Multifuncionalidade na interação da bactéria endofítica Bacillus velezensis BIB0110 com cana-de-açúcar (Saccharum spp.)

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2025
Autor(a) principal: Carvalho, Isabela de
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11138/tde-06112025-170048/
Resumo: O mercado de bioinsumos tem ganhado força no campo por agregar às culturas tecnologias verdes de alta eficiência, de menor custo e toxicidade ambiental, sendo avaliado entre US$ 13 e 15 bilhões em 2023, com uma previsão de crescimento anual entre 13% e 14%, alcançando US$ 45 bilhões até 2032. Nesse cenário, os microrganismos benéficos ganham destaque na formulação de bioprodutos. Ao estabelecerem relação mutualística ou benéfica com o vegetal, esses microrganismos desempenham diversas funções vantajosas, como a proteção de plantas contra ataques de patógenos e promoção de crescimento por meio de diferentes recursos. O Bacillus velezensis linhagem BIB 0110, bactéria endofítica previamente isolada do eucalipto, é forte candidata como ingrediente ativo de formulações comerciais de inoculante, especialmente para culturas de grande valor econômico agregado, como a cana-de-açúcar. Na safra de 2023/2024, a gramínea contou com 713,2 milhões de toneladas de vegetal, porém ainda enfrenta desafios como o elevado custo dos insumos agrícolas tradicionais e ameaças fitossanitárias. Neste trabalho, buscou-se o entendimento detalhado dos mecanismos multifuncionais dessa bactéria endofítica, por meio de sua exploração in silico, in vitro e in vivo. Através da inoculação de BIB0110 em plântulas de cana-de-açúcar, micropropagadas, a dose de 1 x 108 UFC/ vaso se mostrou a mais eficiente, com um aumento percentual significativo de 65,6% na massa seca foliar, 85,7% na massa seca radicular e 46,6% na altura em relação ao controle. Ainda, para as mudas pré-brotadas, a mesma dose levou ao incremento significativo de 47,8% na massa seca foliar e 29,5% na altura em relação ao controle. Nos tecidos vegetais inoculados com o mutante foi verificada a presença do BIB0110::pNKGFP, 30 dias após inoculação, de modo que foi confirmada a capacidade de colonização cruzada dessa linhagem. Adicionalmente, nos testes de antagonismo in vitro entre B. velezensis BIB0110 e o fitopatógeno C. falcatum, foi observada inibição do crescimento micelial em até 67%. Quanto à indução de resistência sistêmica (IRS), a inoculação bacteriana em cana-de-açúcar foi capaz de desencadear esse processo, comprovado pelo aumento médio na concentração das enzimas peroxidase, catalase, fenilalanina amônia-liase e β-1,3 glucanase na porção foliar, de modo análogo ao controle positivo Acibenzolar-S-Metil (ASM). Na presença de C. falcatum em cana-de-açúcar, os efeitos da IRS a partir da aplicação de BIB0110 e ASM também foram observados, uma vez que os parâmetros de crescimento vegetal na presença dos indutores se mostraram melhores em relação ao controle. Finamente, o draft genômico bacteriano obtido anteriormente possibilitou a mineração de genes de interesse agronômico, como os responsáveis pela produção de fitormônios, sideróforos, antibióticos, fixação de nitrogênio e solubilização de fosfato. O desempenho da cana-de-açúcar tratada com BIB0110 reflete, de forma clara, esse valioso arsenal genético. As informações obtidas neste trabalho permitem, portanto, o acesso à multifuncionalidade do BIB0110 e auxiliam em sua bioprospecção para a formulação de novos bioprodutos.
