Investigação virológica em mosquitos (Diptera: Culicidae) na região metropolitana da cidade de São Paulo e efeito da infecção por Zika vírus na atividade locomotora de Aedes aegypti e Aedes albopictus em condições de laboratório

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2025
Autor(a) principal: Andrade, Pâmela dos Santos
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/6/6143/tde-17062025-163233/
Resumo: Mosquitos do gênero Aedes, como Aedes aegypti e Aedes albopictus, são vetores de diversos arbovírus, incluindo dengue (DENV), Zika (ZIKV), chikungunya (CHIKV) e febre amarela urbana (YFV), sendo responsáveis por significativos impactos à saúde pública global. Entre esses arbovírus, ZIKV se destaca por sua transmissão vertical e sexual em humanos, associada a complicações graves, como a síndrome congênita e a síndrome de Guillain-Barré. Além dos arbovírus, os mosquitos também abrigam vírus específicos de insetos (ISVs), muitos dos quais ainda são desconhecidos e podem influenciar a infecção por patógenos de relevância para a saúde pública. Assim, compreender a diversidade viral em mosquitos e os efeitos do ZIKV no comportamento desses vetores é essencial para o avanço da vigilância e controle. Este trabalho investigou a diversidade de vírus de RNA em populações de mosquitos coletados na região metropolitana de São Paulo e avaliou o impacto da infecção pelo ZIKV na atividade locomotora de fêmeas de Ae. aegypti e Ae. albopictus em condições laboratoriais. Os mosquitos foram coletados na Serra da Cantareira e em parques urbanos. As coletas ocorreram em diferentes estações do ano, utilizando puçá, aspirador de Nasci e armadilhas CDC. Os espécimes foram identificados e armazenados em ultrafreezer. A detecção de vírus dos gêneros Orthoflavivirus e Alphavirus foi feita por transcrição reversa, seguida de reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-qPCR). Além disso, a metagenômica SMART-9N foi empregada para a caracterização de viroma em pools selecionados de mosquitos. Para investigar a atividade locomotora, fêmeas inseminadas de Ae. aegypti e Ae. albopictus foram infectadas com vírus Zika por injeção intratorácica ou por alimentação oral. A atividade locomotora dessas fêmeas foi acompanhada por monitores de atividade específicos, sob 12 horas de claro e 12 horas de escuro, a 25°C. Ao final dos experimentos, todas as fêmeas tiveram sua infecção confirmada por RT-qPCR. Os dados foram tabulados e analisados estatisticamente por meio de modelos lineares mistos generalizados (GLMMs). Detectamos, pela primeira vez na América Latina, o Wenzhou Sobemo-like virus 4 em populações de Ae. albopictus e identificamos uma ampla diversidade de ISVs em mosquitos coletados em paisagens urbanas e silvestres. A avaliação comportamental revelou que o ZIKV não altera significativamente a atividade locomotora de Ae. albopictus, independentemente do método de infecção (oral ou intratorácica). Por outro lado, Ae. aegypti apresentou redução da atividade diurna após infecção oral, enquanto a infecção intratorácica resultou em um aumento geral da atividade locomotora. Esses achados destacam a complexidade das interações entre vírus e vetores, com implicações para a ecologia e para as estratégias de controle de arbovírus. Além disso, ressaltam a importância de estudar os ISVs como potenciais moduladores de infecções arbovirais e os impactos da infecção pelo ZIKV no comportamento de mosquitos em diferentes cenários experimentais.
