Transmissão do estresse de retículo através de vesículas extracelulares de células tumorais para células endoteliais: efeitos na angiogênese e na ativação endotelial

• Ano de defesa: 2025
• Autor(a) principal: Yamagata, Ana Sayuri
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Acidose; Acidosis; Cancer; Câncer; Células Endoteliais; Endoplasmic Reticulum Stress; Endothelial Cells; Estresse De Retículo Endoplasmático; Extracellular Vesicles; Vesículas Extracelulares
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42134/tde-09052025-105811/

A metástase é a maior causa de morte de pacientes de câncer de mama. Para colonizar um local distante, as células tumorais aumentam a permeabilidade endotelial e estimulam a angiogênese. Vesículas extracelulares (EVs) são meios de comunicação entre células, e EVs tumorais podem favorecer a metastáse. O conteúdo das EVs é modulado pelas condições fisiológicas das células de origem. No microambiente tumoral, as células tipicamente vivem em acidose extracelular e sofrem estresse de retículo endoplasmático. O objetivo é investigar se EVs liberadas por células tumorais em resposta ao estresse de retículo endoplasmático (RE) ou adapação à acidose alteram a adesão a células endoteliais, a permeabilidade endotelial e a angiogênese. O estresse de RE foi induzido em células de câncer de mama MDA-MB-231 com tunicamicina, e a adaptação à acidose foi feita por cultivo em pH 6,5 por 30 dias. Vesículas extracelulares grandes (LEV) das células nestas condições foram isoladas por centrifugação diferencial. As LEV foram caracterizadas por análise de rastreamento de nanopartículas (NTA), immunogold, Western blot e cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). Foram avaliados os marcadores de estresse de RE e de autofagia por Western blot, a adesão de células tumorais nas células endoteliais, a permeabilidade por difusão de dextran em modelo organ-on-a-chip (OOC), a migração por ensaio de ferida e a angiogênese por e ensaio de formação de tubo. Tunicamicina não foi detectada em LEV de células tratadas com tunicamicina (LEV T). LEV T não induziu estresse de RE, não alterou adesão a células endoteliais, nem angiogênese, mas aumentou a permeabilidade em relação ao controle sem EVs e a migração de células endoteliais em relação às EVs controle LEV C. As células adaptadas à acidose não possuiam maior ativação da resposta a proteínas mal-enoveladas (unfolded protein response; UPR), mas as suas LEVs (LEV 6.5) induziram estresse de RE, reduziram adesão a células endoteliais e angiogênese, e aumentaram permeabilidade e migração. Apesar de não termos observado transmissão de estresse de RE através de EVs, concluimos que estas EVs facilitaram processos importantes para a metástase.