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O Bacillus velezensis linhagem BIB 0110, bactéria endofítica previamente isolada do eucalipto, é forte candidata como ingrediente ativo de formulações comerciais de inoculante, especialmente para culturas de grande valor econômico agregado, como a cana-de-açúcar. Na safra de 2023/2024, a gramínea contou com 713,2 milhões de toneladas de vegetal, porém ainda enfrenta desafios como o elevado custo dos insumos agrícolas tradicionais e ameaças fitossanitárias. Neste trabalho, buscou-se o entendimento detalhado dos mecanismos multifuncionais dessa bactéria endofítica, por meio de sua exploração in silico, in vitro e in vivo. Através da inoculação de BIB0110 em plântulas de cana-de-açúcar, micropropagadas, a dose de 1 x 108 UFC/ vaso se mostrou a mais eficiente, com um aumento percentual significativo de 65,6% na massa seca foliar, 85,7% na massa seca radicular e 46,6% na altura em relação ao controle. Ainda, para as mudas pré-brotadas, a mesma dose levou ao incremento significativo de 47,8% na massa seca foliar e 29,5% na altura em relação ao controle. Nos tecidos vegetais inoculados com o mutante foi verificada a presença do BIB0110::pNKGFP, 30 dias após inoculação, de modo que foi confirmada a capacidade de colonização cruzada dessa linhagem. Adicionalmente, nos testes de antagonismo in vitro entre B. velezensis BIB0110 e o fitopatógeno C. falcatum, foi observada inibição do crescimento micelial em até 67%. Quanto à indução de resistência sistêmica (IRS), a inoculação bacteriana em cana-de-açúcar foi capaz de desencadear esse processo, comprovado pelo aumento médio na concentração das enzimas peroxidase, catalase, fenilalanina amônia-liase e β-1,3 glucanase na porção foliar, de modo análogo ao controle positivo Acibenzolar-S-Metil (ASM). Na presença de C. falcatum em cana-de-açúcar, os efeitos da IRS a partir da aplicação de BIB0110 e ASM também foram observados, uma vez que os parâmetros de crescimento vegetal na presença dos indutores se mostraram melhores em relação ao controle. Finamente, o draft genômico bacteriano obtido anteriormente possibilitou a mineração de genes de interesse agronômico, como os responsáveis pela produção de fitormônios, sideróforos, antibióticos, fixação de nitrogênio e solubilização de fosfato. O desempenho da cana-de-açúcar tratada com BIB0110 reflete, de forma clara, esse valioso arsenal genético. As informações obtidas neste trabalho permitem, portanto, o acesso à multifuncionalidade do BIB0110 e auxiliam em sua bioprospecção para a formulação de novos bioprodutos.The bio-inputs market has gained momentum in agriculture by adding high-efficiency green technologies to crops, with lower cost and environmental toxicity. It was valued between USD 13 and 15 billion in 2023, with projected annual growth of 13% to 14%, expected to reach USD 45 billion by 2032. In this context, beneficial microorganisms stand out in the formulation of bioproducts. By establishing mutualistic or beneficial relationships with plants, these microorganisms perform a range of advantageous functions, such as protecting plants from pathogen attacks and promoting growth through various mechanisms. The Bacillus velezensis strain BIB 0110, an endophytic bacterium previously isolated from eucalyptus, is a strong candidate as an active ingredient in commercial inoculant formulations, especially for crops of high economic value like sugarcane. In the 2023/2024 season, sugarcane production reached 713.2 million tons, yet it still faces challenges such as the high cost of traditional agricultural inputs and phytosanitary threats. This study aimed to gain a detailed understanding of the multifunctional mechanisms of this endophytic bacterium through in silico, in vitro, and in vivo analyses. Through inoculation of BIB0110 in micropropagated sugarcane seedlings, the dose of 1 x 108 CFU/pot proved most effective, resulting in a significant increase of 65.6% in shoot dry mass, 85.7% in root dry mass, and 46.6% in height compared to the control. In pre-sprouted seedlings, the same dose led to a significant increase of 47.8% in shoot dry mass and 29.5% in height compared to the control. The presence of BIB0110::pNKGFP was detected in inoculated plant tissues, 30 days after inoculation, so that the cross-colonization capacity of this strain was confirmed. Additionally, in in vitro antagonism tests between B. velezensis BIB0110 and the phytopathogen C. falcatum, up to 67% inhibition of mycelial growth was observed. Regarding the induction of systemic resistance (ISR), bacterial inoculation in sugarcane was able to trigger this process, as confirmed by an average increase in the concentration of the enzymes peroxidase, catalase, phenylalanine ammonia-lyase, and β-1,3 glucanase in the leaf tissue, similar to the positive Acibenzolar-S-Methyl (ASM) control. In the presence of C. falcatum in sugarcane, the effects of ISR through application of BIB0110 and ASM were also observed, as the plant growth parameters in the presence of the inducers outperformed the control. Finally, the previously obtained bacterial genome draft enabled the mining of genes of agronomic interest, such as those responsible for the production of phytohormones, siderophores, antibiotics, nitrogen fixation, and phosphate solubilization. The performance of sugarcane treated with BIB0110 clearly reflects this valuable genetic arsenal. The insights gained in this study thus provide access to the multifunctionality of BIB0110 and support its bioprospecting for the formulation of new bioproducts.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPVerdi, Maria Carolina QuecineCarvalho, Isabela de2025-08-26info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11138/tde-06112025-170048/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2025-11-07T12:08:02Zoai:teses.usp.br:tde-06112025-170048Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212025-11-07T12:08:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
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