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Entre esses arbovírus, ZIKV se destaca por sua transmissão vertical e sexual em humanos, associada a complicações graves, como a síndrome congênita e a síndrome de Guillain-Barré. Além dos arbovírus, os mosquitos também abrigam vírus específicos de insetos (ISVs), muitos dos quais ainda são desconhecidos e podem influenciar a infecção por patógenos de relevância para a saúde pública. Assim, compreender a diversidade viral em mosquitos e os efeitos do ZIKV no comportamento desses vetores é essencial para o avanço da vigilância e controle. Este trabalho investigou a diversidade de vírus de RNA em populações de mosquitos coletados na região metropolitana de São Paulo e avaliou o impacto da infecção pelo ZIKV na atividade locomotora de fêmeas de Ae. aegypti e Ae. albopictus em condições laboratoriais. Os mosquitos foram coletados na Serra da Cantareira e em parques urbanos. As coletas ocorreram em diferentes estações do ano, utilizando puçá, aspirador de Nasci e armadilhas CDC. Os espécimes foram identificados e armazenados em ultrafreezer. A detecção de vírus dos gêneros Orthoflavivirus e Alphavirus foi feita por transcrição reversa, seguida de reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-qPCR). Além disso, a metagenômica SMART-9N foi empregada para a caracterização de viroma em pools selecionados de mosquitos. Para investigar a atividade locomotora, fêmeas inseminadas de Ae. aegypti e Ae. albopictus foram infectadas com vírus Zika por injeção intratorácica ou por alimentação oral. A atividade locomotora dessas fêmeas foi acompanhada por monitores de atividade específicos, sob 12 horas de claro e 12 horas de escuro, a 25°C. Ao final dos experimentos, todas as fêmeas tiveram sua infecção confirmada por RT-qPCR. Os dados foram tabulados e analisados estatisticamente por meio de modelos lineares mistos generalizados (GLMMs). Detectamos, pela primeira vez na América Latina, o Wenzhou Sobemo-like virus 4 em populações de Ae. albopictus e identificamos uma ampla diversidade de ISVs em mosquitos coletados em paisagens urbanas e silvestres. A avaliação comportamental revelou que o ZIKV não altera significativamente a atividade locomotora de Ae. albopictus, independentemente do método de infecção (oral ou intratorácica). Por outro lado, Ae. aegypti apresentou redução da atividade diurna após infecção oral, enquanto a infecção intratorácica resultou em um aumento geral da atividade locomotora. Esses achados destacam a complexidade das interações entre vírus e vetores, com implicações para a ecologia e para as estratégias de controle de arbovírus. Além disso, ressaltam a importância de estudar os ISVs como potenciais moduladores de infecções arbovirais e os impactos da infecção pelo ZIKV no comportamento de mosquitos em diferentes cenários experimentais.Mosquitoes of the Aedes genus, such as Aedes aegypti and Aedes albopictus, are vectors of various arboviruses, including dengue (DENV), Zika (ZIKV), chikungunya (CHIKV) and urban yellow fever (YFV), and are responsible for significant impacts on global public health. Among these arboviruses, ZIKV stands out for its vertical and sexual transmission in humans, associated with serious complications such as congenital syndrome and Guillain-Barré syndrome. In addition to arboviruses, mosquitoes also harbor insect-specific viruses (ISVs), many of which are still unknown and may influence infection by pathogens of public health relevance. Thus, understanding viral diversity in mosquitoes and the effects of ZIKV on the behavior of these vectors is essential for advancing surveillance and control. This study investigated the diversity of RNA viruses in mosquito populations collected in the metropolitan region of São Paulo and assessed the impact of ZIKV infection on the locomotor activity of Ae. aegypti and Ae. albopictus females under laboratory conditions. The mosquitoes were collected in the Serra da Cantareira and in urban parks. The mosquitoes were collected in different seasons of the year, using the Nasci aspirator and CDC traps. The specimens were identified and stored in an ultrafreezer. Viruses of the Orthoflavivirus and Alphavirus genera were detected by reverse transcription followed by real-time polymerase chain reaction (RT-qPCR). In addition, SMART-9N metagenomics was used to characterize viromes in selected mosquito pools. To investigate locomotor activity, inseminated females of Ae. aegypti and Ae. albopictus were infected with Zika virus by intrathoracic injection or by oral feeding. The locomotor activity of these females was monitored by specific activity monitors, under 12 hours of light and 12 hours of dark, at 25°C. At the end of the experiments, all the females had their infection confirmed by RT-qPCR. The data was tabulated and statistically analyzed using generalized linear mixed models (GLMMs). We detected, for the first time in Latin America, Wenzhou Sobemo-like virus 4 in Ae. albopictus populations and identified a wide diversity of ISVs in mosquitoes collected in urban and wild landscapes. Behavioral assessment revealed that ZIKV does not significantly alter the locomotor activity of Ae. albopictus, regardless of the method of infection (oral or intrathoracic). On the other hand, Ae. aegypti showed reduced diurnal activity after oral infection, while intrathoracic infection resulted in a general increase in locomotor activity. These findings highlight the complexity of the interactions between viruses and vectors, with implications for the ecology and control strategies of arboviruses. In addition, they highlight the importance of studying ISVs as potential modulators of arboviral infections and the impacts of ZIKV infection on mosquito behavior in different experimental settings.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPCamara, Tamara Nunes de LimaAndrade, Pâmela dos Santos2025-04-11info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/6/6143/tde-17062025-163233/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2025-06-17T19:37:02Zoai:teses.usp.br:tde-17062025-163233Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212025-06-17T19:37:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
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