito mais resistente a digestão pela colagenase do que a nativa e, quando é posteriomente tratada com GA, sua estabilidadebiológica é tão alta quanto do PB reticulado. De todos os resultados obtidos pode-se concluir que o dioxano tem um alto potencial de aplicação, de forma direta ou como meio de reação, em matrizes colagênicas utilizadas como biomateriais e, considerando as características finais que o PB tratado com dioxano apresentou, em relação ao nativo, pode-se dizer que ele tem prováveis chances de aplicação como material para correção plástica em cirurgias (enxertos de tecidos da derme, hipoderme e da bexiga) e suporte para alteração de drogas, enzimas e até células. |
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